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公开(公告)号:CN117757752A
公开(公告)日:2024-03-26
申请号:CN202311869243.4
申请日:2023-12-31
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种稳定表达PRRSV次要结构蛋白的Marc‑145细胞系,该PRRSV次要结构蛋白包括GP2a、GP3、GP4、或ORF5a蛋白。本发明还公开了Marc‑145细胞系的制备方法,包括以下步骤:将猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的次要结构蛋白DNA序列克隆到具有嘌呤霉素抗性的慢病毒载体上,应用慢病毒三质粒包装系统在293T细胞包装慢病毒,然后感染Marc‑145细胞,用嘌呤霉素选择性筛选,挑选单克隆细胞纯化,得到稳定表达次要结构蛋白的Marc‑145细胞株,所述次要结构蛋白选自下述任意一个:PRRSV次要结构蛋白GP2a、GP3、GP4、或ORF5a蛋白。本发明的Marc‑145细胞系,可用于PRRSV复制缺陷型疫苗的研发与筛选,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN112062831A
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN202010629062.4
申请日:2020-07-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/705 , C07K16/28 , C07K16/06 , A61K39/395 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一株CD163蛋白单克隆抗体MAb的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将CD163对于PRRSV复制具有重要作用的功能结构域SRCR5‑6克隆到pColdI载体中,构建出原核表达载体中携带His标签的CD163 SRCR5‑6的蛋白,纯化SRCR5‑6蛋白免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞同和制备杂交瘤细胞获得抗猪CD163蛋白的单克隆抗体,且对抗体进行了表位鉴定。
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公开(公告)号:CN108753739A
公开(公告)日:2018-11-06
申请号:CN201810627238.5
申请日:2018-06-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/01 , A61K39/245 , A61P31/22 , A61K39/187 , A61P31/14
CPC classification number: C12N7/00 , A61K39/12 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , A61P31/14 , A61P31/22 , C07K14/005 , C12N2710/16721 , C12N2710/16734 , C12N2770/24322 , C12N2770/24334
Abstract: 本发明公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株,其插入的外源序列包括:CMV启动子、猪瘟病毒E2蛋白的信号肽及编码E2蛋白第1‑342位氨基酸和SV40 polyA的核苷酸序列。本发明还公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株的制备方法和应用。本发明的重组伪狂犬病毒弱毒株,对伪狂犬病毒及猪瘟病毒均有较好的免疫保护效果,适于作为防治伪狂犬病及猪瘟的疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN116444653B
公开(公告)日:2024-03-15
申请号:CN202310221544.X
申请日:2023-03-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/08 , C07K14/01 , C12N15/13 , C12N15/70 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一株阻断性非洲猪瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备与应用,确定了该株单抗的可变区序列。该株单抗,可用于IFA,识别真核细胞中表达的p30蛋白;也可用于western blotting,识别变性的p30蛋白。特别的是,ASFV阳性猪血清能抑制该株单抗与p30蛋白结合,显示该株单抗可用于建立p30抗体竞争ELISA检测方法。
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公开(公告)号:CN111228464A
公开(公告)日:2020-06-05
申请号:CN202010129677.0
申请日:2020-02-28
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: A61K38/17 , A61K31/7105 , A61K31/436 , A61K33/30 , A61K38/18 , A61P31/14 , A61P11/00 , C07K14/47
Abstract: 提供一种基于PABPC4蛋白的具有广谱抗冠状病毒的药物。基于PABPC4蛋白能够结合并降解多种冠状病毒的N蛋白,PABPC4基因的过表达能够抑制冠状病毒的复制和繁殖,SP1转录因子直接调控PABPC4基因的转录,PABPC4蛋白与MARCH8和NDP52相互作用从而通过PABPC4-MARCH8-NDP52选择性自噬途径降解冠状病毒N蛋白的作用机制,本发明提供了广谱抗冠状病毒或治疗多种冠状病毒包括2019新型冠状病毒引起的疾病的药物。
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公开(公告)号:CN110904153A
公开(公告)日:2020-03-24
申请号:CN201911159891.4
申请日:2019-11-23
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)p12蛋白或者p17蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法,以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗及构建方法。对rPRRSV-p12和rPRRSV-p17感染孔进行间接免疫荧光,发现视野下出现了抗PRRSV N蛋白的特异性荧光及抗ASFV p12蛋白或p17蛋白的特异性荧光。说明该表达非洲猪瘟病毒p12蛋白或p17蛋白的重组PRRSV可以保证外源蛋白ASFV的p12或p17蛋白得到良好的高效的稳定的表达。而有研究表明p12和p17都是重要的抗原蛋白,能够用于ASF的疫苗研制。
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公开(公告)号:CN110628817A
公开(公告)日:2019-12-31
申请号:CN201910889362.3
申请日:2019-09-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)p30蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法,以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗及构建方法。对rPRRSV-p30感染孔进行间接免疫荧光,发现视野下出现了抗PRRSV N蛋白的特异性荧光及抗ASFV p30蛋白的特异性荧光。收取rPRRSV-p30的感染孔的蛋白样品,对其进行western blot,结果发现出现了预期大小的p30条带。说明该表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组PRRSV可以保证外源蛋白ASFV的p30蛋白得到良好的高效的稳定的表达。而有研究表明p30是重要的抗原蛋白,能够用于ASF的疫苗研制。
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公开(公告)号:CN119158007A
公开(公告)日:2024-12-20
申请号:CN202410799367.8
申请日:2024-06-20
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了表达白细胞介素‑15和白细胞介素‑18的重组PRRSV基因工程活载体疫苗及其应用。本发明提供的pPRRSV‑IL15‑Y和pPRRSV‑IL18‑Y这2个重组质粒转染MARC‑145细胞后,成功拯救出活病毒,与亲本病毒vHuN4‑F112具有相似的病毒学特性。将两株重组病毒进行猪体免疫实验,发现两种重组病毒对猪体均具有良好的安全性,免疫后可以有效诱导机体产生免疫应答,产生高水平的针对PRRSV N蛋白的抗体,而且可以诱导更高的细胞免疫水平,是一种良好的基因工程疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN118846023A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202410799352.1
申请日:2024-06-20
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: A61K39/12 , C12N7/01 , C12N15/86 , C12N15/66 , C12N15/24 , C12N15/40 , A61K39/187 , A61K38/20 , A61P31/14 , A61P37/04 , C12R1/93
Abstract: 本发明要求保护一种能够同时表达猪瘟病毒E2基因和IL18基因的重组活载体疫苗的构建方法和应用。利用嵌合质粒pPRRSV‑E2‑N‑IL18‑Y转染MARC‑145细胞后,成功拯救出活病毒,并且发现重组病毒rPRRSV‑E2‑N‑IL18‑Y与亲本病毒vHuN4‑F112和重组病毒rPRRSV‑E2具有相似的病毒学特性。将重组病毒rPRRSV‑E2‑N‑IL18‑Y进行猪体免疫实验,发现重组病毒对猪体均具有良好的安全性,免疫后可以有效诱导机体产生免疫应答,产生高水平的针对PRRSV N蛋白的抗体和CSFV E2蛋白的抗体,而且可以诱导更高的细胞免疫水平,是一种良好的基因工程疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN116444653A
公开(公告)日:2023-07-18
申请号:CN202310221544.X
申请日:2023-03-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/08 , C07K14/01 , C12N15/13 , C12N15/70 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C12R1/91
Abstract: 本发明提供了一株阻断性非洲猪瘟病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备与应用,确定了该株单抗的可变区序列。该株单抗,可用于IFA,识别真核细胞中表达的p30蛋白;也可用于western blotting,识别变性的p30蛋白。特别的是,ASFV阳性猪血清能抑制该株单抗与p30蛋白结合,显示该株单抗可用于建立p30抗体竞争ELISA检测方法。
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