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公开(公告)号：CN119020301A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411115646.4
申请日：2024-08-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种新城疫M1N毒株及改造方法和重组疫苗制备方法，所述细胞株于2024年1月19日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，CGMCC No.45869，所述菌株的分类名为新城疫病毒株。本发明构建的重组疫苗毒株与La Sota相比，在鸡胚的增殖效率更高，重组疫苗毒株灭活苗抗原性更好，激发的抗体水平更高；并且在高水平母源抗体的鸡中也能激发有效的抗体水平。
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公开(公告)号：CN116904512B
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202310916062.6
申请日：2023-07-25
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供一种基于体外连接手段的拯救猪流行性腹泻病毒FJzz1株的反向遗传系统及其应用。通过对其全基因组进行分析，在其全基因组内特有的限制性内切酶酶切位点的基础上，我们将其分为A、B、C、D、E、F和G大小不等的七个片段。随后为提高后续连接效率，我们将这七个小片段整合为AB、CDE和FG三个大片段。利用T7体外转录试剂盒将全长cDNA体外转录为RNA转录本与N基因RNA转录本一起转染至Vero细胞拯救病毒。成功获得了可稳定遗传，且具有遗传标记的rFJzz1弱毒感染性克隆毒株，为后续研究FJzz1株PEDV致病机理和新型疫苗的研制提供了技术平台。
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公开(公告)号：CN118853587A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202411037302.6
申请日：2024-07-30
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一株特异性分泌BP26抗体的单克隆细胞株2D3、单链抗体及制备方法，属于兽医生物技术领域。本发明表达和纯化了犬种布鲁菌BP26蛋白。通过该蛋白免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞体外融合，获得特异性分泌BP26抗体的单克隆细胞株2D3。之后，提取该单克隆细胞2D3的RNA，反转录为cDNA，扩增表达单克隆抗体的VL和VH，并将VL和VH基因连接，获得单链抗体基因。将该基因与pCold‑TF载体进行连接，转化至BL21感受态细胞中进行诱导表达，得到针对犬种布鲁菌BP26蛋白的单链抗体。本发明针对犬种布鲁菌BP26蛋白的单链抗体可与BP26蛋白结合，对于开发新型的布病检测试剂具有重要意义。
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公开(公告)号：CN118846023A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410799352.1
申请日：2024-06-20
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: A61K39/12 , C12N7/01 , C12N15/86 , C12N15/66 , C12N15/24 , C12N15/40 , A61K39/187 , A61K38/20 , A61P31/14 , A61P37/04 , C12R1/93
Abstract: 本发明要求保护一种能够同时表达猪瘟病毒E2基因和IL18基因的重组活载体疫苗的构建方法和应用。利用嵌合质粒pPRRSV‑E2‑N‑IL18‑Y转染MARC‑145细胞后，成功拯救出活病毒，并且发现重组病毒rPRRSV‑E2‑N‑IL18‑Y与亲本病毒vHuN4‑F112和重组病毒rPRRSV‑E2具有相似的病毒学特性。将重组病毒rPRRSV‑E2‑N‑IL18‑Y进行猪体免疫实验，发现重组病毒对猪体均具有良好的安全性，免疫后可以有效诱导机体产生免疫应答，产生高水平的针对PRRSV N蛋白的抗体和CSFV E2蛋白的抗体，而且可以诱导更高的细胞免疫水平，是一种良好的基因工程疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN118440903A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410573898.5
申请日：2024-05-10
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/12 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于chNectin4基因的细胞改造方法及其应用，将含有chNectin4基因的转基因载体引入宿主细胞，筛选得到表达chNectin4受体的新城疫病毒细胞系，其中，优化chNectin4基因的序列如SEQ ID NO.2所示。本发明中的优化后的chNectin4基因在BHK‑21细胞中的稳定表达可以促进新城疫病毒的感染与增殖，增殖效率高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113583876B
公开(公告)日：2024-07-09
申请号：CN202110882861.7
申请日：2021-08-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开EYFP敲入到Et.Actin基因的鸡柔嫩艾美尔球虫虫株的制备。该专利将FnCas12a蛋白，体外合成的crRNA和同源重组片段（含有P2A‑DHFR‑EYFP表达框的Et.Actin基因）利用Lonza 4D‑Nucleofector核转仪导入鸡柔嫩艾美尔球虫子孢子，实现对鸡柔嫩艾美尔球虫的编辑。将编辑虫株经过鸡体内乙胺嘧啶筛选，获得高纯度的基因编辑虫株。然后，利用PCR和Sanger测序技术对基因编辑虫株进行验证，证明EYFP成功标记了Et.Actin基因。通过细胞培养该虫株的子孢子并感染鸡后，取盲肠粘膜并涂片显示该EYFP在基因编辑虫株的整个生活史中都有表达。此基因编辑方法能够对鸡球虫的基因进行定点标记，有助于解析球虫基因的功能。本专利对新型抗球虫药物和疫苗的研发也具有重要意义。
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公开(公告)号：CN113341160B
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202110644979.6
申请日：2021-06-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: G01N33/68 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种检测犬、羊等家畜细粒棘球绦虫感染的ELISA试剂盒；所述试剂盒中的包被抗原为重组细粒棘球绦虫14‑3‑3ζ蛋白。本发明首次克隆、表达出细粒棘球绦虫重组蛋白rEg14‑3‑3ζ；免疫印迹显示，重组蛋白具有良好的反应原性；发现rEg14‑3‑3ζ免疫小鼠后，诱导产生良好的体液和细胞免疫反应，主要诱导产生Th1型免疫应答。进一步的，本发明基于rEg14‑3‑3ζ蛋白建立了检测细粒棘球绦虫抗体的间接ELISA方法，制备了ELISA试剂盒，具有较好的敏感性、特异性和重复性，为家畜细粒棘球绦虫感染及囊型包虫病流行病学调查和诊断提供了一种有效的方法。
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公开(公告)号：CN118147169A
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202311401823.0
申请日：2023-10-26
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 一种mRNA，包括转录自5’‑UTR序列、3’‑UTR序列、信号肽序列和抗原蛋白编码基因序列等各个序列的RNA。当抗原蛋白编码基因序列为ASFV毒力蛋白，比如：p30蛋白，制得的mRNA向猪只体内注射，经二免后一周能够产生高水平抗体。据此，本发明提供的mRNA能作为活性物质用于疫苗的制取，比如：在制备非洲猪瘟病毒疫苗中的应用。
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公开(公告)号：CN118127078A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410123235.3
申请日：2024-01-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了pJEV‑CMV‑p54复制子质粒及制备方法和应用，属于分子生物学技术领域。本发明以缺失了C、prM和E结构蛋白基因的基因I型日本脑炎病毒基因组为骨架，在缺失结构蛋白的部位插入非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白基因，成功构建了能够高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白的pJEV‑CMV‑p54复制子质粒，pJEV‑CMV‑p54具有自我复制能力，并能高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白，为ASFV疫苗的研发进一步提供思路。
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公开(公告)号：CN118048406A
公开(公告)日：2024-05-17
申请号：CN202410237107.1
申请日：2024-03-01
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/867 , C12N15/50 , C12N7/01 , C12N5/10 , C07K14/165 , C12R1/92
Abstract: 本发明提供了一种高表达IBV‑N蛋白的细胞株及其构建方法，所述高表达IBV‑N蛋白的细胞株为基因组中整合有IBV‑QX(SD)‑N基因的哺乳动物细胞，所述IBV‑QX(SD)‑N基因通过慢病毒导入哺乳动物细胞。本发明的高表达IBV‑N蛋白的细胞株可用于基于体外连接的反向遗传学的病毒拯救，克服电击转染后IBV基因组RNA在哺乳细胞内降解的技术难题，核衣壳蛋白N能够与转染的病毒基因组RNA结合，增强基因组RNA在细胞中的稳定性，从而提高病毒拯救效率。
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