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公开(公告)号:CN110951922A
公开(公告)日:2020-04-03
申请号:CN201911402509.8
申请日:2019-12-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心 , 江苏奇天基因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种RAA荧光法检测亨德拉病毒的引物、探针及检测方法,其中引物和探针适用于RAA荧光法检测,并且能够准确地检测出亨德拉病毒质粒,与尼帕病毒质粒、马流感病毒、马动脉炎病毒和马传染性贫血病毒无交叉反应,特异性达100%;检测方法快速、容易实现高通量,同时降低了检测时间和检测成本,本发明提供的基于RAA荧光法快速检测亨德拉病毒的方法,灵敏度高,每反应检测灵敏度在95%的概率下达到39copies/反应。
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公开(公告)号:CN107663551A
公开(公告)日:2018-02-06
申请号:CN201610607882.7
申请日:2016-07-29
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6869 , C12R1/93
CPC classification number: C12Q1/6869 , C12Q1/701 , C12Q2531/113 , C12Q2565/301 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明属于生物技术领域,它确立了小反刍兽疫病毒焦磷酸测序方法,含有三个技术要点:①确立了核酸检测所需要的引物序列;②确立了检测反应种类;③确立了检测反应体系和反应条件。该小反刍兽疫病毒磷酸测序方法可以用于小反刍兽疫病毒科学研究,也可以用于临床诊断检测。
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公开(公告)号:CN105063236B
公开(公告)日:2016-06-01
申请号:CN201510468315.3
申请日:2015-07-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明提供了一种荧光定量RT-PCR方法用于鉴别小反刍兽疫病毒疫苗毒株和基因4系野毒株,其包括检测小反刍兽疫病毒的引物以及鉴别疫苗株和基因4系野毒株的TaqMan探针。先提取待检样品中的RNA,将其加入到含有上述引物和探针的反应液中,进行一步法荧光定量RT-PCR检测。若疫苗株探针所标记的荧光信号通道内出现特异性荧光曲线,则检测出疫苗株;若基因4系野毒株探针所标记的荧光信号通道出现特异性荧光曲线,则检测出野毒株。本发明可以在一个反应管里面区分小反刍兽疫病毒疫苗株和基因4系野毒株,具有准确特异、操作简单、容易实现高通量的优点,特别适用于小反刍兽疫病原学的快速鉴别诊断、检测和流行病学调查等。
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公开(公告)号:CN105063236A
公开(公告)日:2015-11-18
申请号:CN201510468315.3
申请日:2015-07-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明提供了一种荧光定量RT-PCR方法用于鉴别小反刍兽疫病毒疫苗毒株和基因4系野毒株,其包括检测小反刍兽疫病毒的引物以及鉴别疫苗株和基因4系野毒株的TaqMan探针。先提取待检样品中的RNA,将其加入到含有上述引物和探针的反应液中,进行一步法荧光定量RT-PCR检测。若疫苗株探针所标记的荧光信号通道内出现特异性荧光曲线,则检测出疫苗株;若基因4系野毒株探针所标记的荧光信号通道出现特异性荧光曲线,则检测出野毒株。本发明可以在一个反应管里面区分小反刍兽疫病毒疫苗株和基因4系野毒株,具有准确特异、操作简单、容易实现高通量的优点,特别适用于小反刍兽疫病原学的快速鉴别诊断、检测和流行病学调查等。
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公开(公告)号:CN105002302A
公开(公告)日:2015-10-28
申请号:CN201510468141.0
申请日:2015-07-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/701
Abstract: 本发明的目的是提供一种应用RPA技术检测裂谷热病毒的引物及探针,其正向引物的序列为SEQ ID NO:1,反向引物序列为SEQ ID NO:2所示,探针序列为SEQ ID NO:3所示。本发明根据裂谷热病毒基因组序列设计了大量RPA引物和探针,从中筛选出可快速有效检测裂谷热病毒核酸的引物及探针组合。利用该套引物和探针进行快速检测,以体外转录的裂谷热病毒核酸RNA作为阳性对照可以得到明显的扩增曲线,其他病原核酸如口蹄疫病毒、羊传染性脓疱病毒、山羊支原体和蓝舌病病毒为模板进行反应均没有扩增曲线。
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公开(公告)号:CN103131800B
公开(公告)日:2015-02-25
申请号:CN201310097627.9
申请日:2013-03-25
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明公开了一种小反刍兽疫病毒野毒株与疫苗株鉴别诊断试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒,包括两对引物,即与小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1疫苗株基因组(GenBank Accession Number X74443)中H基因结合的引物对和与小反刍兽疫病毒Tibet 07野毒株基因组(GenBank Accession Number JF939201)中H基因结合的引物对。本发明的小反刍兽疫病毒野毒株与疫苗株鉴别诊断试剂盒,检测灵敏度高,最低可检测出200个拷贝的靶RNA,特异性好,操作简单方便,能有效地将小反刍兽疫病毒疫苗免疫羊和野毒感染羊进行区分,特别适用于小反刍兽疫的监测和检验。
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公开(公告)号:CN104017077A
公开(公告)日:2014-09-03
申请号:CN201410246788.4
申请日:2014-05-30
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C07K16/18 , G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种鉴别不同物种朊蛋白单克隆抗体、制备方法及应用,用以进行朊蛋白研究;该具体过程为:步骤a,准备用于免疫和筛选的朊蛋白抗原;步骤b,骨髓瘤细胞SP2/0的准备;步骤c,动物免疫与细胞融合;步骤d,阳性杂交瘤细胞的筛选与腹水单抗制备;步骤e,单抗成份鉴定;步骤f,单抗应用。本发明中,制备的单抗只与羊脑组织中的PrPC(Ov-PrPC)反应,不与牛脑组织中的PrPC(Bo-PrPC)反应,能够对不同物种朊蛋白进行鉴别。
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公开(公告)号:CN102967703A
公开(公告)日:2013-03-13
申请号:CN201210328006.2
申请日:2012-09-06
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: G01N33/558 , G01N33/531 , C07K16/08 , C07K16/06
Abstract: 一种用于ELISA诊断的生物安全性非洲猪瘟抗原多因子血清,采用基因表达的结构蛋白P72、K205R、P54、A104R四种蛋白,经过化学纯化,用福氏不完全佐剂包被,分三批次肌肉免疫实验动物猪,一个月后采集猪血,分离血清,经过血清学检测,分装保存,将血清分装到ELISA试剂盒中,按照常规ELISA试验方法进行试验。
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公开(公告)号:CN113186358B
公开(公告)日:2022-05-10
申请号:CN202110668447.6
申请日:2021-06-16
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种可同时检测羊痘病毒属牛结节性皮肤病、山羊痘与绵羊痘的Cycleave荧光PCR引物对、探针及应用该引物对和探针的检测方法。本发明所提供的引物对和探针组,其正向引物的序列为SEQID NO:1;反向引物的序列为SEQ ID NO:2;探针的序列为SEQ ID NO:3,且探针的第8位为RNA碱基。本发明所提供的Cycleave荧光PCR检测羊痘病毒属病毒的引物、探针及方法具有检测灵敏度高、特异性好、高通量和操作简便的优点。
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公开(公告)号:CN108866097A
公开(公告)日:2018-11-23
申请号:CN201810758404.5
申请日:2018-07-11
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12N15/863 , C12N15/65
Abstract: 本发明提供的转移载体pLSEG‑EG95的TK基因同源臂之间插入了EG95和两个筛选标记基因。所述的EG95基因开放阅读框(ORF)上游为p7.5K启动子,下游为ATTTTTAT早期转录终止信号。所述的转移载体使用了筛选标记eGFP基因,使得后期筛选更为便捷;又由于引入了gpt基因,较大程度降低了亲本病毒的污染,使重组病毒的纯化更为容易。
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