公开(公告)号：CN105754923A

公开(公告)日：2016-07-13

申请号：CN201610285023.0

申请日：2016-05-04

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 冷静 ,  廖奇 ,  朱仁俊 ,  张晓燕 ,  邓卫东 ,  顾招兵 ,  杨天龙 ,  毛华明 ,  张以芳 ,  刘旭川 ,  张春勇 ,  李亚莉

IPC: C12N1/21 ,  C12N9/42 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/2445 ,  C12Y302/01021

Abstract: 本发明属于酶基因工程及酶工程领域，尤其是涉及一种基于β?葡萄糖苷酶的工程菌及其实现方法。本发明从乌骨绵羊粪便中提取高活性β?葡萄糖苷酶的目的菌株，并对目的菌株鉴定到种的分类学水平，预测出高活性β?葡萄糖苷酶编码基因的全长序列，构建出具有编码基因的重组载体，并利用重组载体转化得到重组基因工程菌，本发明首次从乌骨绵羊粪便中筛选到一株高产β?葡萄糖苷酶降解菌Streptomyces rochei（娄彻氏链霉菌），获得β?葡萄糖苷酶egl全长基因后成功构建pET?32a?egl表达载体，并利用表达载体构建重组基因工程大肠杆菌，得到可量产的应用基因工程菌，克服现有技术中β‐葡萄糖苷酶多为胞内酶且表达量非常低等不足，为工业化发酵生产β‐葡萄糖苷酶提供一种新方法。