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公开(公告)号:CN117757752A
公开(公告)日:2024-03-26
申请号:CN202311869243.4
申请日:2023-12-31
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达PRRSV次要结构蛋白的Marc‑145细胞系,该PRRSV次要结构蛋白包括GP2a、GP3、GP4、或ORF5a蛋白。本发明还公开了Marc‑145细胞系的制备方法,包括以下步骤:将猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的次要结构蛋白DNA序列克隆到具有嘌呤霉素抗性的慢病毒载体上,应用慢病毒三质粒包装系统在293T细胞包装慢病毒,然后感染Marc‑145细胞,用嘌呤霉素选择性筛选,挑选单克隆细胞纯化,得到稳定表达次要结构蛋白的Marc‑145细胞株,所述次要结构蛋白选自下述任意一个:PRRSV次要结构蛋白GP2a、GP3、GP4、或ORF5a蛋白。本发明的Marc‑145细胞系,可用于PRRSV复制缺陷型疫苗的研发与筛选,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN115850405B
公开(公告)日:2024-02-02
申请号:CN202211597189.8
申请日:2022-12-12
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C07K14/245 , C12N15/74 , A61K39/108 , A61P31/04 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种抗原融合蛋白及其在制备疫苗中的应用,所提供的融合多肽包含有氨基酸序列为SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3中的任一个或几个。本发明还提供重组菌株,所述的重组菌株用于重组表达上述的融合多肽。本发明提供的用于重组表达融合多肽的重组乳酸乳球菌能够用于制备疫苗,从而使免疫动物能够(56)对比文件Dana Rausch等.Antibodies derived froma toxoid MEFA (multiepitope fusionantigen) show neutralizing activitiesagainst heat-labile toxin (LT), heat-stable toxins (STa, STb), and Shiga toxin2e (Stx2e) of porcine enterotoxigenicEscherichia coli (ETEC)《.VeterinaryMicrobiology》.2017,第202卷第79-89页.杨雨晴.ETEC 987P、K88重组干酪乳杆菌的构建及免疫效力评价《.中国优秀硕士学位论文全文数据库》.2021,农业科技专辑(2021年第09期),全文.Qiangde Duan等.A multivalent vaccinecandidate targeting enterotoxigenicEscherichia coli fimbriae for broadlyprotecting against porcine post-weaningdiarrhea《.Veterinary Research》.2020,第51卷(第03期),第93篇.GenBank.WP_169030132.1: type 1fimbrial protein [Escherichia coli].《GenBank》.2020,标题、PROTEIN、CDS、ORIGIN部分.GenBank.EFH8827684.1: fimbrialprotein, partial [Escherichia coli].《GenBank》.2020,标题、PROTEIN、CDS、ORIGIN部分.郭乐、李敏、王玉炯.产肠毒素性大肠杆菌疫苗研究概况《.中国猪业》.2009,第04卷(第01期),第50-53页.王欣等.产肠毒素大肠埃希菌K99-987P-F41融合蛋白在小鼠体内免疫效果的评价《.中国生物制品学杂志》.2016,第29卷(第09期),第897-902页.
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公开(公告)号:CN112708658A
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN202110107734.X
申请日:2021-01-27
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/6837 , C12Q1/689 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及分子鉴定领域,特别是涉及一种多重耐药基因检测的液态芯片引物组及其应用。本发明利用所述引物组进行多重PCR同时检测9种耐药基因时,9组引物对之间无交叉反应,特异性好、灵敏度高,具有高通量、高速度、低成本、灵敏度高、特异性好、重复性好和线性范围广的优点,在耐药基因的检测应用方面有较大的前景;且在PCR扩增后,不需要对PCR产物进行处理,可直接与微球杂交,节省了时间,简化了工艺。
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公开(公告)号:CN105986029A
公开(公告)日:2016-10-05
申请号:CN201510234801.9
申请日:2015-05-11
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明涉及一种鉴定猪源食源菌大肠埃希氏菌O157、非O157大肠埃希氏菌、志贺氏菌、沙门氏菌和小肠结肠耶尔森氏菌和金黄色葡萄球菌食源菌的液态芯片方法,该方法是以提取待测细菌DNA为模板,用SEQ ID NO.1-12所示的6对引物进行多重PCR扩增,扩增产物在与微球杂交后在Luminex 200仪器上检测,根据检测数值判定结果。本发明利用所合成的引物建立的液态芯片方法,可以在一个检测体系中检测出5种不同的可致食物中毒的食源菌,与在动物性食品微生物检验中传统的分离培养后进行生化、血清学试验的3-7天时间比仅需要18-24小时左右,大大缩短了检测时间,节省了人力物力,用于动物性产品食源菌污染检测的高通量的方法,在猪源动物产品污染食源菌溯源方面有重要意义,为餐桌上的安全提供保障。
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公开(公告)号:CN119464522A
公开(公告)日:2025-02-18
申请号:CN202411559679.8
申请日:2024-11-04
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q1/6837 , C12N15/11 , C12R1/445 , C12R1/385 , C12R1/46 , C12R1/19 , C12R1/185 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,尤其涉及一种可同时检测生鲜乳中17种耐药基因的液相芯片方法。本发明提供了一种同时快速检测生鲜乳中17种耐药基因的核酸组合物,包括17种引物和探针序列。本发明提供的高通量的检测方法,可以快速锁定生鲜乳中常见耐药基因,为耐药基因沿生产链持续传播风险的及时阻控提供参考,并为奶牛乳房炎的诊治提供有效的临床用药指导。该方法具有需样本量少、快速、灵敏度高、线性范围广、重复性好、综合检测成本低等优点。
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公开(公告)号:CN118562743A
公开(公告)日:2024-08-30
申请号:CN202410605341.5
申请日:2024-05-16
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明提供了一种多重耐药沙门菌噬菌体SAPL‑5、组合物及其应用,属于噬菌体技术领域。本发明所述噬菌体SAPL‑5的保藏编号为CCTCC M2024547。本发明所述噬菌体SAPL‑5裂解谱较宽,能够裂解多种动物来源多种血清型沙门菌,环境耐受能力强,无毒副作用,不含耐药基因和毒力基因等毒害因子。实验结果表明,噬菌体SPAL‑5对感染多重耐药沙门菌的动物有治疗效果;噬菌体SAPL‑5和抗菌药具有联合协同抑菌能力,不仅避免单一使用噬菌体或抗菌药导致的抗性菌,还可降低抗菌药的最低抑菌浓度(MIC),减少抗菌药的使用量,在兽用抗菌药减量使用中有较大的应用前景。
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公开(公告)号:CN116555196A
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202310702546.0
申请日:2023-06-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N7/04 , C12N15/34 , C12N15/40 , C07K14/01 , C12N15/86 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株,包含猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的基因组核酸,在该HuN4‑F112基因组的ORF1b和ORF2a之间插入有猪圆环病毒2型PCV2的Cap蛋白基因表达序列,该PCV2的Cap蛋白基因表达序列为编码SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的核苷酸序列。本发明还公开了一种上述表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株的制备方法和应用。本发明的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株,不仅能够稳定表达PCV2的Cap蛋白,而且具有遗传稳定性,该疫苗株免疫健康仔猪后能够刺激猪体产生高水平的PCV2特异性ELISA抗体,有望成为安全有效的猪繁殖与呼吸综合征与猪圆环病毒病的二联疫苗。
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公开(公告)号:CN115851614A
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202111115249.3
申请日:2021-09-23
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒复制缺陷型疫苗株,所述疫苗株包含猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的基因组核酸突变体,该突变体是将HuN4‑F112基因组的E蛋白基因突变使该E蛋白不表达。本发明的复制缺陷型疫苗株,首先在PRRSV弱毒疫苗株HuN4‑F112感染性分子克隆的基础上构建E蛋白缺失复制子,同时构建一种稳定表达PRRSV E蛋白的细胞系;然后将E蛋白缺失复制子载体线性化并且体外转录成病毒RNA,转染到稳定表达PRRSV E蛋白的细胞系中,成功进行病毒拯救,获得了PRRSV复制缺陷型疫苗株,该疫苗株能有效解决PRRSV灭活疫苗不能诱导细胞免疫、免疫效果差等缺点,同时解决PRRSV弱毒疫苗的安全性问题,为PRRSV的防控与净化提供一种安全有效的新型PRRSV活疫苗,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN112708658B
公开(公告)日:2022-07-15
申请号:CN202110107734.X
申请日:2021-01-27
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/6837 , C12Q1/689 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及分子鉴定领域,特别是涉及一种多重耐药基因检测的液态芯片引物组及其应用。本发明利用所述引物组进行多重PCR同时检测9种耐药基因时,9组引物对之间无交叉反应,特异性好、灵敏度高,具有高通量、高速度、低成本、灵敏度高、特异性好、重复性好和线性范围广的优点,在耐药基因的检测应用方面有较大的前景;且在PCR扩增后,不需要对PCR产物进行处理,可直接与微球杂交,节省了时间,简化了工艺。
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公开(公告)号:CN116496994A
公开(公告)日:2023-07-28
申请号:CN202310170285.2
申请日:2023-02-27
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12N7/00 , A61K35/76 , A61P31/04 , A23L3/3571 , C12R1/92
Abstract: 本发明提供了一种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的噬菌体、组合物及其应用,属于噬菌体技术领域。本发明提供的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的噬菌体为噬菌体MX‑6(保藏编号为CCTCCNO.M2023029)或噬菌体ML‑1337(保藏编号为CCTCCNO.M2023028)。本发明分离得到的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌噬菌体,具有裂解谱宽、适应能力强、不含耐药基因和毒力基因、动物实验安全、无毒副作用的优势,对MRSA感染动物有一定的治疗效果。将本发明噬菌体与抗菌药联合使用,具有联合协同杀菌和/或抑菌能力,能够对多重耐药MRSA具有明显的杀菌和/或抑菌效果,且可降低抗菌药的最低抑菌浓度,减少抗菌药的使用量。
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