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公开(公告)号：CN118957019A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411037300.7
申请日：2024-07-30
Applicant: 哈尔滨医科大学
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明提出了一种提取细胞外泌体eccDNA的方法。所述的方法包括细胞外泌体提取、细胞外泌体DNA提取、外泌体eccDNA分离与纯化以及外泌体eccDNA扩增的步骤。本发明成功建立了提取细胞外泌体eccDNA的流程，并对获得的外泌体eccDNA进行了分子特征分析。通过测序分析表明，外泌体eccDNA的分子大小、GC含量等特征与已报道的eccDNA相关特征相吻合，并且三次实验之间具有较好的重复性，证明其分子结构符合经典eccDNA的分子特征，同时外泌体eccDNA具有一定的特异性。本发明的提出为开展外泌体eccDNA相关的结构特征、潜在功能、潜在生物标志物开发等研究提供了技术手段。
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公开(公告)号：CN109593760B
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN201811203594.0
申请日：2018-10-16
Applicant: 哈尔滨医科大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/519 , A61K31/7105 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种与肿瘤细胞MTX耐药性相关的circRNA及其在逆转肿瘤细胞对MTX耐药中的应用。本发明选取HT‑29 MTX敏感及含DMs的MTX耐药细胞系作为研究对象，通过二代测序、验证及优选，获得在MTX耐药细胞中高表达的circRNA，命名为circRNA7746，通过建立荷瘤小鼠的MTX治疗模型结合PCR及琼脂糖凝胶电泳方法，进一步确定了circRNA7746的表达量与肿瘤细胞对氨甲蝶呤(MTX)耐药性程度正相关。利用病毒转染方法分别检测了干扰circRNA7746对细胞耐药性、DHFR基因的扩增程度及扩增形式及微核外排的影响，确定了抑制circRNA7746可以促进DMs外排，逆转肿瘤细胞对MTX耐药。本发明的提出为肿瘤治疗提供新的靶点，为有效地对抗MTX耐药提供了有效技术手段。
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公开(公告)号：CN104946755B
公开(公告)日：2017-07-11
申请号：CN201510319265.2
申请日：2015-06-11
Applicant: 哈尔滨医科大学
IPC: C12Q1/68 , G01N33/573
Abstract: 本发明涉及BRCA1蛋白在制备逆转肿瘤细胞对MTX耐药性的药物中的应用，属于肿瘤生物治疗技术领域。本发明在已建立的MTX耐药细胞进化模型中，选取含DMs的耐药细胞为研究对象，通过确定BRCA1蛋白在HT29含DMs的耐药细胞中的高表达，进一步探讨BRCA1蛋白及其所在通路与含有DHFR耐药基因的双微体稳定存在的关系。本发明利用脂质体转染方法构建了稳定干扰BRCA1的HT29MTX耐药克隆，并利用Western Blot，FISH，Real‑time PCR，MTT和免疫荧光等方法，分别检测了干扰BRCA1对细胞耐药性、DHFR基因的扩增程度及扩增形式、DNA双链断裂及双链断裂修复途径、细胞周期及微核外排的影响。从而确定抑制BRCA1蛋白可以促进DMs外排，逆转肿瘤细胞对MTX耐药。
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公开(公告)号：CN103898057B
公开(公告)日：2017-02-08
申请号：CN201410123113.0
申请日：2014-03-28
Applicant: 哈尔滨医科大学
Abstract: 本发明涉及一种顺铂耐药骨肉瘤U2OS细胞系及其制备方法，所述顺铂耐药骨肉瘤U2OS细胞系为U2OS/CDP3×10-8M、U2OS/CDP10-7M、U2OS/CDP3×10-7M、U2OS/CDP10-6M，其微生物保藏号分别为CGMCC No.8004、CGMCC No.8005、CGMCC No.8006、CGMCC No.8007。另外，不耐药的U2OS敏感细胞系微生物保藏号为CGMCC No.8008，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。本发明通过构建顺铂耐药骨肉瘤U2OS细胞系建立了体外骨肉瘤细胞耐顺铂的模型，为骨肉瘤的临床治疗提供很好的基础。
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公开(公告)号：CN103417985A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310298411.9
申请日：2013-07-16
Applicant: 哈尔滨医科大学
Abstract: 本发明公开了核糖体蛋白类似物RPL22L1的反义核苷酸序列在制备抑制卵巢癌细胞生长药物中的应用。在本发明中，设计合成了三对核糖体蛋白类似物RPL22L1的反义核苷酸序列，分别如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2或SEQ ID NO.3所示。本发明针对RPL22L1高扩增的卵巢癌细胞，利用RPL22L1反义核苷酸序列，通过RNAi干扰的方法减少RPL22L1的表达，研究发现上述反义核苷酸序列能够有效抑制卵巢癌细胞的生长，降低其恶性程度。将RPL22L1的反义核苷酸序列应用于卵巢癌细胞生长抑制药物的制备中，能够为卵巢癌的生物治疗提供新的药物选择和靶向性治疗方案，从而提高治疗的特异性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102586414A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201110340841.3
申请日：2011-11-02
Applicant: 哈尔滨医科大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明提供了一种人卵巢癌细胞系UACC-1598中双微体序列测定方法，一、人卵巢癌细胞UACC-1598的培养及细胞完整双微体的脉冲场凝胶电泳分离；二、将获得的卵巢癌细胞系UACC-1598的双微体，应用Roche公司454技术对人卵巢癌细胞系UACC-1598中双微体序列进行测定。本发明脉冲分离出来的高纯度DMs很大程度上保证了实验对象的完整性，由于双微体序列的异质性的存在，同时重复性较高，并且总大小只有几十兆碱基的特点，更适合采用Roche的454高通量测序技术进行分析，从而实现对其序列全貌及特征的全面认识，很大程度上保证了所得序列的真实性。
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公开(公告)号：CN116650646A
公开(公告)日：2023-08-29
申请号：CN202310524657.7
申请日：2023-05-10
Applicant: 哈尔滨医科大学
Inventor： 孟祥宁 , 邢若男 , 朱静 , 孙文靖 , 崔晓波 , 冀国华 , 张慧姝 , 史航 , 张玫茵 , 宋甜甜 , 刘荧灿 , 季家政 , 刘扬和 , 邢舒凯 , 李思青 , 吴威 , 陈锌
Abstract: 本发明公开了ALKBH5蛋白抑制剂在制备逆转MTX耐药肿瘤细胞耐药性的药物中的应用。本发明针对MTX耐药且DHFR基因高度扩增的恶性肿瘤细胞，降低DHFR基因的扩增程度，减少细胞内的DMs数量。干扰ALKBH5主要通过抑制(m6A)R‑loop去甲基化修饰调控R‑loop稳定性，进而抑制DNA双链断裂的损伤应答信号，消减HR因子对DSBs的修复作用从而逆转肿瘤耐药，提高肿瘤治疗的效率。本发明为MTX作为主要治疗药物且易产生耐药性的恶性肿瘤的生物治疗提供了新的靶向性治疗方案，对于深入了解化疗耐药的本质以及寻找个体化治疗的耐药靶点也具有非常积极的意义。
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公开(公告)号：CN116312794A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310027339.X
申请日：2023-01-09
Applicant: 哈尔滨医科大学
IPC: G16B30/10 , G16B40/00 , G16B50/00 , G06F18/2135 , G06F18/23
Abstract: 一种融合单细胞分析方法的甲基化样本聚类方法，它涉及生物信息甲基化数据分析领域，本发明要解决样本量较少的甲基化数据，无法实现较好的聚类效果的技术问题，本发明根据甲基化位点的甲基化类型和其序列位置信息对样本进行甲基化区域分割，再结合单细胞数据聚类方法，对其数据进行重新聚类及其可视化，此方法属于生物信息学技术领域，主要用于分析少量疾病样本甲基化数据的聚类。本发明应用于甲基化数据分析领域。
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公开(公告)号：CN112451672A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN202011428416.5
申请日：2020-12-09
Applicant: 哈尔滨医科大学
IPC: A61K45/00 , A61K48/00 , A61K31/7088 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了DNMT1蛋白抑制剂在制备逆转MTX耐药肿瘤细胞耐药性的药物中的应用，属于医药技术领域。本发明针对MTX耐药且DHFR基因高度扩增的恶性肿瘤细胞，以DNMT1为靶点，降低DHFR基因的扩增程度，减少细胞内的DMs，同时，干扰DNMT1可抑制DNA双链断裂的损伤应答信号，消减HR和A‑EJ对DSBs的修复作用从而逆转肿瘤耐药，提高肿瘤治疗的效率。本发明为MTX作为主要治疗药物且易产生耐药性的恶性肿瘤的生物治疗提供新的靶向性治疗方案，并揭示肿瘤耐药细胞中DNMT1参与DMs形成以及肿瘤耐药的机制，有助于更全面解析因DSBs引发的肿瘤发生发展及耐药的过程，为逆转肿瘤耐药提供新策略。此外，本发明对于深入了解化疗耐药的本质以及寻找个体化治疗的耐药靶点也具有非常积极的意义。
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公开(公告)号：CN109593760A
公开(公告)日：2019-04-09
申请号：CN201811203594.0
申请日：2018-10-16
Applicant: 哈尔滨医科大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/519 , A61K31/7105 , A61P35/00
Abstract: 本发明公开了一种与肿瘤细胞MTX耐药性相关的circRNA及其在逆转肿瘤细胞对MTX耐药中的应用。本发明选取HT-29 MTX敏感及含DMs的MTX耐药细胞系作为研究对象，通过二代测序、验证及优选，获得在MTX耐药细胞中高表达的circRNA，命名为circRNA7746，通过建立荷瘤小鼠的MTX治疗模型结合PCR及琼脂糖凝胶电泳方法，进一步确定了circRNA7746的表达量与肿瘤细胞对氨甲蝶呤(MTX)耐药性程度正相关。利用病毒转染方法分别检测了干扰circRNA7746对细胞耐药性、DHFR基因的扩增程度及扩增形式及微核外排的影响，确定了抑制circRNA7746可以促进DMs外排，逆转肿瘤细胞对MTX耐药。本发明的提出为肿瘤治疗提供新的靶点，为有效地对抗MTX耐药提供了有效技术手段。
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