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公开(公告)号:CN117904072A
公开(公告)日:2024-04-19
申请号:CN202410024495.5
申请日:2024-01-08
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N9/14 , C12N15/55 , C12N15/70 , C07K16/40 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/573 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对PRRSV解旋酶的抗原表位、单克隆抗体制备方法及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp10,利用大肠杆菌表达重组Nsp10,纯化后免疫Balb/c小鼠,经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞,然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗PRRSV Nsp10的单克隆抗体,并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为425TDKRVVDSLR434。
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公开(公告)号:CN116555196A
公开(公告)日:2023-08-08
申请号:CN202310702546.0
申请日:2023-06-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N7/04 , C12N15/34 , C12N15/40 , C07K14/01 , C12N15/86 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株,包含猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的基因组核酸,在该HuN4‑F112基因组的ORF1b和ORF2a之间插入有猪圆环病毒2型PCV2的Cap蛋白基因表达序列,该PCV2的Cap蛋白基因表达序列为编码SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的核苷酸序列。本发明还公开了一种上述表达猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株的制备方法和应用。本发明的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株,不仅能够稳定表达PCV2的Cap蛋白,而且具有遗传稳定性,该疫苗株免疫健康仔猪后能够刺激猪体产生高水平的PCV2特异性ELISA抗体,有望成为安全有效的猪繁殖与呼吸综合征与猪圆环病毒病的二联疫苗。
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公开(公告)号:CN115851614A
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202111115249.3
申请日:2021-09-23
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种猪繁殖与呼吸综合征病毒复制缺陷型疫苗株,所述疫苗株包含猪繁殖与呼吸综合征病毒弱毒疫苗株HuN4‑F112的基因组核酸突变体,该突变体是将HuN4‑F112基因组的E蛋白基因突变使该E蛋白不表达。本发明的复制缺陷型疫苗株,首先在PRRSV弱毒疫苗株HuN4‑F112感染性分子克隆的基础上构建E蛋白缺失复制子,同时构建一种稳定表达PRRSV E蛋白的细胞系;然后将E蛋白缺失复制子载体线性化并且体外转录成病毒RNA,转染到稳定表达PRRSV E蛋白的细胞系中,成功进行病毒拯救,获得了PRRSV复制缺陷型疫苗株,该疫苗株能有效解决PRRSV灭活疫苗不能诱导细胞免疫、免疫效果差等缺点,同时解决PRRSV弱毒疫苗的安全性问题,为PRRSV的防控与净化提供一种安全有效的新型PRRSV活疫苗,具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN111228464A
公开(公告)日:2020-06-05
申请号:CN202010129677.0
申请日:2020-02-28
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: A61K38/17 , A61K31/7105 , A61K31/436 , A61K33/30 , A61K38/18 , A61P31/14 , A61P11/00 , C07K14/47
Abstract: 提供一种基于PABPC4蛋白的具有广谱抗冠状病毒的药物。基于PABPC4蛋白能够结合并降解多种冠状病毒的N蛋白,PABPC4基因的过表达能够抑制冠状病毒的复制和繁殖,SP1转录因子直接调控PABPC4基因的转录,PABPC4蛋白与MARCH8和NDP52相互作用从而通过PABPC4-MARCH8-NDP52选择性自噬途径降解冠状病毒N蛋白的作用机制,本发明提供了广谱抗冠状病毒或治疗多种冠状病毒包括2019新型冠状病毒引起的疾病的药物。
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公开(公告)号:CN110904153A
公开(公告)日:2020-03-24
申请号:CN201911159891.4
申请日:2019-11-23
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)p12蛋白或者p17蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法,以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗及构建方法。对rPRRSV-p12和rPRRSV-p17感染孔进行间接免疫荧光,发现视野下出现了抗PRRSV N蛋白的特异性荧光及抗ASFV p12蛋白或p17蛋白的特异性荧光。说明该表达非洲猪瘟病毒p12蛋白或p17蛋白的重组PRRSV可以保证外源蛋白ASFV的p12或p17蛋白得到良好的高效的稳定的表达。而有研究表明p12和p17都是重要的抗原蛋白,能够用于ASF的疫苗研制。
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公开(公告)号:CN110628817A
公开(公告)日:2019-12-31
申请号:CN201910889362.3
申请日:2019-09-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种表达非洲猪瘟病毒(African Swine Fever Virus,ASFV)p30蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组质粒的构建方法,以及根据该重组质粒构建的基因工程疫苗及构建方法。对rPRRSV-p30感染孔进行间接免疫荧光,发现视野下出现了抗PRRSV N蛋白的特异性荧光及抗ASFV p30蛋白的特异性荧光。收取rPRRSV-p30的感染孔的蛋白样品,对其进行western blot,结果发现出现了预期大小的p30条带。说明该表达非洲猪瘟病毒p30蛋白的重组PRRSV可以保证外源蛋白ASFV的p30蛋白得到良好的高效的稳定的表达。而有研究表明p30是重要的抗原蛋白,能够用于ASF的疫苗研制。
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公开(公告)号:CN117904072B
公开(公告)日:2025-01-28
申请号:CN202410024495.5
申请日:2024-01-08
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N9/14 , C12N15/55 , C12N15/70 , C07K16/40 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/573 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对PRRSV解旋酶的抗原表位、单克隆抗体制备方法及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp10,利用大肠杆菌表达重组Nsp10,纯化后免疫Balb/c小鼠,经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞,然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗PRRSV Nsp10的单克隆抗体,并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为425TDKRVVDSLR434。
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公开(公告)号:CN117886906B
公开(公告)日:2024-11-26
申请号:CN202410087827.4
申请日:2024-01-22
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪瘟病毒Erns蛋白的抗原表位、单克隆抗体及其应用。通过构建真核表达载体pCDNA3.4‑Erns‑strep,瞬时转染CHO细胞表达重组Erns蛋白,利用strep标签纯化重组蛋白,四次免疫Balb/C小鼠,分离小鼠脾细胞,利用FACS法分离特异性B细胞,并通过反转录和PCR获得单个B细胞抗体的可变区序列,构建重链、轻链重组表达质粒,瞬时转染CHO细胞,表达并利用Protein G纯化获得完整的抗CSFV Erns蛋白单克隆抗体,并鉴定了该抗体识别的抗原表位序列为113TCRYDKNTDVNVVTQARNRPTTLTGCKKGKNFSF146。
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公开(公告)号:CN117903262B
公开(公告)日:2024-08-13
申请号:CN202410083824.3
申请日:2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp7单克隆抗体的制备、表位鉴定及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp7,利用大肠杆菌表达重组Nsp7,纯化后免疫Balb/c小鼠,经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞,然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗Nsp7的单克隆抗体,并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为184KFWDKNSGD192。
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公开(公告)号:CN117886906A
公开(公告)日:2024-04-16
申请号:CN202410087827.4
申请日:2024-01-22
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪瘟病毒Erns蛋白的抗原表位、单克隆抗体及其应用。通过构建真核表达载体pCDNA3.4‑Erns‑strep,瞬时转染CHO细胞表达重组Erns蛋白,利用strep标签纯化重组蛋白,四次免疫Balb/C小鼠,分离小鼠脾细胞,利用FACS法分离特异性B细胞,并通过反转录和PCR获得单个B细胞抗体的可变区序列,构建重链、轻链重组表达质粒,瞬时转染CHO细胞,表达并利用Protein G纯化获得完整的抗CSFV Erns蛋白单克隆抗体,并鉴定了该抗体识别的抗原表位序列为113TCRYDKNTDVNVVTQARNRPTTLTGCKKGKNFSF146。
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