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公开(公告)号：CN118955658A
公开(公告)日：2024-11-15
申请号：CN202411010209.6
申请日：2024-07-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种重组猪瘟病毒Npro蛋白、抗猪瘟病毒Npro蛋白的多克隆抗体及其制备方法与应用。所述重组猪瘟病毒Npro蛋白为采用SEQ ID No.2所示经密码子优化的Npro基因与原核表达载体重组，并诱导原核表达，纯化，得到重组Npro蛋白，该重组Npro蛋白纯度高、具有良好的免疫原性，可作为ELISA包被的抗原和制备抗体。进一步将重组Npro蛋白免疫动物，制备得到抗猪瘟病毒Npro蛋白多克隆抗体，所述抗猪瘟病毒Npro蛋白的多克隆抗体特异性良好、效价高、灵敏度高，抗体效价达到1：128000以上，能够应用于ELISA和Western blot检测，为猪瘟病毒的研究和诊断提供了有效工具。
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公开(公告)号：CN110093320A
公开(公告)日：2019-08-06
申请号：CN201910239544.6
申请日：2019-03-27
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K39/125 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪塞内卡病毒GD-SVA-2018株，所述病毒株的全基因序列如SEQ ID NO：2所示。本发明采用PCR方法对广东地区采集的疑似SVA病料进行PCR检测，经PCR证实为猪塞内卡病毒(SVA)，采用仓鼠肾细胞(BHK-21)细胞分离培养，分离培养出1株BHK-21传代细胞培养适应毒株，命名为GD-SVA-2018株。通过将猪塞内卡病毒GD-SVA-2018株灭活病毒液与油乳剂201混合制成灭活疫苗，所述疫苗免疫2月龄母猪28d后，采血测中和抗体效价可达1:256以上，几何平均为1:256～1:512之间，具有良好的免疫原性，具有较大的应用前景。
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公开(公告)号：CN103602761B
公开(公告)日：2015-11-04
申请号：CN201310629121.8
申请日：2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN103616509B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310627844.4
申请日：2013-11-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/09
Abstract: 本发明公开一种检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明试剂盒包括如下组成：以纯化的JEV-EⅢ蛋白作为包被抗原的酶标板、洗涤液、血清稀释液、兔抗猪酶标二抗、底物显色液、终止液、JEV阳性血清、JEV阴性血清。本发明使用的包被抗原易于稳定、大量获得，纯化方法简单易于实现，重组蛋白的浓度易于测定和控制，有利于工业化大量生产。本发明试剂盒用于检测猪乙型脑炎病毒抗体，与现有技术中ELISA试剂盒的检测符合率为90%。本发明试剂盒便于操作，灵敏度高，特异性好，使用成本低，重复性好，适合推广应用，为临床上快速检测JEV抗体提供了可靠手段。
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公开(公告)号：CN103571867B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310542575.1
申请日：2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板，PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂；将znuA基因的上、下游同源臂连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中，在氯霉素的选择压力下，得到同源重组单交换子，再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上，得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株，具有良好的生长特性和遗传稳定性，毒力小且免疫效果相当，因此，其有望成为新型疫苗进行应用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103616509A
公开(公告)日：2014-03-05
申请号：CN201310627844.4
申请日：2013-11-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/531 , G01N2333/185
Abstract: 本发明公开一种检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明试剂盒包括如下组成：以纯化的JEV-EⅢ蛋白作为包被抗原的酶标板、洗涤液、血清稀释液、兔抗猪酶标二抗、底物显色液、终止液、JEV阳性血清、JEV阴性血清。本发明使用的包被抗原易于稳定、大量获得，纯化方法简单易于实现，重组蛋白的浓度易于测定和控制，有利于工业化大量生产。本发明试剂盒用于检测猪乙型脑炎病毒抗体，与现有技术中ELISA试剂盒的检测符合率为90%。本发明试剂盒便于操作，灵敏度高，特异性好，使用成本低，重复性好，适合推广应用，为临床上快速检测JEV抗体提供了可靠手段。
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公开(公告)号：CN103571867A
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201310542575.1
申请日：2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板，PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂；将znuA基因的上、下游同源臂连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中，在氯霉素的选择压力下，得到同源重组单交换子，再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上，得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株，具有良好的生长特性和遗传稳定性，毒力小且免疫效果相当，因此，其有望成为新型疫苗进行应用。
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公开(公告)号：CN102399910B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201110417367.X
申请日：2011-12-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下：5’-AGTAGGACCCTATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTTAAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强，可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤：模板为猪样本的cDNA，利用前述引物，进行PCR反应，得到扩增产物；通过电泳检测扩增产物，做出如下判断：没有扩增产物，证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染；扩增产物长度为154bp，证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪；扩增产物长度不是154bp，初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析，且实用价值高，能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。
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公开(公告)号：CN118127241A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410440647.X
申请日：2024-04-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种用于检测猪繁殖障碍疾病相关病原体的荧光定量PCR引物探针组、试剂盒及应用。所述的用于检测猪繁殖障碍疾病相关病原体的荧光定量PCR引物探针组，包含用于检测PRRSV、PCV2和PCV3的引物和探针组合，其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的引物探针组和试剂盒可以检测到GenBank中收录的所有已知序列的PRRSV、PCV2和PCV3毒株，对PRRSV、PCV2和PCV3标准品质粒最低检出下限均为10copies/μL。本发明为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环二型病毒和圆环三型病毒提供了新的技术手段。
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公开(公告)号：CN114805600B
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202210320567.1
申请日：2022-03-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/135 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的病毒样颗粒及其制备方法与应用。所述VLPs由猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒单个表位或不同抗原表位组合后得到的重组蛋白组装而成，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7所示。利用上述VLPs制备亚单位疫苗，免疫BALB/c雌鼠后，可诱导机体产生特异性免疫反应，能有效预防PCV2d和FMDV的感染，对控制和净化我国猪O型口蹄疫和断奶仔猪多系统衰竭综合征具有重要意义。
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