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公开(公告)号：CN117904072A
公开(公告)日：2024-04-19
申请号：CN202410024495.5
申请日：2024-01-08
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N9/14 , C12N15/55 , C12N15/70 , C07K16/40 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/573 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对PRRSV解旋酶的抗原表位、单克隆抗体制备方法及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp10，利用大肠杆菌表达重组Nsp10，纯化后免疫Balb/c小鼠，经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞，然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗PRRSV Nsp10的单克隆抗体，并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为425TDKRVVDSLR434。
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公开(公告)号：CN117904072B
公开(公告)日：2025-01-28
申请号：CN202410024495.5
申请日：2024-01-08
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N9/14 , C12N15/55 , C12N15/70 , C07K16/40 , C07K16/06 , G01N33/577 , G01N33/573 , G01N33/569
Abstract: 本发明涉及一株针对PRRSV解旋酶的抗原表位、单克隆抗体制备方法及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp10，利用大肠杆菌表达重组Nsp10，纯化后免疫Balb/c小鼠，经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞，然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗PRRSV Nsp10的单克隆抗体，并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为425TDKRVVDSLR434。
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公开(公告)号：CN117886906B
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202410087827.4
申请日：2024-01-22
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪瘟病毒Erns蛋白的抗原表位、单克隆抗体及其应用。通过构建真核表达载体pCDNA3.4‑Erns‑strep，瞬时转染CHO细胞表达重组Erns蛋白，利用strep标签纯化重组蛋白，四次免疫Balb/C小鼠，分离小鼠脾细胞，利用FACS法分离特异性B细胞，并通过反转录和PCR获得单个B细胞抗体的可变区序列，构建重链、轻链重组表达质粒，瞬时转染CHO细胞，表达并利用Protein G纯化获得完整的抗CSFV Erns蛋白单克隆抗体，并鉴定了该抗体识别的抗原表位序列为113TCRYDKNTDVNVVTQARNRPTTLTGCKKGKNFSF146。
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公开(公告)号：CN117903262B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202410083824.3
申请日：2024-01-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/08 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒Nsp7单克隆抗体的制备、表位鉴定及应用。通过构建原核表达载体pCold‑I‑Nsp7，利用大肠杆菌表达重组Nsp7，纯化后免疫Balb/c小鼠，经过四次免疫后取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞进行融合制备杂交瘤细胞，然后利用间接ELISA方法进行亚克隆获得抗Nsp7的单克隆抗体，并鉴定了该抗体所对应的抗原表位为184KFWDKNSGD192。
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公开(公告)号：CN117886906A
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202410087827.4
申请日：2024-01-22
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/18 , C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/187 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种猪瘟病毒Erns蛋白的抗原表位、单克隆抗体及其应用。通过构建真核表达载体pCDNA3.4‑Erns‑strep，瞬时转染CHO细胞表达重组Erns蛋白，利用strep标签纯化重组蛋白，四次免疫Balb/C小鼠，分离小鼠脾细胞，利用FACS法分离特异性B细胞，并通过反转录和PCR获得单个B细胞抗体的可变区序列，构建重链、轻链重组表达质粒，瞬时转染CHO细胞，表达并利用Protein G纯化获得完整的抗CSFV Erns蛋白单克隆抗体，并鉴定了该抗体识别的抗原表位序列为113TCRYDKNTDVNVVTQARNRPTTLTGCKKGKNFSF146。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112062831A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202010629062.4
申请日：2020-07-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K14/705 , C07K16/28 , C07K16/06 , A61K39/395 , A61P31/14 , G01N33/68 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一株CD163蛋白单克隆抗体MAb的制备方法、表位鉴定以及应用。通过将CD163对于PRRSV复制具有重要作用的功能结构域SRCR5‑6克隆到pColdI载体中，构建出原核表达载体中携带His标签的CD163 SRCR5‑6的蛋白，纯化SRCR5‑6蛋白免疫Balb/c小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤SP2/0细胞同和制备杂交瘤细胞获得抗猪CD163蛋白的单克隆抗体，且对抗体进行了表位鉴定。
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公开(公告)号：CN119158007A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202410799367.8
申请日：2024-06-20
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了表达白细胞介素‑15和白细胞介素‑18的重组PRRSV基因工程活载体疫苗及其应用。本发明提供的pPRRSV‑IL15‑Y和pPRRSV‑IL18‑Y这2个重组质粒转染MARC‑145细胞后，成功拯救出活病毒，与亲本病毒vHuN4‑F112具有相似的病毒学特性。将两株重组病毒进行猪体免疫实验，发现两种重组病毒对猪体均具有良好的安全性，免疫后可以有效诱导机体产生免疫应答，产生高水平的针对PRRSV N蛋白的抗体，而且可以诱导更高的细胞免疫水平，是一种良好的基因工程疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN118846023A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410799352.1
申请日：2024-06-20
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: A61K39/12 , C12N7/01 , C12N15/86 , C12N15/66 , C12N15/24 , C12N15/40 , A61K39/187 , A61K38/20 , A61P31/14 , A61P37/04 , C12R1/93
Abstract: 本发明要求保护一种能够同时表达猪瘟病毒E2基因和IL18基因的重组活载体疫苗的构建方法和应用。利用嵌合质粒pPRRSV‑E2‑N‑IL18‑Y转染MARC‑145细胞后，成功拯救出活病毒，并且发现重组病毒rPRRSV‑E2‑N‑IL18‑Y与亲本病毒vHuN4‑F112和重组病毒rPRRSV‑E2具有相似的病毒学特性。将重组病毒rPRRSV‑E2‑N‑IL18‑Y进行猪体免疫实验，发现重组病毒对猪体均具有良好的安全性，免疫后可以有效诱导机体产生免疫应答，产生高水平的针对PRRSV N蛋白的抗体和CSFV E2蛋白的抗体，而且可以诱导更高的细胞免疫水平，是一种良好的基因工程疫苗候选株。
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公开(公告)号：CN113584063B
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202110882874.4
申请日：2021-08-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种基于转录调控序列重布的反向遗传操作方法及其应用，其中，所述方法为根据HuN4‑F112感染性克隆全长测序以及转录调控前导序列（Leader TRS），下游转录调控序列(body TRSs)一级核心6碱基序列的鉴定，将HuN4‑F112全基因组设计为分别包含Leader TRS,Body TRSs在内的六段基因组序列，分别设计用于Leader TRS,Body TRSs核心6碱基序列C5C6定点突变的引物，获得全基因组转录调控序列整体突变的基因组片段。该TRS circuit突变PRRS弱毒疫苗株能够有效抵抗自然环境中普遍发生的基因组间重组现象，对临床上PRRS的有效防控有重要意义。
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公开(公告)号：CN113584063A
公开(公告)日：2021-11-02
申请号：CN202110882874.4
申请日：2021-08-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种基于转录调控序列重布的反向遗传操作方法及其应用，其中，所述方法为根据HuN4‑F112感染性克隆全长测序以及转录调控前导序列（Leader TRS），下游转录调控序列(body TRSs)一级核心6碱基序列的鉴定，将HuN4‑F112全基因组设计为分别包含Leader TRS,Body TRSs在内的六段基因组序列，分别设计用于Leader TRS,Body TRSs核心6碱基序列C5C6定点突变的引物，获得全基因组转录调控序列整体突变的基因组片段。该TRS circuit突变PRRS弱毒疫苗株能够有效抵抗自然环境中普遍发生的基因组间重组现象，对临床上PRRS的有效防控有重要意义。
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