公开(公告)号：CN112322658A

公开(公告)日：2021-02-05

申请号：CN202011208881.8

申请日：2020-11-03

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 刘拂晓 ,  李岭 ,  邹艳丽

IPC: C12N15/863 ,  C12N15/65 ,  C12N15/45

Abstract: 本发明提供一种用于重组山羊痘病毒构建的重组转移载体。所述的转移载体主要包含：TK基因的左臂和右臂、两个逆向的p7.5K启动子及其分别调控的小反刍兽疫病毒H基因和F基因、p11K启动子、增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因、两个顺向Loxp序列。所述的转移载体与山羊痘病毒在羊睾丸细胞内发生同源重组，获得表达eGFP的重组山羊痘病毒，在Cre酶作用下，eGFP基因被特异性敲除，获得潜在共表达小反刍兽疫病毒H和F蛋白的重组山羊痘病毒。

公开(公告)号：CN112322590A

公开(公告)日：2021-02-05

申请号：CN202011208241.7

申请日：2020-11-03

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 刘拂晓 ,  邹艳丽 ,  李岭

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/63 ,  C07K14/065

Abstract: 本发明提供一种用于重组山羊痘病毒构建的重组转移载体。所述的转移载体主要包含：TK基因的左臂和右臂、两个逆向的p7.5K启动子及其分别调控的羊口疮病毒B2L基因和F1L基因、p11K启动子、增强型绿色荧光蛋白(eGFP)基因、两个顺向Loxp序列。所述的转移载体与山羊痘病毒在羊睾丸细胞内发生同源重组，获得表达eGFP的重组山羊痘病毒，在Cre酶作用下，eGFP基因及p11K启动子被特异性敲除，获得潜在共表达羊口疮病毒B2L和F1L蛋白的重组山羊痘病毒。

公开(公告)号：CN108866097A

公开(公告)日：2018-11-23

申请号：CN201810758404.5

申请日：2018-07-11

Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心

Inventor： 刘拂晓 ,  王志亮 ,  吴晓东

IPC: C12N15/863 ,  C12N15/65

Abstract: 本发明提供的转移载体pLSEG‑EG95的TK基因同源臂之间插入了EG95和两个筛选标记基因。所述的EG95基因开放阅读框(ORF)上游为p7.5K启动子，下游为ATTTTTAT早期转录终止信号。所述的转移载体使用了筛选标记eGFP基因，使得后期筛选更为便捷；又由于引入了gpt基因，较大程度降低了亲本病毒的污染，使重组病毒的纯化更为容易。