一种将猪内源PRDM1基因替换为mCherry的新型报告系统

    公开(公告)号:CN118726477A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202410863267.7

    申请日:2024-06-29

    Abstract: 一种将猪内源PRDM1基因替换为mCherry的新型报告系统本发明公开了一套可以将猪内源PRDM1基因替换为mCherry的载体系统。通过研究猪内源PRDM1翻译终止位点的基因组序列特征,设计了可以将猪内源PRDM1替换为mCherry的新型载体系统。利用该载体系统,成功实现了猪iPSC细胞的基因替换,并通过诱导PGC实现了该报告系统的功能。进而,本发明提供了可以实时监测PGC诱导过程中内源PRDM1基因激活程度的新方法,避免了PRDM1基因激活带来的基因表达网络的改变。本发明具有创新性强、报告精确、安全性好、操作简便等特点。为后续内源PRDM1激活的机制研究提供了可靠的技术平台。

    一种将猪多能干细胞诱导向肺泡类器官诱导分化的培养基和方法

    公开(公告)号:CN117247893A

    公开(公告)日:2023-12-19

    申请号:CN202311354931.7

    申请日:2023-10-18

    Abstract: 本发明公开了一种将猪多能干细胞诱导为肺泡类器官的培养基和方法。本发明通过对新生猪肺进行单细胞测序,首先鉴定出五种上皮细胞类型、拟算出上皮细胞分化轨迹并确定了猪肺发育重要的信号通路,建立了猪多能干细胞向肺泡类器官诱导分化的体系,具体涉及使用小分子激活剂/抑制剂猪多能干细胞分化为肺类器官的培养基及方法。本发明诱导的肺泡类器官主要由早期肺干/祖细胞构成,表现出肺泡细胞标志物以及典型的囊泡状分支结构,本发明为利用猪多能干细胞构建的猪肺泡类器官可以作为毒理学研究、药物筛选和肺部疾病研究的材料,并为抗病育种的靶标基因和抗病药物筛选提供了新模型。

    一种多能干细胞快速诱导分化为巨噬细胞方法

    公开(公告)号:CN117210405A

    公开(公告)日:2023-12-12

    申请号:CN202311178841.7

    申请日:2023-09-12

    Abstract: 本发明提供了多能干细胞快速诱导分化为巨噬细胞的方法,具体涉及到使用重组蛋白以及化学小分子在11天内快速诱导多能干细胞分化为巨噬细胞的培养基以及方法。本发明诱导分化而来的细胞不仅具有巨噬细胞的典型细胞形态并表达巨噬细胞的标记基因,且具有感染猪蓝耳病毒或猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(porcine respiratory and reproductive syndrome virus,PRRSV)的能力,可以作为研究猪宿主与病原体互作的良好细胞模型。

    一种将猪内源KDR基因替换为mCherry的新型报告系统

    公开(公告)号:CN116790668A

    公开(公告)日:2023-09-22

    申请号:CN202310952746.1

    申请日:2023-08-01

    Abstract: 本发明公开了一套可以将猪内源KDR(Kinase Insert Domain Receptor)基因替换为mCherry的载体系统。通过研究猪内源KDR翻译终止位点的基因组序列特征,设计了可以将猪内源KDR替换为mCherry的新型载体系统。利用该载体系统,成功实现了猪EPSC细胞的基因替换,并通过诱导HME(Hematopoietic Mesoderm)实现了该报告系统的功能。进而,本发明提供了可以实时监测HME诱导过程中内源KDR基因激活程度的新方法,避免了KDR基因激活带来的基因表达网络的改变。本发明具有创新性强、报告精确、安全性好、操作简便等特点。为后续内源KDR激活的机制研究提供了可靠的技术平台。

    一种将iPSC从多能态向全能态转变的TBX3载体系统

    公开(公告)号:CN116463379A

    公开(公告)日:2023-07-21

    申请号:CN202310506201.8

    申请日:2023-05-06

    Abstract: 本发明公开了一套可以将iPSC从多能态向全能态转变的载体系统。从NCBI中提取猪,小鼠,大鼠,人和牛的TBX3的CDS序列进行进化树的分析。其中,猪与人的相似度达到了90%以上,而与小鼠的相似度在86%。这些结果表明,TBX3具有良好的序列保守性,为TBX3推进猪iPSC从多能态向全能态的转变提供了一定的基础。并通过碱性磷酸酶染色,类胚胎形成以及胚胎嵌合试验验证了在该载体系统的作用下猪iPSC的全能态。进而,本发明提供了猪iPSC从多能态向全能态转变的新的载体系统。本发明具有创新性强、安全性好、操作简便等特点。为后续猪iPSC多能态向全能态转变的机制研究提供了可靠的技术平台。

    利用金丝桃素抑制新冠病毒主要蛋白酶活性

    公开(公告)号:CN112691093A

    公开(公告)日:2021-04-23

    申请号:CN202110247935.X

    申请日:2021-03-06

    Abstract: 发明人在长期从事小分子生理活性研究基础上,通过大规模高通量筛选,首次发现金丝桃素能抑制新冠病毒Mpro蛋白酶活性,并通过了后续的酶活实验验证了上述结论。通过抑制Mpro干扰新冠病毒复制,给免疫系统清除进入体内的新冠病毒提供辅助。因此本发明给出了一种金丝桃素潜在的新用途,即开发为药物、保健品或兽药等,应用在人或动物的新冠肺炎预防和治疗中;金丝桃素有着长久的药物和保健品使用记录,其安全性良好。总之,本发明首次发现金丝桃素能抑制新冠病毒Mpro酶活力,目前已知其应用于人或哺乳动物的安全性良好,因此有被开发为新冠病毒特效药物、保健品或兽药等潜在用途。

    一种基于去甲基化促进生殖干细胞自我更新和增殖的载体及其应用

    公开(公告)号:CN104630272A

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201510004923.9

    申请日:2015-01-06

    Inventor: 华进联 郑丽明

    Abstract: 本发明公开了一种基于去甲基化促进生殖干细胞自我更新和增殖的载体及其应用,该载体包裹于慢病毒之中,载体上携带有mTet1基因。所述的载体为慢病毒载体,所述的mTet1基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。本发明提供的基于去甲基化促进生殖干细胞自我更新和增殖的载体,通过慢病毒表达之后使得mTet1基因整合到奶山羊雄性生殖干细胞的基因组。对稳转的阳性细胞进行培养,表现出漩涡状成簇生长,细胞形态学良好,流式分析细胞增殖周期,发现S期细胞数量增加,表明增殖能力增强,而且转录水平发现雄性生殖干细胞相关基因和自我更新相关基因表达上调,分化相关基因表达下调。

    一种山羊雄性生殖干细胞的体外分离及培养方法

    公开(公告)号:CN102154195B

    公开(公告)日:2013-05-08

    申请号:CN201010600520.8

    申请日:2009-09-04

    Inventor: 华进联 朱海鲸

    Abstract: 本发明公开了一种山羊雄性生殖干细胞的体外分离及培养方法,从雄性山羊的睾丸的曲细精管得到精原细胞,山羊雄性生殖干细胞的分离纯化方法采用0.2%明胶和Matrigel差速贴壁结合克隆法,将未贴壁的山羊雄性生殖干细胞与贴壁培养的其他细胞区分、分离。分离到的山羊雄性生殖干细胞的培养为MEF有饲养层培养或者无饲养层培养。分离到的山羊雄性生殖干细胞具有ES细胞特性和向神经细胞、心肌细胞和精子样细胞的分化潜能。

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