公开(公告)号：CN117757752A

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202311869243.4

申请日：2023-12-31

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 于海 ,  王娟 ,  童光志 ,  邢燕茹 ,  王帅勇 ,  刘清艳 ,  高硕磊 ,  刘长龙 ,  周艳君 ,  单同领 ,  童武 ,  郑浩 ,  姜一峰 ,  陈荣琳 ,  祝宇翔 ,  李健楠

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/40 ,  C12N15/867 ,  C07K14/08 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种稳定表达PRRSV次要结构蛋白的Marc‑145细胞系，该PRRSV次要结构蛋白包括GP2a、GP3、GP4、或ORF5a蛋白。本发明还公开了Marc‑145细胞系的制备方法，包括以下步骤：将猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的次要结构蛋白DNA序列克隆到具有嘌呤霉素抗性的慢病毒载体上，应用慢病毒三质粒包装系统在293T细胞包装慢病毒，然后感染Marc‑145细胞，用嘌呤霉素选择性筛选，挑选单克隆细胞纯化，得到稳定表达次要结构蛋白的Marc‑145细胞株，所述次要结构蛋白选自下述任意一个：PRRSV次要结构蛋白GP2a、GP3、GP4、或ORF5a蛋白。本发明的Marc‑145细胞系，可用于PRRSV复制缺陷型疫苗的研发与筛选，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN116555196A

公开(公告)日：2023-08-08

申请号：CN202310702546.0

申请日：2023-06-14

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 于海 ,  童光志 ,  严杰聪 ,  虞凌雪 ,  王帅勇 ,  王娟 ,  荣新利 ,  刘清艳 ,  高硕磊 ,  陈荣琳 ,  王曼茱 ,  周艳君 ,  单同领 ,  童武

IPC: C12N7/01 ,  C12N7/04 ,  C12N15/34 ,  C12N15/40 ,  C07K14/01 ,  C12N15/86 ,  A61K39/12 ,  A61K39/295 ,  A61P31/20 ,  A61P31/14 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株，包含猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的基因组核酸，在该HuN4‑F112基因组的ORF1b和ORF2a之间插入有猪圆环病毒2型PCV2的Cap蛋白基因表达序列，该PCV2的Cap蛋白基因表达序列为编码SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的核苷酸序列。本发明还公开了一种上述表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株的制备方法和应用。本发明的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株，不仅能够稳定表达PCV2的Cap蛋白，而且具有遗传稳定性，该疫苗株免疫健康仔猪后能够刺激猪体产生高水平的PCV2特异性ELISA抗体，有望成为安全有效的猪繁殖与呼吸综合征与猪圆环病毒病的二联疫苗。