公开(公告)号：CN118222635A

公开(公告)日：2024-06-21

申请号：CN202410490456.4

申请日：2024-04-23

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 华进联 ,  王聪亮 ,  万仕成 ,  李娜 ,  雷安民 ,  陈文博 ,  李剑南 ,  张梦菲

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/12 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/11 ,  A01K67/0275

Abstract: 本发明公开了一种过表达羊源BLOC1S1转基因小鼠的构建方法，其步骤为：将含有BLOC1S1基因的pCDH慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞，48 h后离心后弃上清，PBS重悬分装。PMSG+HCG超排C57小鼠，体外受精2 h后将慢病毒浓缩液注射至受精卵透明带下，直至透明带明显膨胀变大，受精卵转移至KSOM胚胎培养液继续培养24 h后移植受体，成功获得过表达羊源BLOC1S1转基因小鼠。本发明为BLOC1S1基因抗布鲁氏菌感染相关机制探索提供了研究模型。

公开(公告)号：CN118166039A

公开(公告)日：2024-06-11

申请号：CN202410490390.9

申请日：2024-04-23

Applicant: 西北农林科技大学 ,  榆林学院

Inventor： 华进联 ,  王聪亮 ,  朱海鲸 ,  雷安民 ,  万仕成 ,  李娜 ,  陈文博 ,  李剑南 ,  刘晓宇 ,  任赵飞 ,  马东 ,  杜晓敏 ,  屈雷 ,  张梦菲

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/12 ,  A01K67/0275 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明属于转基因山羊制备技术领域，公开了一种慢病毒载体介导生产表达BLOC1S1转基因山羊方法，其特征在于：（1）构建含有BLOC1S1基因的慢病毒载体与包装质粒共转染293T细胞后超速离心，PBS重悬后获得慢病毒浓缩液；（2）对山羊超数排卵后配种，于最后一次配种后12 h冲胚获得受精卵，利用显微操作系统将慢病毒浓缩液注射于受精卵透明带下，胚胎培养液继续培养24 h待发育至2细胞进行输卵管移植；（3）利用设计的跨载体引物PCR和qPCR技术检测转基因效率检测鉴定。采用本发明的方法，成功获得过表达BLOC1S1转基因山羊，转基因效率为63.6%。

公开(公告)号：CN118726477A

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202410863267.7

申请日：2024-06-29

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 华进联 ,  袁利明 ,  吴晓龙 ,  雷柞 ,  李剑南

IPC: C12N15/85 ,  C12N15/90 ,  C12N15/65 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N5/10

Abstract: 一种将猪内源PRDM1基因替换为mCherry的新型报告系统本发明公开了一套可以将猪内源PRDM1基因替换为mCherry的载体系统。通过研究猪内源PRDM1翻译终止位点的基因组序列特征，设计了可以将猪内源PRDM1替换为mCherry的新型载体系统。利用该载体系统，成功实现了猪iPSC细胞的基因替换，并通过诱导PGC实现了该报告系统的功能。进而，本发明提供了可以实时监测PGC诱导过程中内源PRDM1基因激活程度的新方法，避免了PRDM1基因激活带来的基因表达网络的改变。本发明具有创新性强、报告精确、安全性好、操作简便等特点。为后续内源PRDM1激活的机制研究提供了可靠的技术平台。