检测猪传染性胃肠炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN103627821B

    公开(公告)日:2015-04-29

    申请号:CN201310632188.7

    申请日:2013-11-29

    CPC classification number: Y02A50/451

    Abstract: 本发明公开一种检测猪传染性胃肠炎病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,易于大范围推广应用。

    检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN103602761A

    公开(公告)日:2014-02-26

    申请号:CN201310629121.8

    申请日:2013-11-29

    CPC classification number: C12Q1/70 C12Q1/6844 C12Q2531/119

    Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,易于大范围推广应用。

    一种检测布鲁菌的LAMP核酸试纸条试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN103276061A

    公开(公告)日:2013-09-04

    申请号:CN201310156085.8

    申请日:2013-04-28

    Abstract: 本发明公开一种检测布鲁菌的LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制LAMP反应体系,包含1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品DNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测,易于大范围推广应用。

    一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法

    公开(公告)号:CN102399910A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110417367.X

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下:5’-AGTAGGACCC TATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTT AAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强,可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤:模板为猪样本的cDNA,利用前述引物,进行PCR反应,得到扩增产物;通过电泳检测扩增产物,做出如下判断:没有扩增产物,证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染;扩增产物长度为154bp,证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪;扩增产物长度不是154bp,初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析,且实用价值高,能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。

    一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用

    公开(公告)号:CN102399909A

    公开(公告)日:2012-04-04

    申请号:CN201110416855.9

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种检测日本乙型脑炎病毒的RT-LAMP可视化试剂盒及其应用。该可视化试剂盒包含引物组和显色物质;引物为如SEQ ID NO:1~4所示的序列,显色物质为钙黄绿素和氯化锰。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、钙黄绿素、氯化锰、MgSO4、FIP引物、BIP引物组、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;接着将反应体系于61~65℃恒温反应,灭活;通过自然光照下或紫外光下判读结果或是二者结合判读:在自然光下反应产物为绿色,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒;在紫外光下反应产物呈现明显的绿色荧光,说明待测样品含有日本乙型脑炎病毒。

    一种一体可视化荧光LAMP检测装置及方法

    公开(公告)号:CN114755211A

    公开(公告)日:2022-07-15

    申请号:CN202210433001.X

    申请日:2022-04-24

    Abstract: 本发明公开了一种一体可视化荧光LAMP检测装置及方法,涉及病原检测技术领域,装置的外壳包括上盖、基座、滤光片插座;所述上盖的开口部分设置为凸起结构,所述滤光片插座设置在所述凸起结构上;所述基座包括加热模块、入射光系统和亮度调节模块、供电模块和温控模块,其中所述供电模块与加热模块、温控模块之间电性连接;所述供电模块与入射光系统、亮度调节模块之间电性连接,入射光系统包括激发光灯组和带通滤光片,所述带通滤光片与加热模块的入光口通道正对设置,所述激发光灯组与带通滤光片卡口正对设置。本发明装置具备便携、一体化的优点,可以对样品进行等温扩增反应,可通过肉眼观察检测结果,给工作人员提供极大的便利。

    检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN103602761B

    公开(公告)日:2015-11-04

    申请号:CN201310629121.8

    申请日:2013-11-29

    Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1~6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下:首先配制RT-LAMP反应体系,包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA;恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读:阳性结果为出现两条红色条带,一条位于检测区内,另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉,反应结果易于观察,特异性好,易于大范围推广应用。

    检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN103616509B

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201310627844.4

    申请日:2013-11-28

    Abstract: 本发明公开一种检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明试剂盒包括如下组成:以纯化的JEV-EⅢ蛋白作为包被抗原的酶标板、洗涤液、血清稀释液、兔抗猪酶标二抗、底物显色液、终止液、JEV阳性血清、JEV阴性血清。本发明使用的包被抗原易于稳定、大量获得,纯化方法简单易于实现,重组蛋白的浓度易于测定和控制,有利于工业化大量生产。本发明试剂盒用于检测猪乙型脑炎病毒抗体,与现有技术中ELISA试剂盒的检测符合率为90%。本发明试剂盒便于操作,灵敏度高,特异性好,使用成本低,重复性好,适合推广应用,为临床上快速检测JEV抗体提供了可靠手段。

    检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用

    公开(公告)号:CN103616509A

    公开(公告)日:2014-03-05

    申请号:CN201310627844.4

    申请日:2013-11-28

    CPC classification number: G01N33/56983 G01N33/531 G01N2333/185

    Abstract: 本发明公开一种检测猪乙型脑炎病毒的EⅢ-间接ELISA抗体检测试剂盒及应用。本发明试剂盒包括如下组成:以纯化的JEV-EⅢ蛋白作为包被抗原的酶标板、洗涤液、血清稀释液、兔抗猪酶标二抗、底物显色液、终止液、JEV阳性血清、JEV阴性血清。本发明使用的包被抗原易于稳定、大量获得,纯化方法简单易于实现,重组蛋白的浓度易于测定和控制,有利于工业化大量生产。本发明试剂盒用于检测猪乙型脑炎病毒抗体,与现有技术中ELISA试剂盒的检测符合率为90%。本发明试剂盒便于操作,灵敏度高,特异性好,使用成本低,重复性好,适合推广应用,为临床上快速检测JEV抗体提供了可靠手段。

    一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法

    公开(公告)号:CN102399910B

    公开(公告)日:2013-06-05

    申请号:CN201110417367.X

    申请日:2011-12-13

    Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下:5’-AGTAGGACCCTATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTTAAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强,可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤:模板为猪样本的cDNA,利用前述引物,进行PCR反应,得到扩增产物;通过电泳检测扩增产物,做出如下判断:没有扩增产物,证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染;扩增产物长度为154bp,证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪;扩增产物长度不是154bp,初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析,且实用价值高,能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。

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