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公开(公告)号:CN117946285A
公开(公告)日:2024-04-30
申请号:CN202410132099.4
申请日:2024-01-30
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/866 , C12N7/01 , C07K14/01 , C12N15/34 , C12N15/62 , G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/533 , G01N33/532 , G01N33/569
Abstract: 本发明提供了一种检测非洲猪瘟病毒的荧光胶体金试纸条及其制备方法,属于病毒检测技术领域。本发明将包裹稀土元素铕的纳米荧光微球和ASFVp30‑Fc融合蛋白混合孵育得到ASFVp30‑Fc融合蛋白的纳米荧光微球标记溶液,将ASFVp30‑Fc融合蛋白的纳米荧光微球标记溶液喷洒在结合垫上;将ASFVp30蛋白喷在硝酸纤维素膜检测线T的位置,将SPA蛋白喷在硝酸纤维素膜质控线C的位置;将封闭后的样品垫、包被后的结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次搭接在PVC底板上得到荧光胶体金试纸条。本发明制备的检测ASFV p30的荧光定量试纸条灵敏度高,可以达到1:2560,特异性良好,并有操作简单、时间短等优点。
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公开(公告)号:CN114181953B
公开(公告)日:2024-04-26
申请号:CN202111572371.3
申请日:2021-12-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法及其应用,属于分子生物学领域。为了克服黄病毒NS2A研究过程中缺乏针对NS2A的特异性抗体的技术不足,本发明提供一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法,并公开了其应用。本发明通过在NS1与NS2A之间插入HA标签,通过HA标签来指示NS2A,同时为避免影响NS2A荧光信号的观察,对NS2A第30个氨基酸进行点突变,以干扰NS2A的茎环结构,消除病毒复制过程的‑1核糖体移码。本发明所述的携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆对于黄病毒的研究具有重要的价值。
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公开(公告)号:CN118127078B
公开(公告)日:2025-01-28
申请号:CN202410123235.3
申请日:2024-01-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了pJEV‑CMV‑p54复制子质粒及制备方法和应用,属于分子生物学技术领域。本发明以缺失了C、prM和E结构蛋白基因的基因I型日本脑炎病毒基因组为骨架,在缺失结构蛋白的部位插入非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白基因,成功构建了能够高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白的pJEV‑CMV‑p54复制子质粒,pJEV‑CMV‑p54具有自我复制能力,并能高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白,为ASFV疫苗的研发进一步提供思路。
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公开(公告)号:CN118006568A
公开(公告)日:2024-05-10
申请号:CN202410211443.9
申请日:2024-02-26
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及分子生物学技术领域。本发明提供了一种GV型乙型脑炎病毒感染性克隆弱毒疫苗株JEV‑XZ‑E5及其制备方法,利用GV型乙型脑炎病毒XZ2012株进行反向遗传操作获得,所述弱毒疫苗株JEV‑XZ‑E5的cDNA序列如SEQ ID NO.24所示。本发明还提供了一种包含所述弱毒疫苗株JEV‑XZ‑E5的cDNA序列的核酸分子,该核酸分子在所述cDNA序列的5’端设有转录启动子。本发明所述弱毒疫苗株JEV‑XZ‑E5对GV型乙型脑炎病毒具有免疫原性和保护效果,为预防GV型乙型脑炎病毒病疫苗的研发进一步提供思路。
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公开(公告)号:CN117778629A
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202410052803.5
申请日:2024-01-12
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种利用三重RT‑qPCR检测蜱传脑炎、乙型脑炎和山羊关节炎脑炎的方法及试剂盒,属于分子生物学和核酸检测领域。该方法通过设置针对蜱传脑炎的C基因、乙型脑炎病毒的NS2A基因和山羊关节炎脑炎病毒基因组的gag基因的三组引物对和探针,通过RT‑qPCR方式测定达到荧光值的Ct值,依据判定规则确定是否感染病毒以及种类,该检测方法具有检测灵敏度高,特异性好、操作简便、快速的特点,适合在实际检测中推广应用。
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公开(公告)号:CN114181953A
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202111572371.3
申请日:2021-12-21
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明涉及一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法及其应用,属于分子生物学领域。为了克服黄病毒NS2A研究过程中缺乏针对NS2A的特异性抗体的技术不足,本发明提供一种携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆的制备方法,并公开了其应用。本发明通过在NS1与NS2A之间插入HA标签,通过HA标签来指示NS2A,同时为避免影响NS2A荧光信号的观察,对NS2A第30个氨基酸进行点突变,以干扰NS2A的茎环结构,消除病毒复制过程的‑1核糖体移码。本发明所述的携带HA标签的乙型脑炎病毒全长感染性克隆对于黄病毒的研究具有重要的价值。
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公开(公告)号:CN118127078A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410123235.3
申请日:2024-01-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了pJEV‑CMV‑p54复制子质粒及制备方法和应用,属于分子生物学技术领域。本发明以缺失了C、prM和E结构蛋白基因的基因I型日本脑炎病毒基因组为骨架,在缺失结构蛋白的部位插入非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白基因,成功构建了能够高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白的pJEV‑CMV‑p54复制子质粒,pJEV‑CMV‑p54具有自我复制能力,并能高效表达非洲猪瘟病毒P54胞内区域蛋白,为ASFV疫苗的研发进一步提供思路。
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公开(公告)号:CN113981151B
公开(公告)日:2023-01-24
申请号:CN202111478453.1
申请日:2021-12-06
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种鉴别基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的方法及其试剂盒,属于病毒分子检测领域。为克服临床上缺少对基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒鉴别的方法,本发明提供一种基因Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型乙脑病毒和盖他病毒的鉴别方法以及引物和探针,所涉及引物和TaqMan探针是依据乙脑病毒的prM/M基因保守区和盖他病毒的E2基因保守区进行设计,其可以有效鉴别乙脑病毒和盖他病毒,具有较高特异性和灵敏度的优点,可以为乙脑病毒和盖他病毒基因型的快速检测、临床诊断以及流行病学调查提供更好的方法支持。
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公开(公告)号:CN119242595A
公开(公告)日:2025-01-03
申请号:CN202411435986.5
申请日:2024-10-14
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,涉及一种GI型日本脑炎病毒弱毒疫苗株SD12‑F120株及其感染性克隆的构建与应用。为了克服现有的GIII型的JEV疫苗难以对GI型JEV提供完全的保护,且目前实际应用中缺少GIII型的JEV疫苗的技术不足,本发明提供一种GI型日本脑炎病毒弱毒疫苗株SD12‑F120及其感染性克隆构建方法,所述弱毒疫苗株SD12‑F120的cDNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述弱毒疫苗株SD12‑F120对GI型日本脑炎病毒具有良好的免疫原性和保护效果,为预防GI型日本脑炎病毒病疫苗的开发和疫苗株的筛选提供了新的选择。
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公开(公告)号:CN119192399A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411367573.8
申请日:2024-09-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C07K1/22 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/295 , A61K39/12 , A61K39/23 , A61P31/14 , A61P31/20
Abstract: 本发明涉及疫苗制备技术领域,尤其涉及一种日本脑炎病毒与猪细小病毒的二联病毒样颗粒疫苗的制备方法及其应用。本发明提供了一种日本脑炎病毒与猪细小病毒的融合蛋白,氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的融合蛋白是通过杆状病毒系统表达得到的,本发明的EMP‑VP2重组融合蛋白具有良好的免疫反应性,能够被anti‑His单克隆抗体以及JEV和PPV的阳性血清特异性识别,且对小鼠和豚鼠也具有良好的免疫反应,能够分别在小鼠和豚鼠体内激活JEV和PPV特异性体液免疫反应。为JEV和PPV的防控与二联亚单位疫苗的研发奠定了坚实的基础。
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