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公开(公告)号:CN103571867B
公开(公告)日:2015-09-30
申请号:CN201310542575.1
申请日:2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板,PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂;将znuA基因的上、下游同源臂连接,得到片段ΔznuA;将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上,得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA;将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中,在氯霉素的选择压力下,得到同源重组单交换子,再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上,得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株,具有良好的生长特性和遗传稳定性,毒力小且免疫效果相当,因此,其有望成为新型疫苗进行应用。
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公开(公告)号:CN103571867A
公开(公告)日:2014-02-12
申请号:CN201310542575.1
申请日:2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板,PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂;将znuA基因的上、下游同源臂连接,得到片段ΔznuA;将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上,得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA;将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中,在氯霉素的选择压力下,得到同源重组单交换子,再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上,得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株,具有良好的生长特性和遗传稳定性,毒力小且免疫效果相当,因此,其有望成为新型疫苗进行应用。
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公开(公告)号:CN103667334B
公开(公告)日:2015-12-09
申请号:CN201310542901.9
申请日:2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA及制备方法与应用。本发明以羊布鲁氏菌M5基因组为模板,PCR得到znuA基因的上、下游同源臂,并将其连接,得到片段ΔznuA;将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上,得到重组质粒pRE-ΔznuA;将该质粒导入羊布鲁氏菌M5-Δbp26细胞中,分别通过氯霉素和蔗糖选择培养基筛选,得到同源重组双交换子,为重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA。该菌株较M5亲本菌株,生长特性一致,遗传稳定使其不易返祖,毒力小且免疫效果保持良好,并因bp26基因缺失标记可应用于区分检测自然感染或人工免疫。因此,该菌株可作为一种效果更佳的标记疫苗应用于临床。
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公开(公告)号:CN103289986B
公开(公告)日:2015-09-30
申请号:CN201310153715.6
申请日:2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种牛布鲁氏菌重组菌株S19-Δbp26-BL及其制备方法与应用。本发明以牛布鲁氏菌S19基因组DNA为模板,得到bp26基因的上游同源臂,BLS基因、L7/L12基因和bp26基因的下游同源臂;将前述基因片段依次连接,得到片段Δbp26-BL;分别对pRE112和Δbp26-BL双酶切,连接,得到自杀性同源重组质粒;将该质粒导入S19-Δbp26菌株的感受态细胞中,在氯霉素的选择压力下,得到同源重组单交换子,再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上培养,获得牛布鲁氏菌重组菌S19-Δbp26-BL。该菌株具有良好的遗传稳定性,生长特性和毒力大小好,可作为一种标记疫苗株用于临床。
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公开(公告)号:CN103667334A
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201310542901.9
申请日:2013-11-05
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA及制备方法与应用。本发明以羊布鲁氏菌M5基因组为模板,PCR得到znuA基因的上、下游同源臂,并将其连接,得到片段ΔznuA;将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上,得到重组质粒pRE-ΔznuA;将该质粒导入羊布鲁氏菌M5-Δbp26细胞中,分别通过氯霉素和蔗糖选择培养基筛选,得到同源重组双交换子,为重组菌株M5-Δbp26-ΔznuA。该菌株较M5亲本菌株,生长特性一致,遗传稳定使其不易返祖,毒力小且免疫效果保持良好,并因bp26基因缺失标记可应用于区分检测自然感染或人工免疫。因此,该菌株可作为一种效果更佳的标记疫苗应用于临床。
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公开(公告)号:CN105664148B
公开(公告)日:2019-05-07
申请号:CN201610053070.2
申请日:2016-01-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因工程亚单位混合疫苗及其制备方法和应用,属于兽用疫苗研究领域。本发明运用基因工程的方法大量表达了3种重组蛋白rApxⅠA、rApxIIA和rOMPD,并且重组蛋白具有较好的抗原性。本发明的混合疫苗较三种蛋白单独免疫,rOMPD、rApxⅠA的抗体水平均高于单独免疫时的抗体水平,rApxⅡA的抗体水平和混合疫苗抗体水平显著高于对照组,说明重组亚单位混合疫苗诱导的体液免疫反应,rApxIA和rOMPD抗体在小鼠的交叉免疫保护中发挥极其重要作用。接种后对免疫动物安全无害,是一种具有广阔前景的新型疫苗,将对我国猪传染性胸膜肺炎的防控提供物质储备和技术支撑,具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN105541976A
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201511003701.1
申请日:2015-12-25
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/12 , A61K48/0016 , C12N2750/00034 , C12N2750/10022
Abstract: 本发明公开一种猪圆环病毒2型Cap基因修饰改造重组抗原及其应用,属于兽用疫苗研究领域。所述的改造重组抗原是将目前在我国猪群中广泛流行的猪圆环病毒2型LG株的去核定位序列后的Cap基因进行修饰改造后构建得到。该改造重组抗原制备的疫苗能够刺激机体产生高水平的中和抗体,并且均高于商品化的全病毒灭活疫苗组和单独的去核定位序列后的Cap蛋白免疫组,具有最高的抗体水平,接种后对免疫动物安全无害,并具有价廉、安全、稳定、高产、容易保存和应用的优点,对防控我国猪圆环病毒2型感染引起的相关疾病具有重要的意义,因而本发明具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN105541976B
公开(公告)日:2019-07-09
申请号:CN201511003701.1
申请日:2015-12-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种猪圆环病毒2型Cap基因修饰改造重组抗原及其应用,属于兽用疫苗研究领域。所述的改造重组抗原是将目前在我国猪群中广泛流行的猪圆环病毒2型LG株的去核定位序列后的Cap基因进行修饰改造后构建得到。该改造重组抗原制备的疫苗能够刺激机体产生高水平的中和抗体,并且均高于商品化的全病毒灭活疫苗组和单独的去核定位序列后的Cap蛋白免疫组,具有最高的抗体水平,接种后对免疫动物安全无害,并具有价廉、安全、稳定、高产、容易保存和应用的优点,对防控我国猪圆环病毒2型感染引起的相关疾病具有重要的意义,因而本发明具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN105664148A
公开(公告)日:2016-06-15
申请号:CN201610053070.2
申请日:2016-01-25
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: A61K39/02 , A61K2039/70 , A61K2300/00
Abstract: 本发明公开一种基因工程亚单位混合疫苗及其制备方法和应用,属于兽用疫苗研究领域。本发明运用基因工程的方法大量表达了3种重组蛋白rApxⅠA、rApxIIA和rOMPD,并且重组蛋白具有较好的抗原性。本发明的混合疫苗较三种蛋白单独免疫,rOMPD、rApxⅠA的抗体水平均高于单独免疫时的抗体水平,rApxⅡA的抗体水平和混合疫苗抗体水平显著高于对照组,说明重组亚单位混合疫苗诱导的体液免疫反应,rApxIA和rOMPD抗体在小鼠的交叉免疫保护中发挥极其重要作用。接种后对免疫动物安全无害,是一种具有广阔前景的新型疫苗,将对我国猪传染性胸膜肺炎的防控提供物质储备和技术支撑,具有重要的意义。
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公开(公告)号:CN103289986A
公开(公告)日:2013-09-11
申请号:CN201310153715.6
申请日:2013-04-27
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种牛布鲁氏菌重组菌株S19-Δbp26-BL及其制备方法与应用。本发明以牛布鲁氏菌S19基因组DNA为模板,得到bp26基因的上游同源臂,BLS基因、L7/L12基因和bp26基因的下游同源臂;将前述基因片段依次连接,得到片段Δbp26-BL;分别对pRE112和Δbp26-BL双酶切,连接,得到自杀性同源重组质粒;将该质粒导入S19-Δbp26菌株的感受态细胞中,在氯霉素的选择压力下,得到同源重组单交换子,再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上培养,获得牛布鲁氏菌重组菌S19-Δbp26-BL。该菌株具有良好的遗传稳定性,生长特性和毒力大小好,可作为一种标记疫苗株用于临床。
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