公开(公告)号：CN104630365A

公开(公告)日：2015-05-20

申请号：CN201510064328.4

申请日：2015-02-09

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张以芳 ,  秦波 ,  王生奎 ,  王清露 ,  史宪伟 ,  张辰宇 ,  柴俊 ,  柳桐 ,  王有涛

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6883 ,  C12Q1/6827 ,  C12Q2600/156

Abstract: 本发明涉及一种用于检测奶牛结核病易感性的检测标靶及引物，属于生物医学技术领域。本发明通过所述引物对奶牛外周血基因组中BOLA-DRB3.2基因的多态性进行检测，并以所述SNP位点为标靶设计引物：上游：5’-CTCTGTCTGTTGAGCGAAGATG-3’，下游:5’-AGTCACGCATTGACAAAATCAC-3’，测定样品基因型，通过测定样品中上述基因的基因型来评估患结核病的风险，为实现对个体患结核病预警风险的评估提供一种方案，为奶牛结核病净化及抗结核健康奶牛种群选育提供一种方法。

公开(公告)号：CN106086045A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610541781.4

申请日：2016-07-11

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张以芳 ,  童亮 ,  张绍美 ,  杨洁 ,  马志亮 ,  周玉照 ,  张辰宇 ,  徐佳 ,  柴俊 ,  刘旭川

IPC: C12N15/40 ,  C12N15/11 ,  C12N15/74

CPC classification number: C07K14/005 ,  C12N15/746 ,  C12N2770/24322 ,  C12N2800/101

Abstract: 本发明提供了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组乳酸菌的方法，包括：1、猪瘟病毒F114毒株E2基因的克隆与序列分析；2、猪瘟病毒重组表达载体PNZ44‑E2的构建；3、重组质粒PNZ44‑E2在干酪乳酸杆菌中的电转化及表达；4、重组乳酸菌免疫原性分析。其有益效果是：重组乳酸菌具有益生菌的优良特性及表达外源蛋白的双重特性，动物口服活菌后，可以发挥乳酸菌作为益生菌的保健作用及在肠道表达猪瘟E2蛋白并具有免疫作用的特性，提高机体特异性体液免疫和细胞免疫能力，通过肠道粘膜免疫增强机体对猪瘟病毒的抵抗力。利用这一平台可为益生菌工程菌株的改造及表达猪瘟病毒E2蛋白的重组乳酸菌作为口服疫苗防治猪瘟奠定科学基础。

公开(公告)号：CN106086044A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610541306.7

申请日：2016-07-11

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张以芳 ,  马志亮 ,  杨洁 ,  周玉照 ,  张辰宇 ,  郑锦玲 ,  刘旭川

IPC: C12N15/40 ,  C12N15/11 ,  C12N15/74 ,  C12N15/66

CPC classification number: C07K14/005 ,  C12N15/66 ,  C12N15/746 ,  C12N2770/10022 ,  C12N2800/101

Abstract: 一种猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因重组乳酸菌的构建与表达，属于生物技术领域，其特征是：将猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因克隆、测序，对重组质粒pMD19(simple)‑dGP5和载体pNZ8149均以Nco Ⅰ、Xba Ⅰ双酶切，酶切产物纯化后以T4DNA连接酶连接；连接产物电转化至lacF基因缺失型的乳酸菌感受态NZ3900中，在LM17恢复培养基上培养，经Ellike平板筛选获得重组表达质粒pNZ8149‑dGP5；其有益效果是：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因可在乳酸乳球菌表达载体pNZ8149中进行重组，通过检测，表明外源基因GP5可以通过表达载体pNZ8149在乳酸菌中表达并具有反应原性，为下一步开发安全、有效、廉价的口服制剂提供实验依据。