公开(公告)号：CN106086056B

公开(公告)日：2019-10-25

申请号：CN201610415109.0

申请日：2016-06-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 王小元 ,  王建莉 ,  马文渐 ,  林琳 ,  王雨舟 ,  王甜忆 ,  黄舒婷 ,  王雨倩 ,  张怡平 ,  孙康康 ,  李烨

IPC: C12N15/78 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12R1/40

Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌基因敲除和基因组精简系统，属于微生物基因工程领域。本发明的恶臭假单胞菌基因敲除系统和基因组精简系统巧妙结合了自杀质粒敲除系统和位点特异性重组系统，大大提高了二轮筛选正确率，高达90％以上，在用于长达69个基因的基因簇的敲除时仍然表现出90％以上正确率。本发明实现基因簇的连续敲除，操作简便，高效，正确率高，成本低。本发明为精简优化恶臭假单胞菌基因组奠定了分子基础，有利于实现合成生物学底盘细胞的高效构建。

公开(公告)号：CN106119181B

公开(公告)日：2019-09-03

申请号：CN201610512651.8

申请日：2016-06-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 王小元 ,  马文渐 ,  王建莉 ,  李烨 ,  林琳 ,  王甜忆 ,  黄舒亭 ,  张怡平

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12P7/62 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种产聚羟基丁酸羟基戊酸酯的基因工程菌及其应用方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明构建的基因工程菌可利用单一碳源生产聚3‑羟基丁酸酯‑co‑3‑羟基戊酸酯(PHBV)，且3HV的摩尔分数为66％。本发明解决了PHBV生产中辅助碳源丙酸盐的添加带来的成本过高的问题。经过130h的3L发酵罐进行补料分批发酵，本发明提供的谷氨酸棒杆菌基因工程菌在胞内可以产生占细胞干重比例为20％的PHBV，其3HV比例为66％，同时产生异亮氨酸。

公开(公告)号：CN106119181A

公开(公告)日：2016-11-16

申请号：CN201610512651.8

申请日：2016-06-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 王小元 ,  马文渐 ,  王建莉 ,  李烨 ,  林琳 ,  王甜忆 ,  黄舒亭 ,  张怡平

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/77 ,  C12P7/62 ,  C12R1/15

Abstract: 本发明公开了一种产聚羟基丁酸羟基戊酸酯的基因工程菌及其应用方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明构建的基因工程菌可利用单一碳源生产聚3‑羟基丁酸酯‑co‑3‑羟基戊酸酯(PHBV)，且3HV的摩尔分数为66％。本发明解决了PHBV生产中辅助碳源丙酸盐的添加带来的成本过高的问题。经过130h的3L发酵罐进行补料分批发酵，本发明提供的谷氨酸棒杆菌基因工程菌在胞内可以产生占细胞干重比例为20％的PHBV，其3HV比例为66％，同时产生异亮氨酸。

公开(公告)号：CN106086056A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610415109.0

申请日：2016-06-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 王小元 ,  王建莉 ,  马文渐 ,  林琳 ,  王雨舟 ,  王甜忆 ,  黄舒婷 ,  王雨倩 ,  张怡平 ,  孙康康 ,  李烨

IPC: C12N15/78 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12R1/40

Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌基因敲除和基因组精简系统，属于微生物基因工程领域。本发明的恶臭假单胞菌基因敲除系统和基因组精简系统巧妙结合了自杀质粒敲除系统和位点特异性重组系统，大大提高了二轮筛选正确率，高达90％以上，在用于长达69个基因的基因簇的敲除时仍然表现出90％以上正确率。本发明实现基因簇的连续敲除，操作简便，高效，正确率高，成本低。本发明为精简优化恶臭假单胞菌基因组奠定了分子基础，有利于实现合成生物学底盘细胞的高效构建。