一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN102399909B

    公开(公告)日:2013-05-01

    申请号:CN201110416855.9

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质;引物为如SEQ ID NO:1~4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgSO4、FIP引物、BIP引物组、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;接着将反应体系于61~65℃恒温反应,灭活;通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读:在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒;在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒。

    一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法

    公开(公告)号:CN102399910B

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN201110417367.X

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下:5’-AGTAGGACCCTATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTTAAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强,可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤:模板为猪样本的cDNA,利用前述引物,进行PCR反应,得到扩增产物;通过电泳检测扩增产物,做出如下判断:没有扩增产物,证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染;扩增产物长度为154bp,证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪;扩增产物长度不是154bp,初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析,且实用价值高,能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。

    一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法

    公开(公告)号:CN102399910A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110417367.X

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下:5’-AGTAGGACCC TATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTT AAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强,可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤:模板为猪样本的cDNA,利用前述引物,进行PCR反应,得到扩增产物;通过电泳检测扩增产物,做出如下判断:没有扩增产物,证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染;扩增产物长度为154bp,证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪;扩增产物长度不是154bp,初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析,且实用价值高,能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。

    一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN102399909A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110416855.9

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质;引物为如SEQ ID NO:1~4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgSO4、FIP引物、BIP引物组、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;接着将反应体系于61~65℃恒温反应,灭活;通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读:在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒;在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒。

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