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公开(公告)号:CN119876266A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510086178.0
申请日:2025-01-20
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/85 , C07K14/535 , C12N5/0786 , C12N15/64 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种重组猪巨噬细胞集落刺激因子的真核表达质粒及其构建方法和应用,该构建方法包括以下步骤:将合成的猪巨噬细胞集落刺激因子基因克隆至PUC57质粒中,得到PUC57‑PM‑CSF质粒;以PUC57‑PM‑CSF质粒为模板,采用在去除跨膜区序列的位置进行同源重组设计的引物进行PCR扩增,得到的目的基因亚克隆至真核表达载体的相应位点中,所得连接产物转化DH5α感受态细胞,获得鉴定正确的PM‑CSF真核表达质粒。本发明首次成功构建了包含猪M‑CSF基因的质粒并在真核表达系统中实现高效表达,表达的重组蛋白纯化后显示了较高的生物学活性,为进一步研究猪M‑CSF的结构与生物学功能,以及猪骨髓源巨噬细胞的极化及功能提供基础资料,为猪免疫评价体系的建立提供工具。
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公开(公告)号:CN108753739B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN201810627238.5
申请日:2018-06-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/01 , A61K39/245 , A61P31/22 , A61K39/187 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株,其插入的外源序列包括:CMV启动子、猪瘟病毒E2蛋白的信号肽及编码E2蛋白第1‑342位氨基酸和SV40 polyA的核苷酸序列。本发明还公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株的制备方法和应用。本发明的重组伪狂犬病毒弱毒株,对伪狂犬病毒及猪瘟病毒均有较好的免疫保护效果,适于作为防治伪狂犬病及猪瘟的疫苗候选株。
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公开(公告)号:CN112062831B
公开(公告)日:2022-02-08
申请号:CN202010629062.4
申请日:2020-07-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/705 , C07K16/28 , C07K16/06 , A61K39/395 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一株CD163蛋白单克隆抗体MAb的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将CD163对于PRRSV复制具有重要作用的功能结构域SRCR5‑6克隆到pColdI载体中,构建出原核表达载体中携带His标签的CD163 SRCR5‑6的蛋白,纯化SRCR5‑6蛋白免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞同和制备杂交瘤细胞获得抗猪CD163蛋白的单克隆抗体,且对抗体进行了表位鉴定。
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公开(公告)号:CN113912707A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202010649175.0
申请日:2020-07-08
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K16/10 , C12N5/20 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种猪源盖塔病毒抗体及分泌该抗体的杂交瘤细胞株。本发明还公开了检测盖塔病毒的试剂盒以及上述抗体在制备检测盖塔病毒的产品中的应用。本发明的猪源盖塔病毒抗体,能够高效特异性地识别猪源盖塔病毒和猪源盖塔病毒E2蛋白,在盖塔病毒的临床诊断及免疫检测方面具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN112779228A
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN202110187738.3
申请日:2021-02-18
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/08 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒疫苗株及其制备方法,所述疫苗株为将FJzz1在Vero细胞连续传至200代获得。选取低代次FJzz1‑F20和高代次FJzz1‑F200毒株对仔猪进行了致病性评价,结果显示高代次FJzz1‑F200感染组仔猪临床表现明显轻于FJzz1‑F20感染组,且发病猪未有死亡。与FJzz1‑F20感染组相比,FJzz1‑F200感染组仔猪的粪便排毒量和肠组织中的病毒载量显著降低,且肠道组织无明显组织病理学改变。同时,检测发现FJzz1‑F200感染组在肠组织中可以诱导高水平的I型和III型干扰素产生。上述研究结果表明,本发明的FJzz1‑F200其致病性弱,具有作为PEDV候选弱毒疫苗毒株的潜力。
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公开(公告)号:CN110904152A
公开(公告)日:2020-03-24
申请号:CN201911159887.8
申请日:2019-11-23
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)p54蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法,以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗及构建方法。对rPRRSV-p54感染孔进行间接免疫荧光,发现视野下出现了抗PRRSV N蛋白的特异性荧光及抗ASFV p54蛋白的特异性荧光。说明该表达非洲猪瘟病毒p54蛋白的重组PRRSV可以保证外源蛋白ASFV的p54蛋白得到良好的高效的稳定的表达。而有研究表明p54是重要的抗原蛋白,能够用于ASF的疫苗研制。
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公开(公告)号:CN119842769A
公开(公告)日:2025-04-18
申请号:CN202510093881.4
申请日:2025-01-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/70 , C12N15/27 , C07K14/53 , C12N5/0786 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种重组猫巨噬细胞集落刺激因子的原核表达质粒及其构建方法和应用,所述原核表达质粒的构建方法包括以下步骤:将合成的猫巨噬细胞集落刺激因子基因克隆至PUC57质粒中,得到PUC57‑FM‑CSF质粒;然后以合成的PUC57‑FM‑CSF质粒为模板,采用去除信号肽序列的位置设计的同源重组的引物进行PCR扩增,扩增得到的目的基因纯化后亚克隆至原核表达载体的相应位点中,再转化DH5α感受态细胞,即得。本发明首次成功构建了包含猫M‑CSF基因的质粒并在原核表达系统中获得高效表达,表达的重组蛋白纯化后显示了较高生物学活性,将为进一步研究猫M‑CSF的结构与生物学功能等提供稳定的体外研究平台,具有重大的研究意义以及临床应用价值。
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公开(公告)号:CN112779228B
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202110187738.3
申请日:2021-02-18
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/08 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒疫苗株及其制备方法,所述疫苗株为将FJzz1在Vero细胞连续传至200代获得。选取低代次FJzz1‑F20和高代次FJzz1‑F200毒株对仔猪进行了致病性评价,结果显示高代次FJzz1‑F200感染组仔猪临床表现明显轻于FJzz1‑F20感染组,且发病猪未有死亡。与FJzz1‑F20感染组相比,FJzz1‑F200感染组仔猪的粪便排毒量和肠组织中的病毒载量显著降低,且肠道组织无明显组织病理学改变。同时,检测发现FJzz1‑F200感染组在肠组织中可以诱导高水平的I型和III型干扰素产生。上述研究结果表明,本发明的FJzz1‑F200其致病性弱,具有作为PEDV候选弱毒疫苗毒株的潜力。
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公开(公告)号:CN112062831A
公开(公告)日:2020-12-11
申请号:CN202010629062.4
申请日:2020-07-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/705 , C07K16/28 , C07K16/06 , A61K39/395 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一株CD163蛋白单克隆抗体MAb的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将CD163对于PRRSV复制具有重要作用的功能结构域SRCR5‑6克隆到pColdI载体中,构建出原核表达载体中携带His标签的CD163 SRCR5‑6的蛋白,纯化SRCR5‑6蛋白免疫Balb/c小鼠,取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞同和制备杂交瘤细胞获得抗猪CD163蛋白的单克隆抗体,且对抗体进行了表位鉴定。
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公开(公告)号:CN108753739A
公开(公告)日:2018-11-06
申请号:CN201810627238.5
申请日:2018-06-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/01 , A61K39/245 , A61P31/22 , A61K39/187 , A61P31/14
CPC classification number: C12N7/00 , A61K39/12 , A61K2039/552 , A61K2039/70 , A61P31/14 , A61P31/22 , C07K14/005 , C12N2710/16721 , C12N2710/16734 , C12N2770/24322 , C12N2770/24334
Abstract: 本发明公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株,其插入的外源序列包括:CMV启动子、猪瘟病毒E2蛋白的信号肽及编码E2蛋白第1‑342位氨基酸和SV40 polyA的核苷酸序列。本发明还公开了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组伪狂犬病毒弱毒株的制备方法和应用。本发明的重组伪狂犬病毒弱毒株,对伪狂犬病毒及猪瘟病毒均有较好的免疫保护效果,适于作为防治伪狂犬病及猪瘟的疫苗候选株。
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