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公开(公告)号:CN118127078A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410123235.3
申请日:2024-01-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了pJEV‑CMV‑p54复制子质粒及制备方法和应用,属于分子生物学技术领域。本发明以缺失了C、prM和E结构蛋白基因的基因I型日本脑炎病毒基因组为骨架,在缺失结构蛋白的部位插入非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白基因,成功构建了能够高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白的pJEV‑CMV‑p54复制子质粒,pJEV‑CMV‑p54具有自我复制能力,并能高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白,为ASFV疫苗的研发进一步提供思路。
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公开(公告)号:CN116179572A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202310208576.6
申请日:2023-03-04
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/31 , C12N15/70 , C12N15/66 , C07K14/315
Abstract: 本发明涉及猪链球菌保护性抗原ESPss的基因序列、表达方法及其应用,属于动物免疫技术领域。本发明通过人工合成的ESPss蛋白的核苷酸序列;使用带有EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点的引物对对核苷酸序列进行扩增,得到目的基因PCR产物和pET‑28a阳性质粒使用EcoRⅠ和XhoⅠ酶进行双酶切处理后连接后,诱导重组ESPss蛋白的表达,得到保护性抗原ESPss,其可以显著提高小鼠的抗体水平,可以显著提升宿主动物血清及脏器细胞因子IL‑4和IFN‑γ的表达水平,并为2型、7型和9型猪链球菌感染提供较好的免疫保护作用。
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公开(公告)号:CN113981151B
公开(公告)日:2023-01-24
申请号:CN202111478453.1
申请日:2021-12-06
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的方法及其试剂盒,属于病毒分子检测领域。为克服临床上缺少对基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒鉴别的方法,本发明提供一种基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的鉴别方法以及引物和探针,所涉及引物和TaqMan探针是依据乙脑病毒的prM/M基因保守区和盖他病毒的E2基因保守区进行设计,其可以有效鉴别乙脑病毒和盖他病毒,具有较高特异性和灵敏度的优点,可以为乙脑病毒和盖他病毒基因型的快速检测、临床诊断以及流行病学调查提供更好的方法支持。
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公开(公告)号:CN119899916A
公开(公告)日:2025-04-29
申请号:CN202510034384.7
申请日:2025-01-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于病毒检测领域,具体涉及一种同时检测PRRSV、PCV2、SIV的多重荧光定量PCR试剂盒及其检测方法。PRRSV、PCV2和SIV均可以猪作为宿主,且部分感染症状相似,现有技术中虽然存在单独的检测手段,但存在检测效率低、检测时间长且难以区分的缺陷,为了克服上述技术的不足,本发明提供一种同时检测PRRSV、PCV2、SIV的多种荧光定量PCR试剂盒及其检测方法,所述的试剂盒包括反应液A、反应液B、阴性对照和阳性对照,其通过特定的引物探针组对病毒的特定序列进行多重荧光定量PCR,通过检测荧光信号确定宿主是否感染特定病毒,具有检测时间短、灵敏度高的优点,解决临床上混合感染后难以区分的难题。
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公开(公告)号:CN119799838A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202510091779.0
申请日:2025-01-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心) , 新疆农业大学
Abstract: 本发明涉及一种猪临床病料中胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定培养基及其制备方法,属于微生物培养领域。现有技术中用于猪临床呼吸道感染病料中胸膜肺炎放线杆菌分离的培养基多为常规的普通TSA或改良TSA培养基,其难以将胸膜肺炎放线杆菌与其他呼吸道感染细菌进行区分,并不适用于临床上胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定。为了克服上述现有技术的不足,本发明提供一种猪临床病料中胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定显色培养基及其制备方法,该培养基包括胰蛋白胨、大豆蛋白胨等组分,将其用于临床猪呼吸道病料的病原菌分离时,可以通过菌落特异性显色及生长状态对胸膜肺炎放线杆菌进行分离鉴定,显著降低其他杂菌的影响,适宜在猪发生呼吸道感染后的病料样本处理过程中进行推广应用。
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公开(公告)号:CN117778629A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202410052803.5
申请日:2024-01-12
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种利用三重RT‑qPCR检测蜱传脑炎、乙型脑炎和山羊关节炎脑炎的方法及试剂盒,属于分子生物学和核酸检测领域。该方法通过设置针对蜱传脑炎的C基因、乙型脑炎病毒的NS2A基因和山羊关节炎脑炎病毒基因组的gag基因的三组引物对和探针,通过RT‑qPCR方式测定达到荧光值的Ct值,依据判定规则确定是否感染病毒以及种类,该检测方法具有检测灵敏度高,特异性好、操作简便、快速的特点,适合在实际检测中推广应用。
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公开(公告)号:CN113135997B
公开(公告)日:2022-08-19
申请号:CN202110336260.6
申请日:2021-03-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/81 , C12N15/66 , C12N15/64 , C12P21/02 , A23B4/20 , A23C3/08 , C12R1/865
Abstract: 本发明提供了一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法,属于功能多肽筛选技术领域。为了克服现有技术的不足,本发明提供一种用于食品保鲜的杂合肽及其在酿酒酵母表达系统的基因表达方法,该杂合肽融合了猪源抗菌肽cecropin P1的活性区域和牛源抗菌肽的活性区域的优势获得新型的杂合肽,通过人工合成杂合肽基因并将目的基因连接在质粒pYES2‑ɑ上获得新型杂合肽重组酵母菌株,使用半乳糖诱导其表达,上清液进一步纯化后即可用于食品保鲜,尤其对于新鲜猪肉保鲜和牛奶保鲜具有很好的效果。
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公开(公告)号:CN114181953A
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202111572371.3
申请日:2021-12-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法及其应用,属于分子生物学领域。为了克服黄病毒NS2A研究过程中缺乏针对NS2A的特异性抗体的技术不足,本发明提供一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法,并公开了其应用。本发明通过在NS1与NS2A之间插入HA标签,通过HA标签来指示NS2A,同时为避免影响NS2A荧光信号的观察,对NS2A第30个氨基酸进行点突变,以干扰NS2A的茎环结构,消除病毒复制过程的‑1核糖体移码。本发明所述的携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆对于黄病毒的研究具有重要的价值。
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公开(公告)号:CN110396502A
公开(公告)日:2019-11-01
申请号:CN201910736306.6
申请日:2019-08-09
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/65
Abstract: 本发明公开了一种对JEV易感的猪扁桃体细胞系的构建方法,该方法包含:获得原代猪扁桃体细胞,并进行培养;以pHY-sv40-Puro作为慢病毒载体,以psPAX2和pCMV-VSV-G作为辅助包装载体,共同转染进入293T细胞中,获得慢病毒颗粒;将慢病毒颗粒感染经培养后的原代猪扁桃体细胞系;经过感染后,将猪扁桃体细胞在含血清的DMEM/F12培养液中添加嘌呤霉素进行细胞筛选,获得阳性细胞;将阳性细胞用不含嘌呤霉素的培养液扩大培养,得到扁桃体上皮细胞传代细胞系。本发明的方法以猪扁桃体细胞作为宿主细胞,通过感染的方法得到JEV易感的猪扁桃体细胞系,该细胞系对JEV敏感,可以用于相关研究。
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公开(公告)号:CN119570896A
公开(公告)日:2025-03-07
申请号:CN202411811025.X
申请日:2024-12-10
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及一种用于猪链球菌分离鉴定的选择性显色培养基及其制备方法,属于微生物培养领域。现有技术中猪链球菌的培养基主要侧重于提高猪链球菌菌株含量的提高,但并不适用于临床上猪链球菌的分离鉴定,其难以将临床样品中的其它杂菌区分开来,导致分离失败。为了克服上述现有技术的不足,本发明提供一种用于猪链球菌分离鉴定的选择性显色培养基及其制备方法,该培养基包括胰蛋白胨、大豆胨等组分,将其用于临床猪呼吸道样品的病原菌分离时时,可以准确地通过菌落特异性显色及生长状态对猪链球菌进行分离鉴定,显著降低其他杂菌的影响,适宜在猪呼吸道样本处理过程中进行推广应用。
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