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公开(公告)号：CN112226453B
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202011181851.2
申请日：2020-10-29
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种裂殖壶菌CRISPR/Cas9基因编辑系统及其应用。所述基因编辑系统在pBS‑Zeo质粒中引入调控元件得到，所述调控元件包括裂殖壶菌PA8047启动子调控的Cas9蛋白、裂殖壶菌内源性核定位信号、终止子TA8047和由裂殖壶菌PU6‑2启动子调控的sgRNA转录盒。本发明的基因编辑系统可以实现在裂殖壶菌体内的高效基因编辑。
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公开(公告)号：CN116790550A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310543296.0
申请日：2023-05-15
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及一种烟酰胺核糖激酶突变体及其设计方法和应用，所述突变体为将烟酰胺核糖激酶的氨基酸序列中第172位氨基酸残基从缬氨酸突变为赖氨酸得到；所述烟酰胺核糖激酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示，该发明构建的BEANRK突变体相较于野生BEANRK，酶活成功提高了1.2倍，在不使用昂贵磷酸核糖焦磷酸的单酶催化体系中催化NR向产物NMN的转化率能够达到91%，并且该突变体的热稳定性也有所提高，为烟酰胺核糖激酶性能的提高提供了一个有效途径，降低生产成本，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN116731871A
公开(公告)日：2023-09-12
申请号：CN202310262083.0
申请日：2023-03-17
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12N1/14 , C12N1/36 , C12P7/6432 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开一种光和过氧化氢胁迫提高裂殖壶菌中EPA含量的方法，通过分阶段光照刺激培养和过氧化氢胁迫对裂殖壶菌进行种子驯化，将驯化后的菌种在光照刺激和过氧化氢胁迫下发酵培养；所述分阶段光照刺激培养和过氧化氢胁迫指，先对裂殖壶菌进行光照刺激，之后在避光条件下添加过氧化氢驯化裂殖壶菌。本发明发酵油脂中，EPA含量达到11%，同时该调控方法也促进了胞内角鲨烯、类胡萝卜素以及虾青素的积累。本发明通过简单的发酵调控和菌种驯化有效提高了油脂中EPA的含量，提高了油脂品质，为EPA的工业化生产提供了指导。
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公开(公告)号：CN115029398A
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202210791992.9
申请日：2022-07-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种提高榆黄菇胞内麦角硫因产量的方法，将榆黄菇菌种利用过氧化氢连续驯化，利用驯化菌发酵生产麦角硫因。本发明还对发酵培养榆黄菇的培养基进行了优化，在发酵培养过程中添加组氨酸、半胱氨酸、甲硫氨酸等物质，4‑5天时添加维生素复合溶液，特别添加肌醇促进养分的吸收，同时提高转速加强供氧，最高产量可达到681.95mg/L，玉米粉的消耗速率由3.125g/d提升到4g/d，速率提升了28%，种子活力得到提升。本发明的方法简单易控，麦角硫因产量高且均在胞内，容易收获，简化了后续提纯工艺，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN114854732A
公开(公告)日：2022-08-05
申请号：CN202210570363.3
申请日：2022-05-24
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种调控电子传递链提高维生素K2产量的方法，使用纳豆芽孢杆菌（Bacillus natto）作为维生素K2生产菌株，对维生素K2生产菌株进行电刺激，对电刺激后的维生素K2菌株进行种子培养和发酵培养；发酵培养基中添加烟酸、β‑烟酰胺单核苷酸、色氨酸或外源电子受体。使用本发明的优化方法进行维生素K2生产，甘油消耗降低了75%，维生素K2产量提高了55%，单位产量提高124%。胞内NAD+、NADH、NADH/NAD+水平较对照组分别提高了12%，54%和38%，ATP浓度提高了73%。本发明通过简单的菌种刺激和物质添加的策略实现了维生素K2产量的提升，降低了发酵成本，适合工业化生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101878903A
公开(公告)日：2010-11-10
申请号：CN201010206292.6
申请日：2010-06-22
Applicant: 南京工业大学
IPC: A23L1/29
Abstract: 本发明公开了新型DHA微胶囊的制备工艺，该工艺使用蛋白质与糖类反应得到的美拉德反应物为壁材、利用复凝聚法、二次包埋技术，具体步骤是：将油脂均匀分散于阿拉伯胶、明胶水溶液中，调节pH值、温度，发生复凝聚包裹油滴得到湿微胶囊；在湿微胶囊中添加第二次包埋材料美拉德反应产物，经喷雾干燥后得到二次包埋的DHA微胶囊，产品保质期大大延长。本发明得到的微胶囊膜厚度以及机械强度得到提高，具有耐热、耐高湿环境的特点。
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公开(公告)号：CN117737150A
公开(公告)日：2024-03-22
申请号：CN202311736362.2
申请日：2023-12-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及生物酶解技术领域，具体涉及一种榆黄菇中高抗氧化活性提取物及其制备方法。首先液态培养榆黄菇，采用剪切破碎后水提法，得到麦角硫因产量可达641.76mg/L的榆黄菇培养液。本发明在传统热水浸提的基础上进行改进，通过物化加工耦合生物酶进行分步水解提取法，采用纤维素酶、果胶酶和复合蛋白酶进行破壁的同时，将榆黄菇细胞壁中的纤维素和蛋白质酶解成多糖与小肽类物质，同时可以促进麦角硫因的析出，使得榆黄菇中高值生物活性物质得到彻底的提取与利用，抗氧化活性优秀，过程温和，绿色安全，更适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN117230135A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202310832160.1
申请日：2023-07-07
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开一种双酶偶联结合DNA支架提高NMN合成效率的方法，包括：将克鲁维氏酵母来源烟酰胺核糖激酶KLUNRK和大肠杆菌来源的ATP循环酶PPK分别导入载体质粒，获得KLUNRK重组质粒和PPK重组质粒；在KLUNRK的C端通过第一Linker连接第一锌指蛋白，在PPK的N端通过第二Linker连接第二锌指蛋白，分别构建KLUNRK和PPK的融合蛋白重组质粒；将KLUNRK融合蛋白重组质粒和PPK融合蛋白重组质粒分别纯化表达，获得KLUNRK融合蛋白和PPK融合蛋白；将两种融合蛋白与DNA支架混合后加入NMN合成的反应体系，进行NMN合成，反应体系中还包括底物NR和ATP。本发明利用温和且易实现的DNA支架技术，在双酶偶联的基础上，有效提高了NMN合成效率，降低生产成本，具有巨大的工业化生产潜力。
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