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公开(公告)号:CN118955658A
公开(公告)日:2024-11-15
申请号:CN202411010209.6
申请日:2024-07-26
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明提供了一种重组猪瘟病毒Npro蛋白、抗猪瘟病毒Npro蛋白的多克隆抗体及其制备方法与应用。所述重组猪瘟病毒Npro蛋白为采用SEQ ID No.2所示经密码子优化的Npro基因与原核表达载体重组,并诱导原核表达,纯化,得到重组Npro蛋白,该重组Npro蛋白纯度高、具有良好的免疫原性,可作为ELISA包被的抗原和制备抗体。进一步将重组Npro蛋白免疫动物,制备得到抗猪瘟病毒Npro蛋白多克隆抗体,所述抗猪瘟病毒Npro蛋白的多克隆抗体特异性良好、效价高、灵敏度高,抗体效价达到1:128000以上,能够应用于ELISA和Western blot检测,为猪瘟病毒的研究和诊断提供了有效工具。
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公开(公告)号:CN118127241A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410440647.X
申请日:2024-04-12
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种用于检测猪繁殖障碍疾病相关病原体的荧光定量PCR引物探针组、试剂盒及应用。所述的用于检测猪繁殖障碍疾病相关病原体的荧光定量PCR引物探针组,包含用于检测PRRSV、PCV2和PCV3的引物和探针组合,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明提供的引物探针组和试剂盒可以检测到GenBank中收录的所有已知序列的PRRSV、PCV2和PCV3毒株,对PRRSV、PCV2和PCV3标准品质粒最低检出下限均为10copies/μL。本发明为检测猪繁殖与呼吸综合征病毒、圆环二型病毒和圆环三型病毒提供了新的技术手段。
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公开(公告)号:CN114805600B
公开(公告)日:2024-03-29
申请号:CN202210320567.1
申请日:2022-03-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/135 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的病毒样颗粒及其制备方法与应用。所述VLPs由猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒单个表位或不同抗原表位组合后得到的重组蛋白组装而成,所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7所示。利用上述VLPs制备亚单位疫苗,免疫BALB/c雌鼠后,可诱导机体产生特异性免疫反应,能有效预防PCV2d和FMDV的感染,对控制和净化我国猪O型口蹄疫和断奶仔猪多系统衰竭综合征具有重要意义。
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公开(公告)号:CN114277191A
公开(公告)日:2022-04-05
申请号:CN202111670783.0
申请日:2021-12-31
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物组合物及应用。所述引物组合物含有核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物;所述应用为核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物在制备检测非洲猪瘟和/或猪瘟的试剂盒中的应用。本发明提供了检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物,并建立了非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒双重RAA琼脂糖凝胶电泳法的检测方法。通过使用本发明提供的引物对待测样本的基因组DNA和/或cDNA进行重组酶介导的等温扩增,再进行琼脂糖凝胶电泳检测,可快速、准确地检测出是否存在非洲猪瘟病毒和/或猪瘟病毒,具有操作简便、检测效率高等优点,对防控非洲猪瘟和猪瘟以及促进养猪业的发展具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN118286396A
公开(公告)日:2024-07-05
申请号:CN202410499509.9
申请日:2024-04-24
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明涉及生物医药技术领域,特别涉及一种TFEB蛋白及其编码基因在制备调控口蹄疫病毒复制产品中的应用。本发明将TFEB基因构建至pCAGGS‑flag‑N真核表达载体中获得TFEB‑flag质粒,该质粒转染进PK‑15细胞中成功表达TFEB蛋白。本发明发现过表达宿主TFEB基因,能显著降低口蹄疫病毒在PK‑15细胞中的复制水平,以TFEB为靶标的siRNA序列,通过靶向干扰TFEB基因,使得PK‑15细胞中FMDV的蛋白表达量和病毒滴度与对照组相比有所升高,表明TFEB蛋白具有抑制口蹄疫病毒复制的作用。
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公开(公告)号:CN118165988A
公开(公告)日:2024-06-11
申请号:CN202410422468.3
申请日:2024-04-09
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/867 , C12N15/66 , C12N7/01 , C12N5/10 , A61K31/713 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种shRNA,特别涉及一种抑制HK2基因表达的shRNA及在制备抑制FMDV复制产品中的应用。本发明以HK2作为靶点,成功构建了猪源shHK2慢病毒干扰重组表达载体,并将其包装进HEK‑293T细胞,且稳转进PK‑15细胞,进而成功构建PK‑15shHK2稳转细胞系,本发明进一步发现干扰HK2表达后,可下调HK2基因表达,显著降低FMDV感染PK‑15细胞后的病毒滴度以及病毒蛋白表达水平,表明HK2干扰慢病毒具有抑制FMDV复制的作用,可用于制备抗FMDV病毒感染的药物,用于抑制FMDV病毒的增殖。
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公开(公告)号:CN114277191B
公开(公告)日:2023-09-19
申请号:CN202111670783.0
申请日:2021-12-31
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12N15/11 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物组合物及应用。所述引物组合物含有核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物;所述应用为核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示的引物在制备检测非洲猪瘟和/或猪瘟的试剂盒中的应用。本发明提供了检测非洲猪瘟病毒和猪瘟病毒的引物,并建立了非洲猪瘟病毒、猪瘟病毒双重RAA琼脂糖凝胶电泳法的检测方法。通过使用本发明提供的引物对待测样本的基因组DNA和/或cDNA进行重组酶介导的等温扩增,再进行琼脂糖凝胶电泳检测,可快速、准确地检测出是否存在非洲猪瘟病毒和/或猪瘟病毒,具有操作简便、检测效率高等优点,对防控非洲猪瘟和猪瘟以及促进养猪业的发展具有重要的应用价值。
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公开(公告)号:CN118894910A
公开(公告)日:2024-11-05
申请号:CN202410998729.6
申请日:2024-07-24
Applicant: 华南农业大学
Inventor: 陈金顶 , 吉俊芝 , 黄竣聪 , 罗子鹏 , 房依琦 , 袁忠茂 , 杜鹏飞 , 谢凯源 , 刘雪怡 , 黄瑶瑶 , 朱帅奇 , 张利红 , 易琳 , 范双旗 , 赵明秋 , 丁红星
IPC: C07K14/08 , C07K14/01 , C12N15/40 , C12N15/34 , C12N15/866 , C12N7/01 , A61K39/295 , A61P31/14 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及生物技术领域,特别涉及一种PRRSV‑GP3‑GP5‑M+PCV2‑TBCap重组蛋白、疫苗及应用。本发明利用状病毒表达系统成功表达了PRRSV GP5、GP3和M蛋白与PCV2TBCap蛋白,该重组蛋白能够诱导机体产生良好的体液和细胞免疫反应,具有良好的免疫原性和安全性。
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公开(公告)号:CN118490815A
公开(公告)日:2024-08-16
申请号:CN202410440649.9
申请日:2024-04-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K38/45 , A61K48/00 , A61K31/713 , A61P31/14 , C12N9/10 , C12N15/54 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体涉及一种GOT1蛋白在制备抗病毒药物中的应用。本发明在猪肾上皮细胞传代细胞系中过表达GOT1,可以使FMDV的复制水平降低,沉默GOT1可以促进FMDV的复制水平,充分表明GOT1蛋白有抑制FMDV复制的生物学功能,可用于制备抗FMDV的药物之中,以抑制FMDV的病毒复制。同时,本发明不仅仅局限于FMDV,其他小RNA病毒科病毒与FMDV具有相似的病毒性状亦可适用,在此基础上,GOT1或能用于制备抗其他小RNA病毒科病毒的药物。
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公开(公告)号:CN117417457A
公开(公告)日:2024-01-19
申请号:CN202311186132.3
申请日:2023-09-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K19/00 , C07K14/01 , C12N15/866 , C12N15/62 , A61K39/12 , A61K39/295 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供PCV2和PCV3融合Cap蛋白二联亚单位疫苗及其制备方法和应用,属于生物技术领域,本发明基于PCV2d亚型Cap和PCV3a‑IM亚型Cap蛋白基因序列,构建单表达PCV2Cap、PCV3Cap及融合表达PCV2Cap‑PCV3Cap蛋白的重组杆状病毒,接种于High Five细胞进行表达条件优化,获得目的蛋白,制备了免疫效果良好的PCV2CAP、PCV3CAP、PCV2/PCV3融合Cap蛋白疫苗,为PCV2/PCV3亚单位疫苗研制奠定了基础。
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