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公开(公告)号:CN113908121A
公开(公告)日:2022-01-11
申请号:CN202111193757.3
申请日:2021-10-13
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种氯硝柳胺注射液及其制备和应用;制备时称取氯硝柳胺2g,加入增溶剂0.5g‑8g,混匀后加入溶剂50‑75ml,搅拌使其溶解,充分溶解后加入缓冲液,混匀后加水定容到指定体积。该注射液澄清透明,pH稳定,对金黄色葡萄球菌敏感菌和耐加氧西林金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.06μg/ml和0.125μg/ml,建立金黄色葡萄球菌小鼠皮肤感染模型后,分别皮下注射5mg/kg.bw、10mg/kg.bw、20mg/kg.bw后发现,给药组能很好防治小鼠皮肤感染,与对照组环丙沙星组没有显著性差异。
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公开(公告)号:CN112592953A
公开(公告)日:2021-04-02
申请号:CN202011514304.1
申请日:2020-12-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开一种抑制人腺病毒增殖药物的高通量筛选方法及其应用。该专利中为标记GFP的人腺病毒在感染HEK‑293细胞后能表达绿色荧光蛋白,使感染的细胞在荧光显微镜下呈绿色。抗人腺病毒的药物活性通过以下实现,利用流式细胞术检测HEK‑293细胞在添加抗腺病毒药物和人腺病毒后,培养基上清中的腺病毒含量的变化。具体操作为,取适量的病毒上清重新加入一定量的HEK‑293细胞中,用流式细胞术测定细胞中被腺病毒感染的细胞的比率(带有绿色荧光的细胞),以此来评估添加药物对腺病毒增殖是否有明显的抑制作用。此方法,可以在体外快速、简便,低廉,有效,高通量的筛选候选药物分子是否具有抑制人腺病毒的作用。本专利将加速新型抗人腺病毒药物的研发。
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公开(公告)号:CN110305897A
公开(公告)日:2019-10-08
申请号:CN201910484405.X
申请日:2019-06-05
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开一种快速测定基因组编辑活性的三基因报告系统,该报告系统包括三基因报告细胞系和基因编辑系统活性的快速检测体系。所述三基因报告细胞系为在HEK-293细胞AAVS1位点整合有TK-Neo-T2A-GFP-Ires-Puro基因的单克隆HEK-293-AAVS-TK-Neo-T2A-GFP细胞系,TK-Neo-T2A-GFP基因的序列如SEQ ID NO.1所示;所述基因编辑系统活性的快速检测体系为针对三报告基因TK、Neo和GFP基因分别设计单链引导RNA,构建质粒后转染报告细胞系。利用本发明的三基因报告系统可以在体外快速、有效、高通量的对基因组编辑工具的活性进行检测,有助于基因编辑系统的快速筛选和优化,为基因编辑工具的研发提供一个高效的筛选平台。
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公开(公告)号:CN113908121B
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202111193757.3
申请日:2021-10-13
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种氯硝柳胺注射液及其制备和应用;制备时称取氯硝柳胺2g,加入增溶剂0.5g‑8g,混匀后加入溶剂50‑75ml,搅拌使其溶解,充分溶解后加入缓冲液,混匀后加水定容到指定体积。该注射液澄清透明,pH稳定,对金黄色葡萄球菌敏感菌和耐加氧西林金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.06μg/ml和0.125μg/ml,建立金黄色葡萄球菌小鼠皮肤感染模型后,分别皮下注射5mg/kg.bw、10mg/kg.bw、20mg/kg.bw后发现,给药组能很好防治小鼠皮肤感染,与对照组环丙沙星组没有显著性差异。
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公开(公告)号:CN113583876B
公开(公告)日:2024-07-09
申请号:CN202110882861.7
申请日:2021-08-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开EYFP敲入到Et.Actin基因的鸡柔嫩艾美尔球虫虫株的制备。该专利将FnCas12a蛋白,体外合成的crRNA和同源重组片段(含有P2A‑DHFR‑EYFP表达框的Et.Actin基因)利用Lonza 4D‑Nucleofector核转仪导入鸡柔嫩艾美尔球虫子孢子,实现对鸡柔嫩艾美尔球虫的编辑。将编辑虫株经过鸡体内乙胺嘧啶筛选,获得高纯度的基因编辑虫株。然后,利用PCR和Sanger测序技术对基因编辑虫株进行验证,证明EYFP成功标记了Et.Actin基因。通过细胞培养该虫株的子孢子并感染鸡后,取盲肠粘膜并涂片显示该EYFP在基因编辑虫株的整个生活史中都有表达。此基因编辑方法能够对鸡球虫的基因进行定点标记,有助于解析球虫基因的功能。本专利对新型抗球虫药物和疫苗的研发也具有重要意义。
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公开(公告)号:CN110305897B
公开(公告)日:2023-03-31
申请号:CN201910484405.X
申请日:2019-06-05
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开一种快速测定基因组编辑活性的三基因报告系统,该报告系统包括三基因报告细胞系和基因编辑系统活性的快速检测体系。所述三基因报告细胞系为在HEK‑293细胞AAVS1位点整合有TK‑Neo‑T2A‑GFP‑Ires‑Puro基因的单克隆HEK‑293‑AAVS‑TK‑Neo‑T2A‑GFP细胞系,TK‑Neo‑T2A‑GFP基因的序列如SEQ ID NO.1所示;所述基因编辑系统活性的快速检测体系为针对三报告基因TK、Neo和GFP基因分别设计单链引导RNA,构建质粒后转染报告细胞系。利用本发明的三基因报告系统可以在体外快速、有效、高通量的对基因组编辑工具的活性进行检测,有助于基因编辑系统的快速筛选和优化,为基因编辑工具的研发提供一个高效的筛选平台。
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公开(公告)号:CN113583876A
公开(公告)日:2021-11-02
申请号:CN202110882861.7
申请日:2021-08-02
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开EYFP敲入到Et.Actin基因的鸡柔嫩艾美尔球虫虫株的制备。该专利将FnCas12a蛋白,体外合成的crRNA和同源重组片段(含有P2A‑DHFR‑EYFP表达框的Et.Actin基因)利用Lonza 4D‑Nucleofector核转仪导入鸡柔嫩艾美尔球虫子孢子,实现对鸡柔嫩艾美尔球虫的编辑。将编辑虫株经过鸡体内乙胺嘧啶筛选,获得高纯度的基因编辑虫株。然后,利用PCR和Sanger测序技术对基因编辑虫株进行验证,证明EYFP成功标记了Et.Actin基因。通过细胞培养该虫株的子孢子并感染鸡后,取盲肠粘膜并涂片显示该EYFP在基因编辑虫株的整个生活史中都有表达。此基因编辑方法能够对鸡球虫的基因进行定点标记,有助于解析球虫基因的功能。本专利对新型抗球虫药物和疫苗的研发也具有重要意义。
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公开(公告)号:CN110317892A
公开(公告)日:2019-10-11
申请号:CN201910762404.7
申请日:2019-08-19
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开了一种不同种属球虫对药物敏感性的快速检测方法,包括以下步骤:构建针对不同种属待检球虫的TaqMan实时荧光定量PCR分析方法;采集临床测试球虫样品,并分离出球虫卵囊;进行抗球虫药物临床试验;通过分析药物试验前后样品球虫种群的组成及其所占比例的变化,获得不同种属待测球虫对药物的敏感性结果。本发明的快速检测方法,可以避免传统方法中需要数月才能完成的分离单个球虫的繁琐步骤,仅需几天时间,就能直接获得不同种属球虫的药物敏感性和抗药性试验结果,大大节省工作时间和人力物力,有利于临床球虫病的更好防控。
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公开(公告)号:CN112592953B
公开(公告)日:2023-06-27
申请号:CN202011514304.1
申请日:2020-12-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开一种抑制人腺病毒增殖药物的高通量筛选方法及其应用。该专利中为标记GFP的人腺病毒在感染HEK‑293细胞后能表达绿色荧光蛋白,使感染的细胞在荧光显微镜下呈绿色。抗人腺病毒的药物活性通过以下实现,利用流式细胞术检测HEK‑293细胞在添加抗腺病毒药物和人腺病毒后,培养基上清中的腺病毒含量的变化。具体操作为,取适量的病毒上清重新加入一定量的HEK‑293细胞中,用流式细胞术测定细胞中被腺病毒感染的细胞的比率(带有绿色荧光的细胞),以此来评估添加药物对腺病毒增殖是否有明显的抑制作用。此方法,可以在体外快速、简便,低廉,有效,高通量的筛选候选药物分子是否具有抑制人腺病毒的作用。本专利将加速新型抗人腺病毒药物的研发。
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公开(公告)号:CN111280179A
公开(公告)日:2020-06-16
申请号:CN202010184965.6
申请日:2020-03-17
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种抗球虫消毒剂,其消毒剂是以质量百分比计的下述组分组合而成,其具体组分为:氯化物20-80%、过硫酸氢钾80-20%;或者为:过硫酸氢钾40-60%、氯化物20-60%、酸化剂0-5%、表面活性剂0-10%、缓蚀剂0-10%、干燥剂0-5%、指示剂0-0.2%;其中,所述氯化物为氯化钠或氯化钾。本发明对球虫卵囊有杀灭作用,能有效抑杀球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊。
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