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公开(公告)号:CN103695561B
公开(公告)日:2015-05-20
申请号:CN201310628630.9
申请日:2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:配制RT-LAMP反应体系,进行恒温反应;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN103602761A
公开(公告)日:2014-02-26
申请号:CN201310629121.8
申请日:2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN103588864A
公开(公告)日:2014-02-19
申请号:CN201310633567.8
申请日:2013-11-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/18 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/70 , C12N2770/24322 , G01N33/56983 , G01N2333/183 , G01N2469/20
Abstract: 本发明公开一种猪瘟病毒C株E2截短蛋白及制备方法与应用。本发明将E2基因主要抗原区进行表达外还将维持其空间结构的三对二硫键进行同时表达,在一定程度上可使得表达蛋白有一定空间结构,更加符合天然蛋白的特点,且包涵体也利于蛋白的纯化。本发明获得的E2截短蛋白,用于建立CSFV IgG抗体ELISA检测方法,结果表明该重组蛋白具有良好的抗原性;所建立的ELISA试剂盒使用后特异、准确、敏感、重复性佳。本发明使用的底物显色液可起到指示的作用,且终止反应后的几个小时直到4度过夜后,检测结果仍具有可信度;因此本发明的显色系统可减少人为因素的影响,避免出现假阳性,使得阴性结果稳定,保证猪瘟抗体得到更好地监测。
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公开(公告)号:CN103588864B
公开(公告)日:2015-01-14
申请号:CN201310633567.8
申请日:2013-11-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K14/18 , C12N15/70 , G01N33/68 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开一种猪瘟病毒C株E2截短蛋白及制备方法与应用。本发明将E2基因主要抗原区进行表达外还将维持其空间结构的三对二硫键进行同时表达,在一定程度上可使得表达蛋白有一定空间结构,更加符合天然蛋白的特点,且包涵体也利于蛋白的纯化。本发明获得的E2截短蛋白,用于建立CSFV IgG抗体ELISA检测方法,结果表明该重组蛋白具有良好的抗原性;所建立的ELISA试剂盒使用后特异、准确、敏感、重复性佳。本发明使用的底物显色液可起到指示的作用,且终止反应后的几个小时直到4度过夜后,检测结果仍具有可信度;因此本发明的显色系统可减少人为因素的影响,避免出现假阳性,使得阴性结果稳定,保证猪瘟抗体得到更好地监测。
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公开(公告)号:CN103695561A
公开(公告)日:2014-04-02
申请号:CN201310628630.9
申请日:2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:配制RT-LAMP反应体系,进行恒温反应;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN103602761B
公开(公告)日:2015-11-04
申请号:CN201310629121.8
申请日:2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,易于大范围推广应用。
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公开(公告)号:CN103616509B
公开(公告)日:2015-09-30
申请号:CN201310627844.4
申请日:2013-11-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/09
Abstract: 本发明公开一种检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明试剂盒包括如下组成:以纯化的JEV-EⅢ蛋白作为包被抗原的酶标板、洗涤液、血清稀释液、兔抗猪酶标二抗、底物显色液、终止液、JEV阳性血清、JEV阴性血清。本发明使用的包被抗原易于稳定、大量获得,纯化方法简单易于实现,重组蛋白的浓度易于测定和控制,有利于工业化大量生产。本发明试剂盒用于检测猪乙型脑炎病毒抗体,与现有技术中ELISA试剂盒的检测符合率为90%。本发明试剂盒便于操作,灵敏度高,特异性好,使用成本低,重复性好,适合推广应用,为临床上快速检测JEV抗体提供了可靠手段。
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公开(公告)号:CN103616509A
公开(公告)日:2014-03-05
申请号:CN201310627844.4
申请日:2013-11-28
Applicant: 华南农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/531
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/531 , G01N2333/185
Abstract: 本发明公开一种检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明试剂盒包括如下组成:以纯化的JEV-EⅢ蛋白作为包被抗原的酶标板、洗涤液、血清稀释液、兔抗猪酶标二抗、底物显色液、终止液、JEV阳性血清、JEV阴性血清。本发明使用的包被抗原易于稳定、大量获得,纯化方法简单易于实现,重组蛋白的浓度易于测定和控制,有利于工业化大量生产。本发明试剂盒用于检测猪乙型脑炎病毒抗体,与现有技术中ELISA试剂盒的检测符合率为90%。本发明试剂盒便于操作,灵敏度高,特异性好,使用成本低,重复性好,适合推广应用,为临床上快速检测JEV抗体提供了可靠手段。
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