公开(公告)号：CN117757752A

公开(公告)日：2024-03-26

申请号：CN202311869243.4

申请日：2023-12-31

Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)

Inventor： 于海 ,  王娟 ,  童光志 ,  邢燕茹 ,  王帅勇 ,  刘清艳 ,  高硕磊 ,  刘长龙 ,  周艳君 ,  单同领 ,  童武 ,  郑浩 ,  姜一峰 ,  陈荣琳 ,  祝宇翔 ,  李健楠

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/40 ,  C12N15/867 ,  C07K14/08 ,  A61K39/12 ,  A61P31/14 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种稳定表达PRRSV次要结构蛋白的Marc‑145细胞系，该PRRSV次要结构蛋白包括GP2a、GP3、GP4、或ORF5a蛋白。本发明还公开了Marc‑145细胞系的制备方法，包括以下步骤：将猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的次要结构蛋白DNA序列克隆到具有嘌呤霉素抗性的慢病毒载体上，应用慢病毒三质粒包装系统在293T细胞包装慢病毒，然后感染Marc‑145细胞，用嘌呤霉素选择性筛选，挑选单克隆细胞纯化，得到稳定表达次要结构蛋白的Marc‑145细胞株，所述次要结构蛋白选自下述任意一个：PRRSV次要结构蛋白GP2a、GP3、GP4、或ORF5a蛋白。本发明的Marc‑145细胞系，可用于PRRSV复制缺陷型疫苗的研发与筛选，具有广阔的应用前景。