公开(公告)号：CN110093320A

公开(公告)日：2019-08-06

申请号：CN201910239544.6

申请日：2019-03-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈金顶 ,  杨超 ,  章洋溢 ,  黄允真 ,  聂恺阳 ,  赵明秋

IPC: C12N7/00 ,  A61K39/125 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明公开了一种猪塞内卡病毒GD-SVA-2018株，所述病毒株的全基因序列如SEQ ID NO：2所示。本发明采用PCR方法对广东地区采集的疑似SVA病料进行PCR检测，经PCR证实为猪塞内卡病毒(SVA)，采用仓鼠肾细胞(BHK-21)细胞分离培养，分离培养出1株BHK-21传代细胞培养适应毒株，命名为GD-SVA-2018株。通过将猪塞内卡病毒GD-SVA-2018株灭活病毒液与油乳剂201混合制成灭活疫苗，所述疫苗免疫2月龄母猪28d后，采血测中和抗体效价可达1:256以上，几何平均为1:256～1:512之间，具有良好的免疫原性，具有较大的应用前景。

公开(公告)号：CN103602761B

公开(公告)日：2015-11-04

申请号：CN201310629121.8

申请日：2013-11-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈金顶 ,  邓洁汝 ,  勾红潮 ,  裴晶晶 ,  刘翠翠 ,  姚俊庸 ,  赵明秋

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，易于大范围推广应用。

公开(公告)号：CN103571867B

公开(公告)日：2015-09-30

申请号：CN201310542575.1

申请日：2013-11-05

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈金顶 ,  马思思 ,  王佳莹 ,  刘翠翠 ,  吴云燕 ,  赵明秋

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板，PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂；将znuA基因的上、下游同源臂连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中，在氯霉素的选择压力下，得到同源重组单交换子，再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上，得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株，具有良好的生长特性和遗传稳定性，毒力小且免疫效果相当，因此，其有望成为新型疫苗进行应用。

公开(公告)号：CN103571867A

公开(公告)日：2014-02-12

申请号：CN201310542575.1

申请日：2013-11-05

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈金顶 ,  马思思 ,  王佳莹 ,  刘翠翠 ,  吴云燕 ,  赵明秋

IPC: C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  A61K39/10 ,  A61P31/04 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开一株羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA及制备方法与应用。本发明通过以羊布鲁氏菌M5基因组DNA为模板，PCR扩增得到znuA基因的上、下游同源臂；将znuA基因的上、下游同源臂连接，得到片段ΔznuA；将片段ΔznuA克隆至载体pRE112上，得到自杀性同源重组质粒pRE-ΔznuA；将该质粒导入羊布鲁氏菌M5细胞中，在氯霉素的选择压力下，得到同源重组单交换子，再将同源重组单交换子涂布于选择培养基上，得到羊布鲁氏菌重组菌株M5-ΔznuA。该菌株较M5菌株，具有良好的生长特性和遗传稳定性，毒力小且免疫效果相当，因此，其有望成为新型疫苗进行应用。

公开(公告)号：CN102399910B

公开(公告)日：2013-06-05

申请号：CN201110417367.X

申请日：2011-12-13

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈金顶 ,  李姗姗 ,  胡永明 ,  赵明秋 ,  勾红潮 ,  刘薇 ,  裴晶晶 ,  刘文俊

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/68 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下：5’-AGTAGGACCCTATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTTAAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强，可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤：模板为猪样本的cDNA，利用前述引物，进行PCR反应，得到扩增产物；通过电泳检测扩增产物，做出如下判断：没有扩增产物，证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染；扩增产物长度为154bp，证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪；扩增产物长度不是154bp，初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析，且实用价值高，能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。

公开(公告)号：CN114805599B

公开(公告)日：2023-08-04

申请号：CN202210319155.6

申请日：2022-03-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈金顶 ,  罗朝唯 ,  颜权辉 ,  丁红星 ,  范双旗 ,  刘家勐 ,  吴珂珂 ,  李玉婉 ,  赵明秋 ,  易琳

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/866 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于分子生物技术领域，具体涉及一种基于ADDomer嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的VLPs及应用。一种基于ADDomer嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白是在ADDomer载体VL区、RGD1区和RGD2区中插入以下猪O型口蹄疫病毒抗原表位的任一或串联的任意组合：所述猪O型口蹄疫病毒抗原表位为T细胞表位第16～44位氨基酸、B细胞表位第129～160位氨基酸和B细胞表位第200～213位氨基酸。所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。利用重组蛋白组装成新型嵌合病毒样颗粒，并用于制备亚单位疫苗，免疫BALB/c雌鼠后，可诱导机体产生特异性免疫反应，能有效预防FMDV的感染，对控制和净化我国猪O型口蹄疫具有重要意义。

公开(公告)号：CN114805599A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210319155.6

申请日：2022-03-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈金顶 ,  罗朝唯 ,  颜权辉 ,  丁红星 ,  范双旗 ,  刘家勐 ,  吴珂珂 ,  李玉婉 ,  赵明秋 ,  易琳

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/866 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明属于分子生物技术领域，具体涉及一种基于ADDomer嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的VLPs及应用。一种基于ADDomer嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白是在ADDomer载体VL区、RGD1区和RGD2区中插入以下猪O型口蹄疫病毒抗原表位的任一或串联的任意组合：所述猪O型口蹄疫病毒抗原表位为T细胞表位第16～44位氨基酸、B细胞表位第129～160位氨基酸和B细胞表位第200～213位氨基酸。所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.3所示。利用重组蛋白组装成新型嵌合病毒样颗粒，并用于制备亚单位疫苗，免疫BALB/c雌鼠后，可诱导机体产生特异性免疫反应，能有效预防FMDV的感染，对控制和净化我国猪O型口蹄疫具有重要意义。

公开(公告)号：CN105541976B

公开(公告)日：2019-07-09

申请号：CN201511003701.1

申请日：2015-12-25

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 陈金顶 ,  吴云燕 ,  孙秀 ,  漆月 ,  朱俊灵 ,  王利军 ,  李鹏 ,  赵明秋

IPC: C07K14/01 ,  C12N15/34 ,  C12N15/63 ,  A61K39/12 ,  A61K48/00 ,  A61P31/20

Abstract: 本发明公开一种猪圆环病毒2型Cap基因修饰改造重组抗原及其应用，属于兽用疫苗研究领域。所述的改造重组抗原是将目前在我国猪群中广泛流行的猪圆环病毒2型LG株的去核定位序列后的Cap基因进行修饰改造后构建得到。该改造重组抗原制备的疫苗能够刺激机体产生高水平的中和抗体，并且均高于商品化的全病毒灭活疫苗组和单独的去核定位序列后的Cap蛋白免疫组，具有最高的抗体水平，接种后对免疫动物安全无害，并具有价廉、安全、稳定、高产、容易保存和应用的优点，对防控我国猪圆环病毒2型感染引起的相关疾病具有重要的意义，因而本发明具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN109957622A

公开(公告)日：2019-07-02

申请号：CN201910239540.8

申请日：2019-03-27

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 赵明秋 ,  章洋溢 ,  李晓明 ,  张媛媛 ,  黄允真 ,  陈金顶

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/04 ,  C12N15/11 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种检测鸭传染性浆膜炎的RPA‑LFD可视化试剂盒及其应用；所述试剂盒包含RPA‑LFD引物对和探针，所述引物对的上游引物、下游引物，探针序列依次如SEQ ID NO.1～3所示；其中，下游引物5’端用生物素Biotin标记；探针5’端用羧基荧光素FAM标记，3’端用C3‑Spacer修饰，且离5’端第32位碱基被四氢呋喃替代。所述试剂盒将RPA技术结合核酸试纸条技术用于检测鸭疫里氏杆菌，可以在常温等温条件下扩增、试纸条可视化检测，不需要PCR仪、荧光定量PCR仪、电泳仪、电泳槽等复杂的仪器设备，且RPA不需要复杂的样品处理，可以真正实现便携式的现场快速核酸检测。

公开(公告)号：CN109609695A

公开(公告)日：2019-04-12

申请号：CN201811640358.5

申请日：2018-12-29

Applicant: 华南农业大学

Inventor： 赵明秋 ,  李晓明 ,  张静远 ,  张媛媛 ,  易琳 ,  陈金顶 ,  丁红星

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及病毒检测领域，尤其涉及一种检测猪流行性腹泻病毒的RPA-LED可视化试剂盒。本发明提供了检测猪流行性腹泻病毒的重组酶聚合酶等温扩增引物组，包括序列如SEQ ID NO：1-3所示的上游引物、下游引物和探针。还提供了检测猪流行性腹泻病毒的逆转录重组酶聚合酶等温扩增试剂，包括重组酶聚合酶、dNTPs和所述的引物组。另外提供了检测猪流行性腹泻病毒的逆转录重组酶聚合酶等温扩增试剂盒，所述试剂盒含有所述的引物组或所述的试剂。本发明检测试剂盒的特异性强，灵敏度高，且结果便于观察，不需要复杂设备，可以真正实现便携式的现场快速核酸检测猪流行性腹泻病毒。