卵巢癌细胞中双微体的脉冲场凝胶电泳分离纯化方法

    公开(公告)号:CN102586227A

    公开(公告)日:2012-07-18

    申请号:CN201110340834.3

    申请日:2011-11-02

    Abstract: 本发明提供了一种卵巢癌细胞中双微体的脉冲场凝胶电泳分离纯化方法。本发明将制备好的含卵巢癌细胞全基因组DNA的胶块置于0.5%琼脂糖凝胶的点样孔中,用相同浓度的琼脂糖封闭加样孔;在10℃的0.5×TBE电泳缓冲液中适宜电泳条件下先进行第一向FIGE模式电泳,随后调整方向进行第二向CHEF模式电泳,分离大片段DNA分子。之后将目的片段回收,用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测回收所得DNA片段大小。本发明的方法通过双向电泳的方式对脉冲场凝胶电泳的优化可实现对双微体简便、高效的分离,且DMs的纯度高并为后续DMs相关实验的开展奠定了坚实的基础。

    FAM3C的反义核苷酸在制备抑制上皮性卵巢癌细胞侵袭转移的药物中的应用

    公开(公告)号:CN105079822B

    公开(公告)日:2018-06-29

    申请号:CN201510530884.6

    申请日:2015-08-26

    Abstract: 本发明公开了FAM3C的反义核苷酸在制备抑制上皮性卵巢癌细胞侵袭转移的药物中的应用。在本发明中,所述的FAM3C的反义核苷酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示。本发明针对FAM3C活跃表达的卵巢癌细胞系,通过反义核苷酸序列稳定沉默上皮性卵巢癌细胞中FAM3C基因的表达,特异性阻断上皮性卵巢癌细胞发生上皮‑间质转化,可以引起肿瘤细胞侵袭和转移能力的下降,降低了肿瘤的恶性程度,提高了患者的生存率和预后。将FAM3C的反义核苷酸应用于上皮性卵巢癌细胞侵袭转移抑制药物的制备中,能够为上皮性卵巢癌的生物治疗提供新的药物选择和靶向性治疗方案,提高了肿瘤治疗的特异性,为转移性卵巢癌的治疗提供了新的策略。

    人卵巢癌细胞中双微体的脉冲场凝胶电泳分离纯化方法

    公开(公告)号:CN102586227B

    公开(公告)日:2014-02-05

    申请号:CN201110340834.3

    申请日:2011-11-02

    Abstract: 本发明提供了一种人卵巢癌细胞中双微体的脉冲场凝胶电泳分离纯化方法。本发明将制备好的含卵巢癌细胞全基因组DNA的胶块置于0.5%琼脂糖凝胶的点样孔中,用相同浓度的琼脂糖封闭加样孔;在10°C的0.5×TBE电泳缓冲液中适宜电泳条件下先进行第一向FIGE模式电泳,随后调整方向进行第二向CHEF模式电泳,分离大片段DNA分子。之后将目的片段回收,用1.5%琼脂糖凝胶电泳检测回收所得DNA片段大小。本发明的方法通过双向电泳的方式对脉冲场凝胶电泳的优化可实现对双微体简便、高效的分离,且DMs的纯度高并为后续DMs相关实验的开展奠定了坚实的基础。

    一种腺相关病毒双重载体基因治疗系统及其在治疗黏多糖贮积症Ⅱ型中的应用

    公开(公告)号:CN111110865A

    公开(公告)日:2020-05-08

    申请号:CN201911183591.X

    申请日:2019-11-27

    Abstract: 本发明公开了一种腺相关病毒双重载体基因治疗系统及其在治疗黏多糖贮积症Ⅱ型中的应用。所述的腺相关病毒双重载体基因治疗系统由第一载体和第二载体组成,其中,所述第一载体为携带有靶向人源白蛋白基因(Albumin,Alb)切割位点的特异性小向导RNA(sgRNA)以及人源艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶(iduronate-2-sulfatase,IDS)基因的开放阅读框序列的AAV载体,其中,所述的切割位点位于白蛋白基因翻译起始密码子atg的第2、3位碱基之间;所述第二载体为携带Cas9的AAV载体。本发明以CRISPR-Cas9为基因编辑工具的腺相关病毒双重载体系统可显著提高MPSII模型小鼠血浆的IDS酶活性以及肝脏组织IDS的表达,经治疗后小鼠表型和骨骼发育均得以改善。本发明为黏多糖贮积症Ⅱ型的临床治疗提供了一种有效治疗手段。

    NSMCE2的反义核苷酸序列在制备抑制结直肠癌细胞生长药物中的应用

    公开(公告)号:CN103405786A

    公开(公告)日:2013-11-27

    申请号:CN201310381418.7

    申请日:2013-08-28

    Abstract: 本发明公开了非SMC元件2同源物NSMCE2的反义核苷酸序列在制备抑制结直肠癌细胞生长药物中的应用,属于肿瘤生物治疗技术领域。在本发明中,设计合成了一条非SMC元件2同源物NSMCE2的反义核苷酸序列,如SEQ ID NO.1所示。本发明针对NSMCE2基因高扩增和过表达的结直肠癌细胞,将NSMCE2反义核苷酸序列应用于结直肠癌细胞生长抑制药物制备中,利用NSMCE2反义核苷酸序列通过RNAi技术干扰其表达从而有效抑制了结直肠癌细胞生长,降低了结直肠癌细胞恶性程度,因此,本发明的提出为结直肠癌的治疗提供了一种新的靶向生物治疗策略。

    DNMT1蛋白抑制剂在制备逆转MTX耐药肿瘤细胞耐药性的药物中的应用

    公开(公告)号:CN112451672A

    公开(公告)日:2021-03-09

    申请号:CN202011428416.5

    申请日:2020-12-09

    Abstract: 本发明公开了DNMT1蛋白抑制剂在制备逆转MTX耐药肿瘤细胞耐药性的药物中的应用,属于医药技术领域。本发明针对MTX耐药且DHFR基因高度扩增的恶性肿瘤细胞,以DNMT1为靶点,降低DHFR基因的扩增程度,减少细胞内的DMs,同时,干扰DNMT1可抑制DNA双链断裂的损伤应答信号,消减HR和A‑EJ对DSBs的修复作用从而逆转肿瘤耐药,提高肿瘤治疗的效率。本发明为MTX作为主要治疗药物且易产生耐药性的恶性肿瘤的生物治疗提供新的靶向性治疗方案,并揭示肿瘤耐药细胞中DNMT1参与DMs形成以及肿瘤耐药的机制,有助于更全面解析因DSBs引发的肿瘤发生发展及耐药的过程,为逆转肿瘤耐药提供新策略。此外,本发明对于深入了解化疗耐药的本质以及寻找个体化治疗的耐药靶点也具有非常积极的意义。

    一种人工合成的阳离子肽及其在制备抗肿瘤药物中的用途

    公开(公告)号:CN103992394B

    公开(公告)日:2016-08-24

    申请号:CN201410222323.5

    申请日:2014-05-23

    Abstract: 本发明公开了一种人工合成的阳离子肽(命名为AIK)及其在制备抗肿瘤药物中的用途,本发明的阳离子肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。研究表明AIK对各种实体肿瘤细胞,特别是白血病细胞、肺巨细胞癌细胞,腹水性肝癌细胞有显著的抑制作用,其抗瘤活性可能是通过结合肿瘤细胞表面的阴离子受体,从而诱导肿瘤细胞发生凋亡和坏死,而且其抗瘤活性高于其他研究人员此前已报道的抗瘤多肽分子。更重要的是,该种人工合的25肽药物分子对肿瘤细胞显示出较高的特异性。对皮下荷瘤小鼠局部用药后,明显抑制肝癌细胞H22在荷瘤小鼠皮下的生长,且毒副反应低于化疗药物氨甲喋呤。本发明的提出为进一步研发多肽类抗肿瘤新药和小型靶向性抗肿瘤新药提供了理论依据和实验材料。

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