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公开(公告)号：CN103290142B
公开(公告)日：2015-03-11
申请号：CN201310105226.3
申请日：2013-03-29
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测猪蓝耳病弱毒疫苗病毒含量的方法，属疫苗质量检测技术领域。该方法包括猪蓝耳病病弱毒疫苗病毒特异性引物设计、RNA提取、cDNA制备、实时荧光定量RT-PCR扩增、标准质粒构建及检测标准曲线建立、有效性验证和结果判定。外侧引物（SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2）用于构建标准质粒，内侧引物（SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4）用于样品检测，内侧引物扩增片段包含于外侧引物扩增片段之内，两对引物均能特异性扩增猪蓝耳病弱毒疫苗株病毒，扩增产物大小分别为287bp和130bp。本方法检测灵敏度高，检测时间短，能同时进行大批量的样本分析，具有良好的敏感性、特异性、重复性，适用于各品牌猪蓝耳病病毒弱毒疫苗病毒含量的测定。
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公开(公告)号：CN116949197A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202311080419.8
申请日：2023-08-25
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/90
Abstract: 本发明属于生物学检测技术领域，具体涉及四种常见隐孢子虫RAA检测方法的建立。RAA技术主要使用重组酶、单链DNA结合蛋白和DNA聚合酶3种酶，在恒温条件下，重组酶与特定的引物相互结合后形成复合物，引物在模板DNA上探索到互补的序列后，在单链DNA结合蛋白作用下解链模板DNA，再在DNA聚合酶的作用下形成新的DNA互补链对。重复数十次后，新DNA链的数量会呈指数级增长，一小时内就能获得能被设备检测到的扩增片段，整个反应简单、快速。RAA技术以其操作便捷、反应时间短、灵敏度高、便于携带、稳定性好等优势，可以在基层或者偏远山区进行推广使用，在现场快速诊断中具备极大的应用潜力和前景。
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公开(公告)号：CN108411019A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810512105.3
申请日：2018-05-25
Applicant: 云南农业大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子检测领域，提供了环介导等温扩增技术检测猫胞裂虫的方法及其应用，设计合成专用引物，包括2条内引物FIP和BIP，2条外引物F3和B3，以待测的猫基因组DNA为模板，在专用引物的引导下进行LAMP扩增；取LAMP产物小心垂直加到加样孔中，对照Marker是DL2000DNA，用100V电泳电压，约30min，停止电泳，取出凝胶，于紫外凝胶成像系统中观察凝胶，观察有目的条带为阳性，没有目的条带为阴性；还可以将SYBR Green I加入到扩增产物中，在紫外光照射下，发出淡黄绿色荧光的为阳性，红橙色为阴性。本发明可以快速、准确的检测猫胞裂虫，CR高，并且耗时短、成本低、操作简单，便于临床上应用。
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公开(公告)号：CN103290142A
公开(公告)日：2013-09-11
申请号：CN201310105226.3
申请日：2013-03-29
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测猪蓝耳病弱毒疫苗病毒含量的方法，属疫苗质量检测技术领域。该方法包括猪蓝耳病病弱毒疫苗病毒特异性引物设计、RNA提取、cDNA制备、实时荧光定量RT-PCR扩增、标准质粒构建及检测标准曲线建立、有效性验证和结果判定。外侧引物（SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2）用于构建标准质粒，内侧引物（SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4）用于样品检测，内侧引物扩增片段包含于外侧引物扩增片段之内，两对引物均能特异性扩增猪蓝耳病弱毒疫苗株病毒，扩增产物大小分别为287bp和130bp。本方法检测灵敏度高，检测时间短，能同时进行大批量的样本分析，具有良好的敏感性、特异性、重复性，适用于各品牌猪蓝耳病病毒弱毒疫苗病毒含量的测定。
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公开(公告)号：CN110317888A
公开(公告)日：2019-10-11
申请号：CN201910267851.5
申请日：2019-04-03
Applicant: 云南农业大学 , 云南省动物疫病预防控制中心
Abstract: 本发明属基因检测技术领域，涉及一种猫血巴尔通氏体SYBR Green I荧光PCR检测方法及引物，包括以下步骤：提取猫血液中全基因组DNA，设计引物，引物稀释，优化反应条件，绘制溶解度曲线，绘制标准曲线，检测特异性，测定变异系数，验证及结果分析。本发明检测方法优点在于建立了不用核酸探针即可检测的PCR技术，简单、快速、价格低廉，在一般的实验室即可实现，与传统的普通PCR方法相比较，这种方法无需对PCR产物进行凝胶电泳分析，可避免产物引起模板污染，而且可实时观察反应来判读结果，在一定程度上避免了传统PCR容易产生的假阳性结果。
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公开(公告)号：CN115919947A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211655998.X
申请日：2022-12-22
Applicant: 云南农业大学
IPC: A61K36/79 , A61K36/736 , A61P1/12
Abstract: 本发明公开了一种用于防治羔羊腹泻的中药组合物及其制备方法，本发明组方为乌梅60g、五味子30g、黄连30g、石榴皮30g。高、中剂量组方可降低小鼠混合腹泻模型的死亡率，对小鼠的体重、部分血液生理生化指标具有改善作用，说明高、中剂量组方对小鼠混合腹泻模型具有较好的疗效，为治疗羔羊腹泻的复方中药提供理论基础及重要的科学依据。
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公开(公告)号：CN108411019B
公开(公告)日：2021-08-13
申请号：CN201810512105.3
申请日：2018-05-25
Applicant: 云南农业大学 , 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于分子检测领域，提供了环介导等温扩增技术检测猫胞裂虫的方法及其应用，设计合成专用引物，包括2条内引物FIP和BIP，2条外引物F3和B3，以待测的猫基因组DNA为模板，在专用引物的引导下进行LAMP扩增；取LAMP产物小心垂直加到加样孔中，对照Marker是DL2000DNA，用100V电泳电压，约30min，停止电泳，取出凝胶，于紫外凝胶成像系统中观察凝胶，观察有目的条带为阳性，没有目的条带为阴性；还可以将SYBR Green I加入到扩增产物中，在紫外光照射下，发出淡黄绿色荧光的为阳性，红橙色为阴性。本发明可以快速、准确的检测猫胞裂虫，CR高，并且耗时短、成本低、操作简单，便于临床上应用。
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公开(公告)号：CN108663514A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201810476893.5
申请日：2018-05-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 云南农业大学
IPC: G01N33/558 , G01N33/68 , G01N33/569
CPC classification number: G01N33/558 , G01N33/56905 , G01N33/6893 , G01N2333/45 , G01N2333/47
Abstract: 本发明公开了一种弓形虫纳米胶体碳诊断试纸条及制备方法，该弓形虫纳米胶体碳诊断试纸条包括：吸水垫、硝酸纤维素膜、纳米胶体碳释放垫、样品垫、PVC胶板；该弓形虫纳米胶体碳诊断试纸条的制备方法包括：弓形虫抗原ESA的制备、兔抗ESA血清的制备、纯化兔抗ESA抗体、确定纳米胶体碳ESA溶液的最佳PH值及ESA的用量、纳米胶体碳母液的制备、纳米胶体碳溶液最佳稀释倍数的确定、试纸条的组装，本研究建立的弓形虫病胶体碳诊断试纸条灵敏度和特异性较好，具有操作简单、快速，检测条带清晰，相对于传统的胶体金诊断试纸条制作成本极大降低的优点，适用于临床弓形虫病的快速诊断。
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公开(公告)号：CN103224996A
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN201310123401.1
申请日：2013-04-10
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的方法, 属疫苗质量监测技术领域。本发明方法包括特异性引物及Taqman荧光探针的设计、RNA提取、cDNA制备、标准质粒构建、Taqman荧光定量PCR检测标准曲线的建立、有效性验证和结果判定。设计合成了两对引物，均能特异性扩增猪瘟兔化弱毒病毒的cDNA，SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2扩增产物大小为197bp，用于构建标准浓度的质粒，SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4扩增产物大小为143bp，包含于前述扩增产物197bp之内,加入荧光探针SEQ ID NO.5用于Taqman荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量。本发明方法检测灵敏度高，检测时间短，能同时进行大批量的样本分析，具有良好的敏感性、特异性、重复性，适用于各品牌猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的测定。
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公开(公告)号：CN103098826A
公开(公告)日：2013-05-15
申请号：CN201310007596.3
申请日：2013-03-07
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了属于猪蛔虫卵的杀灭技术领域的一种紫茎泽兰提取物在杀灭猪蛔虫卵中的应用。本发明通过改良提取工艺，提取紫茎泽兰中具有杀虫活性的有效成分，将提取物作用于新鲜的猪蛔虫卵，通过显微镜观察，对虫卵的孵化率进行统计，结果发现，紫茎泽兰提取液对猪蛔虫卵具有很好的杀灭效果。
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