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公开(公告)号：CN118166039A
公开(公告)日：2024-06-11
申请号：CN202410490390.9
申请日：2024-04-23
IPC: C12N15/867 , C12N15/12 , A01K67/0275 , C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于转基因山羊制备技术领域，公开了一种慢病毒载体介导生产表达BLOC1S1转基因山羊方法，其特征在于：（1）构建含有BLOC1S1基因的慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞后超速离心，PBS重悬后获得慢病毒浓缩液；（2）对山羊超数排卵后配种，于最后一次配种后12 h冲胚获得受精卵，利用显微操作系统将慢病毒浓缩液注射于受精卵透明带下，胚胎培养液继续培养24 h待发育至2细胞进行输卵管移植；（3）利用设计的跨载体引物PCR和qPCR技术检测转基因效率检测鉴定。采用本发明的方法，成功获得过表达BLOC1S1转基因山羊，转基因效率为63.6%。
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公开(公告)号：CN117385059A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202311627105.5
申请日：2023-11-30
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种预示绒山羊布病风险抗性的插入/缺失标记方法、检测试剂盒及其应用，属于生物技术与家畜育种技术领域。以待检测绒山羊全基因组为模板，设计引物以扩增绒山羊MBL2基因部分片段，再利用琼脂糖凝胶电泳和测序技术鉴定绒山羊MBL2基因第45046317_45046328位插入/缺失多态性位点的基因型，根据检测得到的不同基因型和等位基因在绒山羊病例和对照的分布，可认为MBL2基因第45046317_45046328位插入/缺失位点携带有插入型等位基因是绒山羊个体布病风险抗性基因，可起到预测绒山羊个体布病抗性的作用，因而该方法可应用在绒山羊分子标记辅助育种中，加快建立抗布病绒山羊优势遗传资源群体。
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公开(公告)号：CN116287315A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202310336180.X
申请日：2023-03-31
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种绒山羊CTLA‑4基因插入/缺失标记的检测方法及其应用，以待检测绒山羊全基因组为模板，以设计的引物对P1和P2为扩增引物，通过PCR扩增绒山羊CTLA‑4基因部分片段，再利用琼脂糖凝胶电泳和测序技术鉴定绒山羊CTLA‑4基因NC_030809.1:rs655778058,g.43841952_43841968位和NC_030809.1:rs656541224,g.43843568_43843579位插入/缺失多态性位点的基因型。相关分析结果发现，绒山羊CTLA‑4基因两个InDel位点不同基因型与陕北白绒山羊布病抗性存在显著相关关系，可以作为陕北白绒山羊抗布病育种的有效DNA标记。本发明根据检测到的绒山羊CTLA‑4基因InDel位点插入/缺失的基因型，可作为绒山羊布病防治与抗布病遗传育种的有效DNA标记。
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公开(公告)号：CN118853895A
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202410753830.5
申请日：2024-06-12
Applicant: 榆林学院 , 西北农林科技大学 , 陕西神澳农业生物技术开发股份有限公司
Inventor： 朱海鲸 , 刘晓宇 , 杜晓敏 , 华进联 , 王聪亮 , 马东 , 李艳艳 , 宋岩峰 , 袁筱乐 , 巨敏莹 , 宋晓越 , 李河林 , 李陇平 , 翟军军 , 董书伟 , 陈生会
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种绒山羊SP110基因插入/缺失标记的检测方法及其应用，涉及家畜育种技术领域，包括以下操作：以待检测绒山羊全基因组为模板，此绒山羊SP110基因插入/缺失标记的检测方法及其应用，本发明根据绒山羊SP110基因5’上游调控区序列设计引物，以绒山羊基因组DNA为模板，通过PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳和直接测序技术，能够精确、快速和低成本的检测绒山羊SP110基因NC_030809.1:rs639658778,g.17496443_17496444位的插入/缺失多态性。本发明利用PCR扩增技术检测绒山羊SP110基因插入/缺失多态性，并进行基因型和等位基因频率分析，首次发现SP110基因与白绒山羊布鲁氏菌病抗性的显著相关，可作为白绒山羊抗布鲁氏菌病遗传育种的有效DNA标记。
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公开(公告)号：CN116836935A
公开(公告)日：2023-10-03
申请号：CN202310573792.0
申请日：2023-05-19
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/12 , C12Q1/6881 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种获得过表达山羊Nramp1基因细胞株的方法及该种细胞株在抗菌研究中的应用。通过慢病毒表达系统等手段，获得了过表达山羊Nramp1的山羊精原干细胞株(oeNramp1‑mGSCs)和小鼠巨噬细胞株(oeNramp1‑Raw264.7)。检测了过表达效率,经验证oeNramp1‑mGSCs相较于对照组，其Nramp1 mRNA上调120倍，其群体倍增时间显著缩短。除此之外，利用沙门氏菌LPS刺激oeNramp1‑Raw264.7，发现oeNramp1‑Raw264.7能够减少沙门氏菌LPS引起的细胞凋亡率。本发明具有创新性强、安全性好等特点，为后续抗菌研究提供了可靠的技术平台。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118222635A
公开(公告)日：2024-06-21
申请号：CN202410490456.4
申请日：2024-04-23
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/867 , C12N15/12 , C12Q1/6888 , C12N15/11 , A01K67/0275
Abstract: 本发明公开了一种过表达羊源BLOC1S1转基因小鼠的构建方法，其步骤为：将含有BLOC1S1基因的pCDH慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞，48 h后离心后弃上清，PBS重悬分装。PMSG+HCG超排C57小鼠，体外受精2 h后将慢病毒浓缩液注射至受精卵透明带下，直至透明带明显膨胀变大，受精卵转移至KSOM胚胎培养液继续培养24 h后移植受体，成功获得过表达羊源BLOC1S1转基因小鼠。本发明为BLOC1S1基因抗布鲁氏菌感染相关机制探索提供了研究模型。
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公开(公告)号：CN116904443A
公开(公告)日：2023-10-20
申请号：CN202310954247.6
申请日：2023-08-01
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/10 , C12N15/12 , C12N15/867 , C12Q1/6888
Abstract: 本发明公开了一种山羊BLOC1S1基因克隆方法、表达载体及应用：以山羊组织cDNA为模板，设计扩增引物，通过PCR扩增山羊BLOC1S1基因CDS区片段，再利用同源重组与CAG载体相连，与PAX2、VSVG质粒包装慢病毒，利用慢病毒载体构建山羊雄性生殖干细胞（mGSSC）的BLOC1S1稳定过表达细胞株，经验证其转录组水平相比对照组上调17倍。并且通过分析RNA‑seq数据发现，过表达BLOC1S1能提高细胞免疫相关基因IRF3、PYCARD、IL6、TLR2、CXCL8、LAMP2、CASPASE8、IL1b等的表达。本发明首次克隆了山羊BLOC1S1基因，构建过表达载体并转入细胞株后，发现BLOC1S1能有效提高细胞的免疫相关基因表达，因此BLOC1S1可作为家畜抗病育种的有效靶点。
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公开(公告)号：CN112451168A
公开(公告)日：2021-03-09
申请号：CN201911017582.3
申请日：2019-10-24
Applicant: 榆林学院
IPC: A61D19/02
Abstract: 本发明公开了一种绒山羊输精注射器，包括推进杆、注射管、注射嘴、助推部、盛液腔、注液孔、保温腔、活塞、阀门、刻度线和堵塞，注射管的上端设有助推部，注射管中部设有盛液腔，盛液腔内部设有推进杆，推进杆下部设有活塞，注射管的外壁表面上设有刻度线；注射管的下部设有注射嘴，注射嘴中部设有阀门，注射管与盛液腔外壁之间设有保温腔，保温腔环绕盛液腔设置，保温腔的上部设有注液孔，注液孔上设有堵塞。本发明结构简单、可移动操作，一方面延长了精子鲜活率；另一方面在输精工作结束时有效地防止管内精液外流，隔绝外界微生物进入注射管内污染精液，因此，不仅降低了精液的损耗，而且大大提高了母羊受精率与人员的工作效率。
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公开(公告)号：CN119351578A
公开(公告)日：2025-01-24
申请号：CN202411800479.7
申请日：2024-12-09
Applicant: 榆林学院
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及基因育种技术领域，尤其涉及一种绒山羊GNG4基因插入或缺失多态性的检测方法及其应用。绒山羊GNG4基因NC_030835.1:g.37065369_37065370插入或缺失多态性位点在山羊生长性状辅助选择育种中的应用，以待检测绒山羊全基因组为模板，通过PCR扩增GNG4基因；对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，并根据电泳结果，鉴定所述突变位点；根据突变位点的基因型对山羊生长性状进行辅助选择育种。本发明所建立的绒山羊GNG4基因InDel位点缺失/缺失多态性位点作为优良生长性状早期选育的应用方法，可加快绒山羊良种选育进程。
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公开(公告)号：CN114917054A
公开(公告)日：2022-08-19
申请号：CN202210221846.2
申请日：2022-03-07
Applicant: 榆林学院
Abstract: 本发明公开了一种山羊超数排卵方法，其步骤是：以经产母羊为对象，于母羊发情周期的任意一天放置阴道硅胶栓，放栓当天记为第0天，第7天每只母羊注射Vad注射液1mL，分别在第10天、第11天、第12天，早晚各注射一次促卵泡素，第12天晚上同时注射氯前列烯醇0.1mg并撤去阴道硅胶栓，第13天开始试情，每8h一次，母羊第一次发情不配种，第二次发情时配种，并注射LH‑A3 12.5ug，以后每隔8h配种1次，至母羊停止发情为止，于最后1次配种后20h以内取原核胚，120h后取桑葚胚。该山羊超数排卵方法，有效的提高了绒山羊母羊的超排效率，降低了生产费用，每个批次的实验结果为每只羊平均能获得胚胎12枚以上，胚胎发育效率与已报道的其他超排方案相同亦或较高。
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