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公开(公告)号：CN113667627B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202110992844.9
申请日：2021-08-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高L‑谷氨酸生产效率的谷氨酸棒杆菌的构建及应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在谷氨酸棒杆菌中敲除谷氨酸棒杆菌基因组上分枝菌酸酮酰基还原酶基因cmrA，使获得的C.glutamicum△cmrA在发酵培养基中L‑谷氨酸产量为13.14g/L，是出发菌株C.glutamicum ATCC 13869产量的10.77倍。本发明的方法提供了一种提高谷氨酸棒杆菌中氨基酸产量的新策略，在氨基酸的工业生产中有巨大的应用前景。
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公开(公告)号：CN108359669B
公开(公告)日：2020-04-07
申请号：CN201810148083.7
申请日：2018-02-13
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/77 , C12N1/21 , C12P13/00 , C12R1/15
Abstract: 本发明公开了一种棒杆菌启动子及其应用，属于基因工程技术领域。本发明提供的启动子PdnaK、PdnaK(+1)、PdnaK(‑1)，解决了在谷氨酸棒杆菌中启动子强度不够强的问题。将启动子PdnaK、PdnaK(+1)、PdnaK(‑1)直接导入棒杆菌的待表达基因前，应用于基因的表达及相关代谢产物的生产，提供了比Psod和Ptuf更强的启动子。本发明还可应用于协调棒杆菌中其它基因的表达及相关代谢产物的合成。
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公开(公告)号：CN110373438A
公开(公告)日：2019-10-25
申请号：CN201910703126.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高γ-氨基丁酸产量的方法，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除大肠杆菌基因组上ADP-L-甘油-D-甘露-庚糖-6-差向异构酶RfaD基因得到重组菌WJW00后，利用WJW00进行发酵生产GABA，GABA产量达到0.6415g/L，是野生菌W3110(0.0135g/L)的47.52倍；且重组菌WJW00发酵产物中，副产物有机酸的含量均降低，如发酵24h时，丙酮酸、乙酸、乳酸的含量相对于野生菌W3110分别降低65.1％、38.9％、56.6％。本发明提供了一种新的提高GABA合成的方法，对于进一步提高GABA的合成具有十分重大的意义。
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公开(公告)号：CN103555779B
公开(公告)日：2015-08-19
申请号：CN201310331785.6
申请日：2013-08-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了利用一种发酵生产γ-氨基丁酸的方法，是将两种谷氨酸脱羧酶基因gadB1，gadB2构建共表达载体导入到谷氨酸生产菌中构建基因工程菌，利用基因工程菌表达的谷氨酸脱羧酶将其自身积累的谷氨酸脱去一个羧基合成出γ-氨基丁酸。通过对种子培养基、发酵培养基和发酵条件优化，尤其是尿素在6-24小时内间断补加，大大提高了GABA的产量和谷氨酸转化率。本发明不仅将谷氨酸的积累和GABA的合成简化为一步发酵，简化了GABA生产过程、降低了生产成本；而且后期发酵优化明显提高了GABA的产量，使得L-谷氨酸的转化率达到74%，再次验证此生产方法的可行性和优势，为工业化应用打下良好基础。
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公开(公告)号：CN101838663B
公开(公告)日：2013-05-22
申请号：CN200910260991.6
申请日：2009-12-18
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/77
Abstract: 一种大肠杆菌-棒状杆菌穿梭组成型表达载体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明的表达载体pDXW-10，能在大肠杆菌和棒状杆菌中复制并稳定存在，含有一个在大肠杆菌和棒状杆菌中皆具有转录启动功能的tac-M启动子，及转录终止功能的终止子rrnBT1T2；含有一个用于棒状杆菌转化子选择的抗性标记卡那霉素标记抗性基因；含有一个包含11个单一的限制性内切酶切点的多克隆位点L-MCS。在棒状杆菌中，该载体表达外源蛋白的水平适中，尤其适用于棒状杆菌代谢工程的研究。
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公开(公告)号：CN102417896A
公开(公告)日：2012-04-18
申请号：CN201110380587.X
申请日：2011-11-25
Applicant: 江南大学
IPC: C12N7/00 , A23L3/3571 , C12R1/445 , C12R1/92
Abstract: 一种金黄色葡萄球菌的噬菌体，保藏号为：CCTCC M2011409，该噬菌体对金黄色葡萄球菌具有有效的裂解作用；该噬菌体保存条件为：噬菌体培养液过滤除菌后于4℃下可以保存2个月以上，于-70℃下保存于甘油管中可以保存2年以上；所述噬菌体培养液储液浓度为1011pfu/mL；金黄色葡萄球菌的噬菌体的应用：将噬菌体培养液直接喷涂于固体食品的表面，或混合于含菌食品中，用于抑制食品中的金黄色葡萄球菌。噬菌体在含菌料中的添加量为0.0001~100pfu/cfu。本发明可以有效控制食品体系中的金黄色葡萄球菌污染，相对于抗生素和化学防腐剂而言，具有特异性高、无残留和安全的特点。
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公开(公告)号：CN102329808A
公开(公告)日：2012-01-25
申请号：CN201110302090.6
申请日：2011-10-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了改造的sacB基因及其衍生的整合型载体，属于基因工程技术领域。本发明提供的整合型载体含有一个人工合成的强启动子PlacM启动的能在棒状杆菌中良好转录表达并具有条件致死功能的基因sacB；一个用于棒状杆菌转化子选择的抗性标记卡那霉素标记抗性基因；还含有一个多克隆位点MCS。SacB处于强启动子PlacM和优化的SD下，表达更加良好；此外，由于sacB自身的启动子、sacR和SD序列均被去除，应用时几乎不会出现蔗糖抗性、抗生素抗性的菌落，大大减少应用中不必要的麻烦。该载体能在大肠杆菌中复制并稳定存在而不能在棒状杆菌中复制，适用于棒状杆菌染色体基因敲除和替代。
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公开(公告)号：CN101838663A
公开(公告)日：2010-09-22
申请号：CN200910260991.6
申请日：2009-12-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种大肠杆菌-棒状杆菌穿梭组成型表达载体及其构建方法，属于基因工程技术领域。本发明的表达载体pDXW-10，能在大肠杆菌和棒状杆菌中复制并稳定存在，含有一个在大肠杆菌和棒状杆菌中皆具有转录启动功能的tac-M启动子，及转录终止功能的终止子rrnBT1T2；含有一个用于棒状杆菌转化子选择的抗性标记卡那霉素标记抗性基因；含有一个包含11个单一的限制性内切酶切点的多克隆位点L-MCS。在棒状杆菌中，该载体表达外源蛋白的水平适中，尤其适用于棒状杆菌代谢工程的研究。
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公开(公告)号：CN113667627A
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202110992844.9
申请日：2021-08-27
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高L‑谷氨酸生产效率的谷氨酸棒杆菌的构建及应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明在谷氨酸棒杆菌中敲除谷氨酸棒杆菌基因组上分枝菌酸酮酰基还原酶基因cmrA，使获得的C.glutamicum△cmrA在发酵培养基中L‑谷氨酸产量为13.14g/L，是出发菌株C.glutamicum ATCC 13869产量的10.77倍。本发明的方法提供了一种提高谷氨酸棒杆菌中氨基酸产量的新策略，在氨基酸的工业生产中有巨大的应用前景。
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公开(公告)号：CN110387347B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201910703084.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一株大肠杆菌膜壁精简底盘菌株及其高产PHB的应用，属于基因工程和发酵工程领域。本发明敲除野生型大肠杆菌W3110基因组上脂多糖的核心糖基因簇gmhD‑waaQ和O‑抗原基因簇wbbL‑rmlB，胞外多糖基因簇galF‑wza，4型荚膜多糖合成基因簇yccC‑ymcD，三个鞭毛基因簇flhE‑motA、fliY‑fliR、flgN‑flgL，和一个菌毛基因簇fimB‑fimH得到菌株WJW08，然后将PHB合成相关的基因转化到菌株中得到重组菌WJW08/pBHR68，在正常的发酵条件下该重组菌可以合成细胞干重81.9％的PHB，是野生对照菌W3110/pBHR68(1.5％)的54.6倍。
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