一种猪肝细胞的原代培养方法

    公开(公告)号:CN107151651A

    公开(公告)日:2017-09-12

    申请号:CN201710525598.X

    申请日:2017-06-30

    Abstract: 本发明公开了一种猪肝细胞的原代培养方法,其特征在于:包括依次进行的肝脏的获取、肝脏组织压块、肝细胞培养、原代细胞鉴定,其中,所述肝脏组织压块是将肝脏于灭菌培养皿中,剪碎后放置在30~60目网筛中碾压,收集滤过的肝脏组织块于灭菌容器中。本申请采用网筛碾压组织块培养法,通过网筛碾压得到合适的猪肝脏组织块,大小适宜贴壁生长,肝细胞长势良好。

    一种基于β-葡萄糖苷酶的工程菌及其实现方法

    公开(公告)号:CN105754923A

    公开(公告)日:2016-07-13

    申请号:CN201610285023.0

    申请日:2016-05-04

    CPC classification number: C12N9/2445 C12Y302/01021

    Abstract: 本发明属于酶基因工程及酶工程领域,尤其是涉及一种基于β?葡萄糖苷酶的工程菌及其实现方法。本发明从乌骨绵羊粪便中提取高活性β?葡萄糖苷酶的目的菌株,并对目的菌株鉴定到种的分类学水平,预测出高活性β?葡萄糖苷酶编码基因的全长序列,构建出具有编码基因的重组载体,并利用重组载体转化得到重组基因工程菌,本发明首次从乌骨绵羊粪便中筛选到一株高产β?葡萄糖苷酶降解菌Streptomyces rochei(娄彻氏链霉菌),获得β?葡萄糖苷酶egl全长基因后成功构建pET?32a?egl表达载体,并利用表达载体构建重组基因工程大肠杆菌,得到可量产的应用基因工程菌,克服现有技术中β‐葡萄糖苷酶多为胞内酶且表达量非常低等不足,为工业化发酵生产β‐葡萄糖苷酶提供一种新方法。

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