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公开(公告)号:CN119752751A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202411961527.0
申请日:2024-12-27
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N1/21 , C12N1/36 , C12N15/74 , C12N15/31 , C12N15/70 , C12Q1/689 , C12N15/11 , A61K39/02 , A61P31/04 , C12R1/01 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种布鲁菌减毒活疫苗菌株M5ΔlysR21及其减毒方法与应用,所述M5ΔlysR21由羊种布鲁菌M5株缺失lysR21基因后得到,所述布鲁菌减毒活疫苗菌株MSΔlysR21保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号,保藏日期为2024年11月21日,保藏编号为CGMCC NO.32791。本发明发现,lysR21基因与布鲁菌毒力有关,缺失lysR21基因可减弱布鲁菌的毒力,能显著降低布鲁菌在细胞内和小鼠体内的存活能力,表现出比疫苗株更强的免疫保护性,可作为预防动物布鲁菌病的候选减毒活疫苗菌株,具有潜在的应用价值。
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公开(公告)号:CN116286926B
公开(公告)日:2023-12-29
申请号:CN202310177034.7
申请日:2023-02-28
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/70 , C12N15/65 , C12Q1/689 , C12Q1/6897 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种双荧光报告质粒、质粒的构建以及在检测大肠杆菌胞内c‑di‑GMP水平中的应用。该报告质粒由抗性基因、启动子、第一报告基因、终止子、第二报告基因、核糖开关组成。含有的两个报告基因mCherry和EGFP,分别受启动子和核糖开关控制,第一报告基因用于检测质粒本底表达水平,第二报告基因用于检测c‑di‑GMP水平,且第一报告基因和第二报告基因的方向相反,二者的表达互相不受干扰,可消除质粒拷贝数对c‑di‑GMP水平检测结果的影响,检测结(56)对比文件张贝贝等.检测大肠杆菌内c-di-GMP 水平的双荧光素报告质粒的构建及应用《.微生物学报》.2023,第1-11页.李新风等.环二鸟苷单磷酸核糖开关的结构与功能《.生物工程学报》.2017,第33卷(第9期),第1357-1368页.Blokesch,M..Vibrio cholerae C6706chromosome 1, complete sequence《.GenbankDatabase》.2020,Accession No.CP047295.1.
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公开(公告)号:CN117003888B
公开(公告)日:2024-06-11
申请号:CN202310859873.7
申请日:2023-07-13
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , A61K39/108 , A61K39/116 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种产肠毒素大肠杆菌抗原多表位融合蛋白及其制备方法和应用,属于生物技术领域。本发明优选产肠毒素大肠杆菌菌毛黏附素F4(K88)、F5(K99)、F6(987P)、F18和F41主要结构亚单位的抗原表位,并优选地与通用型辅助性T细胞表位PADRE和不耐热肠毒素LTb融合蛋白串联构建产肠毒素大肠杆菌5种菌毛黏附素的抗原多表位融合蛋白。所述抗原多表位融合蛋白血清型覆盖广、无过敏性、免疫原性强,免疫动物后产生较强特异性体液免疫和细胞免疫应答,且具有良好的免疫保护效果。
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公开(公告)号:CN116286926A
公开(公告)日:2023-06-23
申请号:CN202310177034.7
申请日:2023-02-28
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/70 , C12N15/65 , C12Q1/689 , C12Q1/6897 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种双荧光报告质粒、质粒的构建以及在检测大肠杆菌胞内c‑di‑GMP水平中的应用。该报告质粒由抗性基因、启动子、第一报告基因、终止子、第二报告基因、核糖开关组成。含有的两个报告基因mCherry和EGFP,分别受启动子和核糖开关控制,第一报告基因用于检测质粒本底表达水平,第二报告基因用于检测c‑di‑GMP水平,且第一报告基因和第二报告基因的方向相反,二者的表达互相不受干扰,可消除质粒拷贝数对c‑di‑GMP水平检测结果的影响,检测结果更准确、更可靠。本发明构建的双荧光报告质粒可以对大肠杆菌胞内c‑di‑GMP水平进行快速检测,操作简单,结果可靠。
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公开(公告)号:CN118791628B
公开(公告)日:2025-02-14
申请号:CN202410886863.7
申请日:2024-07-03
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/70 , C12N15/62 , A61K39/108 , A61K39/116 , A61P31/04 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种禽致病性大肠杆菌六价多表位融合蛋白的制备方法及应用,本发明优选禽致病性大肠杆菌卷曲菌毛亚基CsgA、脂蛋白SlyB、麦芽糖孔蛋白LamB、外膜蛋白PhoE、蛋白水解酶激活剂NlpD和脂蛋白Pal主要结构亚单位的抗原表位,并优选地与不耐热肠毒素LTb融合蛋白串联构建禽致病性大肠杆菌6种蛋白的抗原多表位融合蛋白。所述抗原多表位融合蛋白血清型覆盖广、无过敏性、免疫原性强,免疫动物后产生较强特异性体液免疫和细胞免疫应答。
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公开(公告)号:CN118853587A
公开(公告)日:2024-10-29
申请号:CN202411037302.6
申请日:2024-07-30
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/68 , C12R1/19
Abstract: 本发明提供了一株特异性分泌BP26抗体的单克隆细胞株2D3、单链抗体及制备方法,属于兽医生物技术领域。本发明表达和纯化了犬种布鲁菌BP26蛋白。通过该蛋白免疫小鼠的脾细胞与SP2/0细胞体外融合,获得特异性分泌BP26抗体的单克隆细胞株2D3。之后,提取该单克隆细胞2D3的RNA,反转录为cDNA,扩增表达单克隆抗体的VL和VH,并将VL和VH基因连接,获得单链抗体基因。将该基因与pCold‑TF载体进行连接,转化至BL21感受态细胞中进行诱导表达,得到针对犬种布鲁菌BP26蛋白的单链抗体。本发明针对犬种布鲁菌BP26蛋白的单链抗体可与BP26蛋白结合,对于开发新型的布病检测试剂具有重要意义。
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公开(公告)号:CN119372348A
公开(公告)日:2025-01-28
申请号:CN202411813349.7
申请日:2024-12-10
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , C12R1/35
Abstract: 本发明属于生物检测技术领域,具体涉及一种用于区分滑液囊支原体MS‑H疫苗株与野毒株的SNP位点、试剂盒及应用,本发明通过对MS‑H及其亲本株的全基因组进行生物信息学比较分析,筛选出符合检测要求的靶基因。首次对特异性保守基因序列ktrB基因设计特异性引物和MGB探针,建立了区分MS‑H疫苗株与野毒株的双重qPCR试剂盒。经过体外实验证明,本发明的试剂盒操作简单、敏感性高、特异型强、重复性好。本发明所筛选的基因位点及所建立的检测试剂盒,具有规避目前常用基因易发生回复突变的不足,可用于MS疫苗株和野毒株的临床快速诊断,提高了检测的准确性,推进种群净化,具有一定的商用价值。
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公开(公告)号:CN119331795A
公开(公告)日:2025-01-21
申请号:CN202411036081.0
申请日:2024-07-30
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供了一种gntR17基因缺失株M5ΔgntR17株及其构建方法与应用,属于生物技术领域。M5ΔgntR17株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期为:2024年7月4日,保藏编号为:CGMCCNO.46061。本发明发现,gntR17基因是影响布鲁菌毒力的相关基因,gntR17基因缺失可减弱布鲁菌的毒力,安全性提高,缺失后能显著降低布鲁菌在细胞内和小鼠体内的存活能力,具有潜在的应用价值。敲除gntR17基因后构建的M5ΔgntR17株比原始布鲁菌M5株的毒力减弱,安全性高,与M5‑90Δ26疫苗具有相似免疫保护性,可作为预防动物布鲁菌病的候选减毒活疫苗菌株。
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公开(公告)号:CN118501445A
公开(公告)日:2024-08-16
申请号:CN202410645083.3
申请日:2024-05-23
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/543 , G01N33/532
Abstract: 本发明提供了一种犬种布鲁菌胶体金抗体检测试纸条和检测卡,属于免疫层析检测技术领域。本发明利用粗糙型犬种布鲁菌RM6/66株的R‑LPS制备测试线,利用羊抗兔IgG抗体制备质控线,利用浓缩胶体金标记的兔抗犬IgG抗体制备金标垫,然后与PVC底板、样品垫、吸水垫组合制备犬种布鲁菌胶体金抗体检测试纸条。本发明的犬种布鲁菌胶体金抗体检测试纸条灵敏度和特异性为95.23%和98.76%,诊断符合率达到98.47%。并且利用试纸条或检测卡进行检测,操作便捷,取样简单,结果判定迅速,适用于现场快速检测和初筛,同样适用于非专业人员操作。
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