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公开(公告)号:CN119979613A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202510154039.7
申请日:2025-02-12
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达猪源PIgR SC片段和J链的细胞系及其构建方法和应用,属于基因工程技术领域。所述构建方法包括:把猪源PIgR的SC片段基因和J链基因的编码序列插入慢病毒载体质粒,得到PIgR的SC片段和J链过表达的慢病毒载体质粒;将所述慢病毒载体质粒与PSPAX2和PMD2.G质粒共转染,得到重组慢病毒;将所述重组慢病毒侵染细胞,得到阳性细胞后进行扩大培养,得到所述稳定表达猪源PIgR的SC片段和J链的细胞系。本发明构建了稳定表达猪PIgR的SC片段和J链的细胞系,使基因工程技术制备SIgA抗体快捷高效。
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公开(公告)号:CN119979607A
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202510190001.5
申请日:2025-02-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种稳定传代的重组口蹄疫病毒毒株及构建方法和应用,属于生物医药技术领域。本发明根据宿主细胞KRT31蛋白对FMDV的复制抑制性,通过在L蛋白中引入点突变,消除KRT31蛋白降解L蛋白及抑制FMDV复制的能力。本发明成功构建并拯救了L蛋白关键氨基酸位点突变的重组口蹄疫病毒株,突变位点能稳定遗传,且不影响口蹄疫病毒的复制,提高了病毒滴度,具有良好的生产性能,可用于制备重组口蹄疫疫苗株。
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公开(公告)号:CN119950676A
公开(公告)日:2025-05-09
申请号:CN202510314546.2
申请日:2025-03-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及抗菌肽WK‑13‑3D在制备抑制日本脑炎病毒感染药物中的应用。本发明意外发现抗菌肽WK‑13‑3D可剂量依赖性地显著降低JEV RNA的产生、抑制JEV非结构蛋白NS3的表达、显著降低感染性JEV的产量、抑制JEV粘附宿主细胞、抗病毒活性的IC50值为2.339μM,能够抑制日本脑炎病毒的感染,可作为治疗日本脑炎病毒感染的药物,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN119876048A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202411766754.8
申请日:2024-12-03
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种单周期复制缺陷型重组猫杯状病毒(Feline Calicivirus,FCV)及其构建方法和应用,属于生物医药技术领域。所述的单周期复制缺陷型重组猫杯状病毒是在猫杯状病毒VS‑FCV HBDL2株的基础上,通过缺失其VP2基因19nt‑48nt之间的核苷酸序列获得的,命名为rHBDL2△VP219‑48。研究发现,该重组病毒rHBDL2△VP219‑48仅能够在基因工程改造细胞系中生长,具有良好的安全性。此外,该重组病毒rHBDL2△VP219‑48在猫体内展现良好的免疫原性,可以诱导机体产生高水平针对高致病性FCV毒株的中和抗体,因此可作为弱候选疫苗株用于预防高致病性FCV毒株(VS‑FCV)感染,从而解决现有疫苗不能有效预防VS‑FCV毒株感染的问题。
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公开(公告)号:CN119859619A
公开(公告)日:2025-04-22
申请号:CN202510083443.X
申请日:2025-01-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明属于基因工程领域,具体涉及一株NS1微管上携带绿色荧光蛋白的重组蓝舌病毒、构建方法及应用。本发明在野生型蓝舌病毒非结构蛋白NS1的第534和535位氨基酸之间插入增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因,构建获得了NS1重组蓝舌病毒BTV‑NS1‑534eGFP;所述重组蓝舌病毒BTV1‑NS1‑534eGFP能形成与野生型蓝舌病毒(BTV1‑WT)相似的病毒样微管,与BTV1‑WT的生长特性没有明显区别,并且能够正确表达增强型绿色荧光蛋白;可用于BTV感染细胞后NS1蛋白的示踪研究,同时可用于BTV的病毒中和实验及病毒含量的可视化定量检测等。
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公开(公告)号:CN118813550B
公开(公告)日:2025-04-22
申请号:CN202411177779.4
申请日:2024-08-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/543 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种杂交瘤细胞,其微生物保藏编号为CCTCC NO:C2024215。本发明还公开了一种bELISA方法,其核心步骤为:用非洲猪瘟病毒P22蛋白包被微孔板底面,将待检血清添加到微孔板,用辣根过氧化物酶标记的前述杂交瘤细胞分泌的抗非洲猪瘟病毒P22蛋白单克隆抗体孵育微孔板,向微孔板中加入用TMB底物显色液,测定OD450nm值来判断待检血清中是否含有抗非洲猪瘟病毒P22蛋白抗体。该方法特异性强,敏感性高,可用于非洲猪瘟病毒抗体检测,具备临床应用前景。
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公开(公告)号:CN119842769A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510093881.4
申请日:2025-01-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/70 , C12N15/27 , C07K14/53 , C12N5/0786 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种重组猫巨噬细胞集落刺激因子的原核表达质粒及其构建方法和应用,所述原核表达质粒的构建方法包括以下步骤:将合成的猫巨噬细胞集落刺激因子基因克隆至PUC57质粒中,得到PUC57‑FM‑CSF质粒;然后以合成的PUC57‑FM‑CSF质粒为模板,采用去除信号肽序列的位置设计的同源重组的引物进行PCR扩增,扩增得到的目的基因纯化后亚克隆至原核表达载体的相应位点中,再转化DH5α感受态细胞,即得。本发明首次成功构建了包含猫M‑CSF基因的质粒并在原核表达系统中获得高效表达,表达的重组蛋白纯化后显示了较高生物学活性,将为进一步研究猫M‑CSF的结构与生物学功能等提供稳定的体外研究平台,具有重大的研究意义以及临床应用价值。
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公开(公告)号:CN119792280A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202510038950.1
申请日:2025-01-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: A61K31/4184 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种化合物AJ2‑30在制备抗病毒药物中的应用。本发明意外发现,在培养ASFV的培养基中加入化合物AJ2‑30,能够使ASFV的复制水平降低,表明化合物AJ2‑30具有抑制ASFV复制的作用,可用于制备抗ASFV感染的药物或佐剂,用于抑制ASFV的复制,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN117987572B
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202311803754.6
申请日:2023-12-26
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明的目的是提供一种弯曲菌、沙门菌及金黄色葡萄球菌的多重数字PCR检测方法,从而更方便、快捷、准确的通过一次检测反应来检测三种致病菌。所述的引物和探针组,其中用于检测弯曲菌的引物对,其上下游引物的序列为SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2,探针的序列为SEQ ID NO:3;用于检测沙门菌的引物对,其上下游引物的序列为SEQ ID NO:4和SEQ ID NO:5,探针的序列为SEQ ID NO:6;用于检测金黄色葡萄球菌的引物对,其上下游引物的序列为SEQ ID NO:7和SEQ ID NO:8,探针的序列为SEQ ID NO:9。
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公开(公告)号:CN119753237A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202510199552.8
申请日:2025-02-24
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种尼帕病毒Taqman探针荧光定量PCR检测试剂盒及其应用,通过设计尼帕病毒的特异性引物及对应的荧光探针,之后利用已知病毒基因组序列选取病毒的保守基因序列,利用基因克隆技术构建含有该保守基因序列的标准重组质粒,接着在对重组质粒进行鉴定后,制备了质粒标准品,进而获得标准曲线,并对PCR方法的灵敏度、特异性和重复性进行了评估,最后将荧光定量PCR反应体系形成检测试剂盒。所述试剂盒检测操作简单、高效,可实现尼帕病毒的快速检测,且具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点,可在临床核酸样品检测中广泛应用。
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