一种降低万古霉素耐药性的方法及其在辅因子生产的应用

    公开(公告)号:CN113106050A

    公开(公告)日:2021-07-13

    申请号:CN202110469210.5

    申请日:2021-04-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种降低万古霉素耐药性的方法及其在辅因子生产的应用,属于基因工程和医药工程领域。本发明敲除大肠杆菌W3110基因组上脂多糖的核心糖基因簇gmhD‑waaQ和O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB,胞外多糖基因簇galF‑wza和4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD,得到重组菌株WJW04;通过敲除大肠杆菌W3110的胞外多糖基因簇galF‑wza得到菌株WJW09;WJW09和WJW04对万古霉素的最小抑制浓度MIC分别为600mg/L和76.8mg/L,低于野生型菌株W3110对万古霉素的最小抑制浓度MIC为1000mg/L,因此,本发明的技术方案在医药行业有广泛的应用。

    一种提高γ-氨基丁酸产量的方法

    公开(公告)号:CN110373438A

    公开(公告)日:2019-10-25

    申请号:CN201910703126.8

    申请日:2019-07-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高γ-氨基丁酸产量的方法,属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上ADP-L-甘油-D-甘露-庚糖-6-差向异构酶RfaD基因得到重组菌WJW00后,利用WJW00进行发酵生产GABA,GABA产量达到0.6415g/L,是野生菌W3110(0.0135g/L)的47.52倍;且重组菌WJW00发酵产物中,副产物有机酸的含量均降低,如发酵24h时,丙酮酸、乙酸、乳酸的含量相对于野生菌W3110分别降低65.1%、38.9%、56.6%。本发明提供了一种新的提高GABA合成的方法,对于进一步提高GABA的合成具有十分重大的意义。

    一种高产苏氨酸的基因工程菌及其应用方法

    公开(公告)号:CN110317767A

    公开(公告)日:2019-10-11

    申请号:CN201910599466.0

    申请日:2019-07-04

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种高产苏氨酸的基因工程菌及其应用方法,属于基因工程和发酵工程领域。所述基因工程菌为TWF001/pFW01-phaCAB,在三氯生表达质粒pFW01上过表达了phaCAB,可以在胞外合成苏氨酸,胞内合成PHB。本发明构建的菌株苏氨酸合成量大大提高,在摇瓶发酵水平产量为17.0g/L,在3-L罐发酵水平,合成苏氨酸产量为96.4g/L,在10L罐发酵水平,合成苏氨酸产量为133.5g/L。所述基因工程菌为TWF001/pFW01-phaCAB生长状况良好,未引入外源抗性基因序列,更有利于大规模工业化生产。

    缺失组合物基因簇在降低大肠杆菌对抗生素的耐药性中的应用

    公开(公告)号:CN113106051B

    公开(公告)日:2023-10-03

    申请号:CN202110469213.9

    申请日:2021-04-28

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了缺失组合物基因簇在降低大肠杆菌对抗生素的耐药性中的应用,属于基因工程和生物医药领域。本发明敲除大肠杆菌W3110的核心糖基因簇gmhD‑waaQ,O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB,胞外多糖基因簇galF‑wza,4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD,三个鞭毛基因簇flhE‑motA、fliY‑fliR、flgN‑flgL,最终得到菌株WJW07,该菌株在LB培养基中对克林霉素和新生霉素的MIC分别为20mg/L和3mg/L,较野生对照菌W3110降低65倍和250倍,并且对一系列膜壁结构相关合成和转运基因簇的删除,使得重组菌株WJW07的生物量增加,有利于工业生产应用。

    一种混合碳源高效发酵生产PHB的工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN112575041A

    公开(公告)日:2021-03-30

    申请号:CN201910942722.1

    申请日:2019-09-30

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种混合碳源高效发酵生产PHB的工程菌及其应用,属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌中敲除敲除大肠杆菌基因组上核心糖基因簇的14个基因得到突变菌WJW01,继续敲除大肠杆菌基因组上O‑抗原基因簇的11个基因得到突变菌WJW02,随后将PHB合成的三个基因分别转化到精简菌株WJW02中,并敲除了ptsG基因,使构建的重组菌可以利用木糖和葡萄糖混合碳源合成PHB高达细胞干重的78.4%,是野生型对照菌W3110/pDXW‑8‑phaCAB(1.5%)的6倍,且较WJW02/pDXW‑8‑phaCAB提高50%。

    一种通过敲除LPS合成基因簇高效合成PHB的方法

    公开(公告)号:CN110373372B

    公开(公告)日:2021-01-29

    申请号:CN201910703169.6

    申请日:2019-07-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种通过敲除LPS合成基因簇高效合成PHB的方法,属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌中敲除敲除大肠杆菌基因组上核心糖基因簇的14个基因得到突变菌WJW01,继续敲除大肠杆菌基因组上O‑抗原基因簇的11个基因得到突变菌WJW02,随后将PHB合成的三个基因分别转化到精简菌株WJW01和WJW02中,得到的重组菌WJW01/pBHR68和WJW02/pBHR68分别可以合成PHB高达细胞干重的80.6%和82.0%,是野生型对照菌W3110/pBHR68(1.5%)的53.7和54.7倍。

    缺失21个编码胞外多糖合成基因的基因工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN110387346A

    公开(公告)日:2019-10-29

    申请号:CN201910701830.X

    申请日:2019-07-31

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了缺失21个编码胞外多糖合成基因的基因工程菌及其应用,属于基因工程和发酵工程领域。本发明采用CRISPR/Cas9敲除系统敲除大肠杆菌W3110基因组上负责胞外多糖合成和转运的21个基因得到突变菌WJW09,采用WJW09菌株为宿主菌,利用pBHR68异源表达PHB合成基因簇phaCAB,WJW09/pBHR68合成PHB可以达到细胞干重的57.2%,而W3110/pBHR68合成的PHB仅占细胞干重的1.5%。重组菌WJW09/pBHR68的PHB体积产量高达对照菌W3110/pBHR68(1.5%)的38倍。

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