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公开(公告)号：CN116179455A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202211537066.5
申请日：2022-12-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株有效合成脂多糖的基因工程菌，具体涉及一种无抗性的脂多糖大肠杆菌生产菌，属于遗传工程和生物合成技术领域。本发明的基因工程菌，发生了npr、yhbJ和fabF的至少一个缺失突变失活。其中，本发明的发生三基因缺失突变的基因工程菌WOZF，其脂多糖合成量较野生型增加40.6％，生长状况良好，没有引入任何外源抗性基因序列，更有利于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN112575041A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN201910942722.1
申请日：2019-09-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种混合碳源高效发酵生产PHB的工程菌及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌中敲除敲除大肠杆菌基因组上核心糖基因簇的14个基因得到突变菌WJW01，继续敲除大肠杆菌基因组上O‑抗原基因簇的11个基因得到突变菌WJW02，随后将PHB合成的三个基因分别转化到精简菌株WJW02中，并敲除了ptsG基因，使构建的重组菌可以利用木糖和葡萄糖混合碳源合成PHB高达细胞干重的78.4％，是野生型对照菌W3110/pDXW‑8‑phaCAB(1.5％)的6倍，且较WJW02/pDXW‑8‑phaCAB提高50％。
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公开(公告)号：CN110373372B
公开(公告)日：2021-01-29
申请号：CN201910703169.6
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种通过敲除LPS合成基因簇高效合成PHB的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌中敲除敲除大肠杆菌基因组上核心糖基因簇的14个基因得到突变菌WJW01，继续敲除大肠杆菌基因组上O‑抗原基因簇的11个基因得到突变菌WJW02，随后将PHB合成的三个基因分别转化到精简菌株WJW01和WJW02中，得到的重组菌WJW01/pBHR68和WJW02/pBHR68分别可以合成PHB高达细胞干重的80.6％和82.0％，是野生型对照菌W3110/pBHR68(1.5％)的53.7和54.7倍。
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公开(公告)号：CN110387346A
公开(公告)日：2019-10-29
申请号：CN201910701830.X
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了缺失21个编码胞外多糖合成基因的基因工程菌及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明采用CRISPR/Cas9敲除系统敲除大肠杆菌W3110基因组上负责胞外多糖合成和转运的21个基因得到突变菌WJW09，采用WJW09菌株为宿主菌，利用pBHR68异源表达PHB合成基因簇phaCAB，WJW09/pBHR68合成PHB可以达到细胞干重的57.2％，而W3110/pBHR68合成的PHB仅占细胞干重的1.5％。重组菌WJW09/pBHR68的PHB体积产量高达对照菌W3110/pBHR68(1.5％)的38倍。
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公开(公告)号：CN106086056B
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201610415109.0
申请日：2016-06-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌基因敲除和基因组精简系统，属于微生物基因工程领域。本发明的恶臭假单胞菌基因敲除系统和基因组精简系统巧妙结合了自杀质粒敲除系统和位点特异性重组系统，大大提高了二轮筛选正确率，高达90％以上，在用于长达69个基因的基因簇的敲除时仍然表现出90％以上正确率。本发明实现基因簇的连续敲除，操作简便，高效，正确率高，成本低。本发明为精简优化恶臭假单胞菌基因组奠定了分子基础，有利于实现合成生物学底盘细胞的高效构建。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116355924A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202210851934.0
申请日：2022-07-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种L‑谷氨酸产量提高的谷氨酸棒杆菌的构建与应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除谷氨酸棒杆菌基因组上海藻糖合成基因treS,treY和otsA基因，得到了L‑谷氨酸产量提升的重组菌株C.glutamicum△SYA，该菌株在发酵培养基中发酵60h的L‑谷氨酸产量为14.75g/L，是出发菌株C.glutamicum ATCC13869的12.5倍，有助于实现L‑谷氨酸的工业化生产。
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公开(公告)号：CN113106051A
公开(公告)日：2021-07-13
申请号：CN202110469213.9
申请日：2021-04-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了缺失组合物基因簇在降低大肠杆菌对抗生素的耐药性中的应用，属于基因工程和生物医药领域。本发明敲除大肠杆菌W3110的核心糖基因簇gmhD‑waaQ，O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB，胞外多糖基因簇galF‑wza，4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD，三个鞭毛基因簇flhE‑motA、fliY‑fliR、flgN‑flgL，最终得到菌株WJW07，该菌株在LB培养基中对克林霉素和新生霉素的MIC分别为20mg/L和3mg/L，较野生对照菌W3110降低65倍和250倍，并且对一系列膜壁结构相关合成和转运基因簇的删除，使得重组菌株WJW07的生物量增加，有利于工业生产应用。
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公开(公告)号：CN113073075A
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN202110400775.8
申请日：2021-04-14
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种重组阪崎克罗诺杆菌及其应用，属于遗传工程领域。本发明通过基因工程构建一株C.sakazakii ATCC BAA‑894ΔRS18960的阪崎杆菌。该菌株与野生型菌株相比，对新生霉素的敏感性提高了16倍，对克拉霉素的敏感性提高了2倍，对利福平的敏感性提高了4倍，且菌株无任何抗性标记，遗传背景清晰，生长状况良好，这为防治阪崎杆菌的食品污染问题提供了新的方向，为研究阪崎杆菌对抗生素的耐药性提供了指导意义，为研究抗生素在革兰氏阴性菌中的作用机制具有参考价值。
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公开(公告)号：CN112592903A
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN202011622463.3
申请日：2020-12-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种突变型丙酮酸氧化酶及其在2‑丁酮酸代谢解毒中的应用，具体涉及一种利用该突变型丙酮酸氧化酶重构乙酸旁路途径增强细胞对2‑丁酮酸耐受性的方法，属于基因工程和微生物发酵技术领域。对丙酮酸氧化酶(PoxB)进行定点饱和突变得到PoxBF112W突变体，该酶增强了丙酮酸选择性，减弱了2‑丁酮酸结合亲和力。基于此突变体，在微生物细胞TWF115ΔaceE中重建乙酸旁路，用于L‑苏氨酸的生物合成供应乙酰辅酶A和还原型辅助因子。该重构的乙酸旁路途径可以进一步去除2‑丁酮酸的代谢毒性，帮助宿主菌TWF115ΔaceE在5g/L的2‑OBA添加下合成更高的L‑苏氨酸(13.98g/L)。
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公开(公告)号：CN110387347B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201910703084.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株大肠杆菌膜壁精简底盘菌株及其高产PHB的应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除野生型大肠杆菌W3110基因组上脂多糖的核心糖基因簇gmhD‑waaQ和O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB，胞外多糖基因簇galF‑wza，4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD，三个鞭毛基因簇flhE‑motA、fliY‑fliR、flgN‑flgL，和一个菌毛基因簇fimB‑fimH得到菌株WJW08，然后将PHB合成相关的基因转化到菌株中得到重组菌WJW08/pBHR68，在正常的发酵条件下该重组菌可以合成细胞干重81.9％的PHB，是野生对照菌W3110/pBHR68(1.5％)的54.6倍。
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