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公开(公告)号：CN103667334A
公开(公告)日：2014-03-26
申请号：CN201310542901.9
申请日：2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA及制备方法与应用。本发明以羊布鲁氏菌M5基因组为模板，PCR得到znuA基因的上、下游同源臂，并将其连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5-Δbp26细胞中，分别通过氯霉素和蔗糖选择培养基筛选，得到同源重组双交换子，为重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA。该菌株较M5亲本菌株，生长特性一致，遗传稳定使其不易返祖，毒力小且免疫效果保持良好，并因bp26基因缺失标记可应用于区分检测自然感染或人工免疫。因此，该菌株可作为一种效果更佳的标记疫苗应用于临床。
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公开(公告)号：CN103667334B
公开(公告)日：2015-12-09
申请号：CN201310542901.9
申请日：2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA及制备方法与应用。本发明以羊布鲁氏菌M5基因组为模板，PCR得到znuA基因的上、下游同源臂，并将其连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5-Δbp26细胞中，分别通过氯霉素和蔗糖选择培养基筛选，得到同源重组双交换子，为重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA。该菌株较M5亲本菌株，生长特性一致，遗传稳定使其不易返祖，毒力小且免疫效果保持良好，并因bp26基因缺失标记可应用于区分检测自然感染或人工免疫。因此，该菌株可作为一种效果更佳的标记疫苗应用于临床。
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公开(公告)号：CN103571867B
公开(公告)日：2015-09-30
申请号：CN201310542575.1
申请日：2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板，PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂；将znuA基因的上、下游同源臂连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中，在氯霉素的选择压力下，得到同源重组单交换子，再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上，得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株，具有良好的生长特性和遗传稳定性，毒力小且免疫效果相当，因此，其有望成为新型疫苗进行应用。
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公开(公告)号：CN103571867A
公开(公告)日：2014-02-12
申请号：CN201310542575.1
申请日：2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板，PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂；将znuA基因的上、下游同源臂连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中，在氯霉素的选择压力下，得到同源重组单交换子，再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上，得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株，具有良好的生长特性和遗传稳定性，毒力小且免疫效果相当，因此，其有望成为新型疫苗进行应用。
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