公开(公告)号：CN110373372A

公开(公告)日：2019-10-25

申请号：CN201910703169.6

申请日：2019-07-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 王小元 ,  王建莉 ,  马文渐 ,  王雨舟 ,  王雨倩 ,  李烨

IPC: C12N1/21 ,  C12P7/62 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种通过敲除LPS合成基因簇高效合成PHB的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌中敲除敲除大肠杆菌基因组上核心糖基因簇的14个基因得到突变菌WJW01，继续敲除大肠杆菌基因组上O-抗原基因簇的11个基因得到突变菌WJW02，随后将PHB合成的三个基因分别转化到精简菌株WJW01和WJW02中，得到的重组菌WJW01/pBHR68和WJW02/pBHR68分别可以合成PHB高达细胞干重的80.6％和82.0％，是野生型对照菌W3110/pBHR68(1.5％)的53.7和54.7倍。

公开(公告)号：CN106086056A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610415109.0

申请日：2016-06-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 王小元 ,  王建莉 ,  马文渐 ,  林琳 ,  王雨舟 ,  王甜忆 ,  黄舒婷 ,  王雨倩 ,  张怡平 ,  孙康康 ,  李烨

IPC: C12N15/78 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12R1/40

Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌基因敲除和基因组精简系统，属于微生物基因工程领域。本发明的恶臭假单胞菌基因敲除系统和基因组精简系统巧妙结合了自杀质粒敲除系统和位点特异性重组系统，大大提高了二轮筛选正确率，高达90％以上，在用于长达69个基因的基因簇的敲除时仍然表现出90％以上正确率。本发明实现基因簇的连续敲除，操作简便，高效，正确率高，成本低。本发明为精简优化恶臭假单胞菌基因组奠定了分子基础，有利于实现合成生物学底盘细胞的高效构建。

公开(公告)号：CN110373372B

公开(公告)日：2021-01-29

申请号：CN201910703169.6

申请日：2019-07-31

Applicant: 江南大学

Inventor： 王小元 ,  王建莉 ,  马文渐 ,  王雨舟 ,  王雨倩 ,  李烨

IPC: C12N1/21 ,  C12P7/62 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种通过敲除LPS合成基因簇高效合成PHB的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在大肠杆菌中敲除敲除大肠杆菌基因组上核心糖基因簇的14个基因得到突变菌WJW01，继续敲除大肠杆菌基因组上O‑抗原基因簇的11个基因得到突变菌WJW02，随后将PHB合成的三个基因分别转化到精简菌株WJW01和WJW02中，得到的重组菌WJW01/pBHR68和WJW02/pBHR68分别可以合成PHB高达细胞干重的80.6％和82.0％，是野生型对照菌W3110/pBHR68(1.5％)的53.7和54.7倍。

公开(公告)号：CN106086056B

公开(公告)日：2019-10-25

申请号：CN201610415109.0

申请日：2016-06-13

Applicant: 江南大学

Inventor： 王小元 ,  王建莉 ,  马文渐 ,  林琳 ,  王雨舟 ,  王甜忆 ,  黄舒婷 ,  王雨倩 ,  张怡平 ,  孙康康 ,  李烨

IPC: C12N15/78 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  C12R1/40

Abstract: 本发明公开了一种恶臭假单胞菌基因敲除和基因组精简系统，属于微生物基因工程领域。本发明的恶臭假单胞菌基因敲除系统和基因组精简系统巧妙结合了自杀质粒敲除系统和位点特异性重组系统，大大提高了二轮筛选正确率，高达90％以上，在用于长达69个基因的基因簇的敲除时仍然表现出90％以上正确率。本发明实现基因簇的连续敲除，操作简便，高效，正确率高，成本低。本发明为精简优化恶臭假单胞菌基因组奠定了分子基础，有利于实现合成生物学底盘细胞的高效构建。