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公开(公告)号：CN105754923A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610285023.0
申请日：2016-05-04
Applicant: 云南农业大学
CPC classification number: C12N9/2445 , C12Y302/01021
Abstract: 本发明属于酶基因工程及酶工程领域，尤其是涉及一种基于β?葡萄糖苷酶的工程菌及其实现方法。本发明从乌骨绵羊粪便中提取高活性β?葡萄糖苷酶的目的菌株，并对目的菌株鉴定到种的分类学水平，预测出高活性β?葡萄糖苷酶编码基因的全长序列，构建出具有编码基因的重组载体，并利用重组载体转化得到重组基因工程菌，本发明首次从乌骨绵羊粪便中筛选到一株高产β?葡萄糖苷酶降解菌Streptomyces rochei（娄彻氏链霉菌），获得β?葡萄糖苷酶egl全长基因后成功构建pET?32a?egl表达载体，并利用表达载体构建重组基因工程大肠杆菌，得到可量产的应用基因工程菌，克服现有技术中β‐葡萄糖苷酶多为胞内酶且表达量非常低等不足，为工业化发酵生产β‐葡萄糖苷酶提供一种新方法。
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公开(公告)号：CN106086044A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610541306.7
申请日：2016-07-11
Applicant: 云南农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/66 , C12N15/746 , C12N2770/10022 , C12N2800/101
Abstract: 一种猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因重组乳酸菌的构建与表达，属于生物技术领域，其特征是：将猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因克隆、测序，对重组质粒pMD19(simple)‑dGP5和载体pNZ8149均以Nco Ⅰ、Xba Ⅰ双酶切，酶切产物纯化后以T4DNA连接酶连接；连接产物电转化至lacF基因缺失型的乳酸菌感受态NZ3900中，在LM17恢复培养基上培养，经Ellike平板筛选获得重组表达质粒pNZ8149‑dGP5；其有益效果是：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因可在乳酸乳球菌表达载体pNZ8149中进行重组，通过检测，表明外源基因GP5可以通过表达载体pNZ8149在乳酸菌中表达并具有反应原性，为下一步开发安全、有效、廉价的口服制剂提供实验依据。
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公开(公告)号：CN103290142A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310105226.3
申请日：2013-03-29
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测猪蓝耳病弱毒疫苗病毒含量的方法，属疫苗质量检测技术领域。该方法包括猪蓝耳病病弱毒疫苗病毒特异性引物设计、RNA提取、cDNA制备、实时荧光定量RT-PCR扩增、标准质粒构建及检测标准曲线建立、有效性验证和结果判定。外侧引物（SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2）用于构建标准质粒，内侧引物（SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4）用于样品检测，内侧引物扩增片段包含于外侧引物扩增片段之内，两对引物均能特异性扩增猪蓝耳病弱毒疫苗株病毒，扩增产物大小分别为287bp和130bp。本方法检测灵敏度高，检测时间短，能同时进行大批量的样本分析，具有良好的敏感性、特异性、重复性，适用于各品牌猪蓝耳病病毒弱毒疫苗病毒含量的测定。
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公开(公告)号：CN109929862B
公开(公告)日：2022-09-16
申请号：CN201910193653.9
申请日：2019-03-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种从反刍动物瘤胃宏转录组数据筛选纤维素酶基因进行克隆的方法，主要包括提供了一种纤维素酶基因以及提供了一种从反刍动物瘤胃宏转录组数据筛选纤维素酶基因进行克隆的方法。主要方法包括：对瘤胃纤维素酶基因的核酸序列进行了测序、构建独龙牛瘤胃微生物宏转录组基因文库、分析独龙牛瘤胃微生物宏转录组数据、研究纤维素酶基因的全基因合成、克隆与酶学性质。本发明最终挑选出来自GH48家族的两个纤维素酶基因并成功克隆，酶学性质研究显示，与市场所购的两种纤维素酶相比，本发明的两种酶在高温与高pH值条件下仍然保持较高的酶活性，具有一定的应用价值。
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公开(公告)号：CN109929862A
公开(公告)日：2019-06-25
申请号：CN201910193653.9
申请日：2019-03-14
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种从反刍动物瘤胃宏转录组数据筛选纤维素酶基因进行克隆的方法，主要包括提供了一种纤维素酶基因以及提供了一种从反刍动物瘤胃宏转录组数据筛选纤维素酶基因进行克隆的方法。主要方法包括：对瘤胃纤维素酶基因的核酸序列进行了测序、构建独龙牛瘤胃微生物宏转录组基因文库、分析独龙牛瘤胃微生物宏转录组数据、研究纤维素酶基因的全基因合成、克隆与酶学性质。本发明最终挑选出来自GH48家族的两个纤维素酶基因并成功克隆，酶学性质研究显示，与市场所购的两种纤维素酶相比，本发明的两种酶在高温与高pH值条件下仍然保持较高的酶活性，具有一定的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106086045A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610541781.4
申请日：2016-07-11
Applicant: 云南农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/746 , C12N2770/24322 , C12N2800/101
Abstract: 本发明提供了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组乳酸菌的方法，包括：1、猪瘟病毒F114毒株E2基因的克隆与序列分析；2、猪瘟病毒重组表达载体PNZ44‑E2的构建；3、重组质粒PNZ44‑E2在干酪乳酸杆菌中的电转化及表达；4、重组乳酸菌免疫原性分析。其有益效果是：重组乳酸菌具有益生菌的优良特性及表达外源蛋白的双重特性，动物口服活菌后，可以发挥乳酸菌作为益生菌的保健作用及在肠道表达猪瘟E2蛋白并具有免疫作用的特性，提高机体特异性体液免疫和细胞免疫能力，通过肠道粘膜免疫增强机体对猪瘟病毒的抵抗力。利用这一平台可为益生菌工程菌株的改造及表达猪瘟病毒E2蛋白的重组乳酸菌作为口服疫苗防治猪瘟奠定科学基础。
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公开(公告)号：CN103290142B
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201310105226.3
申请日：2013-03-29
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测猪蓝耳病弱毒疫苗病毒含量的方法，属疫苗质量检测技术领域。该方法包括猪蓝耳病病弱毒疫苗病毒特异性引物设计、RNA提取、cDNA制备、实时荧光定量RT-PCR扩增、标准质粒构建及检测标准曲线建立、有效性验证和结果判定。外侧引物（SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2）用于构建标准质粒，内侧引物（SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4）用于样品检测，内侧引物扩增片段包含于外侧引物扩增片段之内，两对引物均能特异性扩增猪蓝耳病弱毒疫苗株病毒，扩增产物大小分别为287bp和130bp。本方法检测灵敏度高，检测时间短，能同时进行大批量的样本分析，具有良好的敏感性、特异性、重复性，适用于各品牌猪蓝耳病病毒弱毒疫苗病毒含量的测定。
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公开(公告)号：CN209759438U
公开(公告)日：2019-12-10
申请号：CN201920454506.8
申请日：2019-04-04
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12M1/00
Abstract: 本实用新型公开了一种产纤维素酶菌培养器，包括定位座，所述定位座的上表面开设有定位槽，定位座的上方设有放置箱，放置箱的底部延伸至定位槽的内部，放置箱的内部设有定位板，定位板的左右两侧面均与放置箱的内侧壁固定连接，放置箱的上表面固定镶嵌有等距离排列的定位管，定位管的内部套设有培养试管，放置箱的内底壁固定镶嵌有透气格网，透气格网的上表固定镶嵌有通管，放置箱的上方设有箱盖，定位座的内部开设有放置腔，放置腔的内底壁固定连接有电连接板。本实用新型中，能够实现对培养试管的固定，提高对培养试管的保护，保证放置箱内部温度处于指定的范围，使温度达到纤维素霉菌的培养温度，保证对纤维素霉菌培养的成功。
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公开(公告)号：CN209741177U
公开(公告)日：2019-12-06
申请号：CN201920454501.5
申请日：2019-04-04
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本实用新型公开了一种稻草秸秆提取纤维素酶与生物饲料生产系统，包括市政电源、电源开关、控制器、加热模块、草料压缩模块、发酵模块、酶液分离单元、混合模块、饲料生产单元、后台服务器、修复模块、保护线路模块、底座、支撑板、滑轨、盛料板、支撑柱、生产箱、盖板、出料阀、拉杆、拉环和把手，所述市政电源通过导线电连接有电源开关，所述电源开关通过导线电连接有控制器，所述控制器通过导线电连接有加热模块，所述加热模块通过导线电连接有草料压缩模块。本实用新型中，通过出料发和盛料板取出饲料，达到了将纤维素酶与多功能纤溶素结合使用于发酵稻草秸秆制造生物饲料，降低了原料成本，提高了生产效率，节省了成产成本。
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公开(公告)号：CN217564479U
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN202221210489.1
申请日：2022-05-18
Applicant: 云南农业大学
IPC: A01K1/00
Abstract: 本实用新型公开了一种肉羊养殖用的采暖养殖棚，属于肉羊养殖技术领域，包括养殖棚主体，所述养殖棚主体的上方设有多组通气箱，多组所述通气箱间隔分布且之间安装有多组传风管，多组所述传风管与多组所述通气箱交替分布；所述通气箱与传风管连接处相邻的两面均贯穿开设有安装孔，所述安装孔的内部固定连接有传输管，所述传输管的另一端穿过养殖棚主体的侧壁导入内部，所述通气箱朝向传风管的面上贯穿开设有通气孔，所述传风管的上表面开设有与内部连通的通气槽；所述通气槽的内部安固定安装有收纳板。该肉羊养殖用的采暖养殖棚，使得养殖棚主体内部可以达到升温、恒温以及换气的需求，满足的肉羊的养殖的需要。
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