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公开(公告)号：CN106086045A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610541781.4
申请日：2016-07-11
Applicant: 云南农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/746 , C12N2770/24322 , C12N2800/101
Abstract: 本发明提供了一种表达猪瘟病毒E2蛋白的重组乳酸菌的方法，包括：1、猪瘟病毒F114毒株E2基因的克隆与序列分析；2、猪瘟病毒重组表达载体PNZ44‑E2的构建；3、重组质粒PNZ44‑E2在干酪乳酸杆菌中的电转化及表达；4、重组乳酸菌免疫原性分析。其有益效果是：重组乳酸菌具有益生菌的优良特性及表达外源蛋白的双重特性，动物口服活菌后，可以发挥乳酸菌作为益生菌的保健作用及在肠道表达猪瘟E2蛋白并具有免疫作用的特性，提高机体特异性体液免疫和细胞免疫能力，通过肠道粘膜免疫增强机体对猪瘟病毒的抵抗力。利用这一平台可为益生菌工程菌株的改造及表达猪瘟病毒E2蛋白的重组乳酸菌作为口服疫苗防治猪瘟奠定科学基础。
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公开(公告)号：CN106086044A
公开(公告)日：2016-11-09
申请号：CN201610541306.7
申请日：2016-07-11
Applicant: 云南农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/66 , C12N15/746 , C12N2770/10022 , C12N2800/101
Abstract: 一种猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因重组乳酸菌的构建与表达，属于生物技术领域，其特征是：将猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因克隆、测序，对重组质粒pMD19(simple)‑dGP5和载体pNZ8149均以Nco Ⅰ、Xba Ⅰ双酶切，酶切产物纯化后以T4DNA连接酶连接；连接产物电转化至lacF基因缺失型的乳酸菌感受态NZ3900中，在LM17恢复培养基上培养，经Ellike平板筛选获得重组表达质粒pNZ8149‑dGP5；其有益效果是：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5基因可在乳酸乳球菌表达载体pNZ8149中进行重组，通过检测，表明外源基因GP5可以通过表达载体pNZ8149在乳酸菌中表达并具有反应原性，为下一步开发安全、有效、廉价的口服制剂提供实验依据。
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公开(公告)号：CN119552785B
公开(公告)日：2025-05-02
申请号：CN202510126366.1
申请日：2025-01-27
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本申请公开了一株高效广谱生防菌假单胞菌FM36及其应用，所述小麦假单胞菌为菌株FM36，分类命名为小麦假单胞菌Pseudomonas siliginis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.32868。本申请还提供了上述小麦假单胞菌FM36菌株在促进番茄生长、防治植物病毒和病原真菌中的应用。本申请提供的小麦假单胞菌对番茄生长和增产具有促进作用，对烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，TMV）和红辣椒脉斑驳病毒（chilli veinal mottle virus，ChiVMV），以及立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）、细极链格孢（Alternaria tenuissima）、白蜡刺盘孢（Colletotrichum spaethianum）、尖刀镰孢菌古巴专化型（Fusarium oxysporium f.sp.cubense）等病原真菌表现出明显的拮抗与抑制作用。
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公开(公告)号：CN119875969A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202510378154.2
申请日：2025-03-28
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本申请公开了一株抗病促生亚洲假单胞菌LC40及其应用，涉及微生物技术领域，所述假单胞菌具体为亚洲假单胞菌（Pseudomonas asiatica）LC40，于2024年12月2日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.32869。该菌株能应用于抑制烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，TMV）、番茄褐色皱果病毒（tomato brown rugose fruit virus，ToBRFV）、水稻稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）以及香葱叶斑病菌细极链格孢（Alternaria tenuissima）。本申请所涉及的亚洲假单胞菌LC40具备溶磷能力，并能分泌生长素类化合物IAA，田间试验结果表明LC40菌株对番茄具有促进生长和提高产量的效果。亚洲假单胞菌LC40菌株能够有效预防和控制植物病害，促进作物生长，进而提升作物的产量及品质，展现出良好的防病促生应用前景。
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公开(公告)号：CN119552785A
公开(公告)日：2025-03-04
申请号：CN202510126366.1
申请日：2025-01-27
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本申请公开了一株高效广谱生防菌假单胞菌FM36及其应用，所述小麦假单胞菌为菌株FM36，分类命名为小麦假单胞菌Pseudomonas siliginis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC NO.32868。本申请还提供了上述小麦假单胞菌FM36菌株在促进番茄生长、防治植物病毒和病原真菌中的应用。本申请提供的小麦假单胞菌对番茄生长和增产具有促进作用，对烟草花叶病毒（tobacco mosaic virus，TMV）和红辣椒脉斑驳病毒（chilli veinal mottle virus，ChiVMV），以及立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、稻瘟病菌（Magnaporthe oryzae）、细极链格孢（Alternaria tenuissima）、白蜡刺盘孢（Colletotrichum spaethianum）、尖刀镰孢菌古巴专化型（Fusarium oxysporium f.sp.cubense）等病原真菌表现出明显的拮抗与抑制作用。
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公开(公告)号：CN103224996A
公开(公告)日：2013-07-31
申请号：CN201310123401.1
申请日：2013-04-10
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的方法, 属疫苗质量监测技术领域。本发明方法包括特异性引物及Taqman荧光探针的设计、RNA提取、cDNA制备、标准质粒构建、Taqman荧光定量PCR检测标准曲线的建立、有效性验证和结果判定。设计合成了两对引物，均能特异性扩增猪瘟兔化弱毒病毒的cDNA，SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2扩增产物大小为197bp，用于构建标准浓度的质粒，SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4扩增产物大小为143bp，包含于前述扩增产物197bp之内,加入荧光探针SEQ ID NO.5用于Taqman荧光定量RT-PCR检测猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量。本发明方法检测灵敏度高，检测时间短，能同时进行大批量的样本分析，具有良好的敏感性、特异性、重复性，适用于各品牌猪瘟兔化弱毒疫苗病毒含量的测定。
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