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公开(公告)号：CN110438265B
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN201910745127.9
申请日：2019-08-13
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种基于探针导向的重组酶介导的等温扩增技术对非洲猪瘟病毒基因I型和II型的鉴别诊断方法，所述方法能够用于快速诊断和区分非洲猪瘟病毒基因I型和II型。所述基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测不同基因型特异差异位点用探针，所述探针在重组酶介导的等温扩增法用探针的基础上，将四氢呋喃替换位点的后一位碱基或特异差异位点互补位点的后一位碱基，外切酶III酶解到四氢呋喃位点切割结束，切掉的荧光基团修饰的碱基在体系中产生荧光信号，余下的探针部分充当下游引物的作用。所述探针简化检测过程中必须下游引物组分，而将下游引物与探针组合使用，降低了探针与引物发生非特异性扩增。
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公开(公告)号：CN113186358B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202110668447.6
申请日：2021-06-16
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种可同时检测羊痘病毒属牛结节性皮肤病、山羊痘与绵羊痘的Cycleave荧光PCR引物对、探针及应用该引物对和探针的检测方法。本发明所提供的引物对和探针组，其正向引物的序列为SEQID NO：1；反向引物的序列为SEQ ID NO：2；探针的序列为SEQ ID NO：3，且探针的第8位为RNA碱基。本发明所提供的Cycleave荧光PCR检测羊痘病毒属病毒的引物、探针及方法具有检测灵敏度高、特异性好、高通量和操作简便的优点。
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公开(公告)号：CN103952494A
公开(公告)日：2014-07-30
申请号：CN201410078254.5
申请日：2014-03-06
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明涉及一种裂谷热病毒RT-LAMP的检测方法检测过程中：步骤a，建立如下扩增反应体系：5μl RNA样品、2.5μl Bst DNA聚合酶缓冲液(10x)、1μl Bst DNA聚合酶(8U/μl)、1μl AMV反转录酶(10U/μl)、1μld NTP(25mmol/μl)、5μl Betaine(5μmol/μl)、1μl Mg SO4(100nmol/μl)、对应于L基因的四条引物各1μl引物浓度为F3与B3：5pmol/μl、BIP与FIP：70pmol/μl、H2O补足至25μl；步骤b，将上述各组分混匀后，在65℃水浴中反应1.5～2h；步骤c，用1.5％琼脂糖凝胶进行电泳，然后观察结果。本发明新型的RT-LAMP技术具有快速灵敏、操作简单，安全性高，价格低廉，不需要特殊仪器设备等优点，特别适用于基层检验检疫机构普及应用，为裂谷热病毒早期诊断提供了一种快速、使用的诊断方法。
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公开(公告)号：CN110951922A
公开(公告)日：2020-04-03
申请号：CN201911402509.8
申请日：2019-12-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心 , 江苏奇天基因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种RAA荧光法检测亨德拉病毒的引物、探针及检测方法，其中引物和探针适用于RAA荧光法检测，并且能够准确地检测出亨德拉病毒质粒，与尼帕病毒质粒、马流感病毒、马动脉炎病毒和马传染性贫血病毒无交叉反应，特异性达100％；检测方法快速、容易实现高通量，同时降低了检测时间和检测成本，本发明提供的基于RAA荧光法快速检测亨德拉病毒的方法，灵敏度高，每反应检测灵敏度在95％的概率下达到39copies/反应。
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公开(公告)号：CN105063236B
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201510468315.3
申请日：2015-07-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明提供了一种荧光定量RT-PCR方法用于鉴别小反刍兽疫病毒疫苗毒株和基因4系野毒株，其包括检测小反刍兽疫病毒的引物以及鉴别疫苗株和基因4系野毒株的TaqMan探针。先提取待检样品中的RNA，将其加入到含有上述引物和探针的反应液中，进行一步法荧光定量RT-PCR检测。若疫苗株探针所标记的荧光信号通道内出现特异性荧光曲线，则检测出疫苗株；若基因4系野毒株探针所标记的荧光信号通道出现特异性荧光曲线，则检测出野毒株。本发明可以在一个反应管里面区分小反刍兽疫病毒疫苗株和基因4系野毒株，具有准确特异、操作简单、容易实现高通量的优点，特别适用于小反刍兽疫病原学的快速鉴别诊断、检测和流行病学调查等。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105063236A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510468315.3
申请日：2015-07-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明提供了一种荧光定量RT-PCR方法用于鉴别小反刍兽疫病毒疫苗毒株和基因4系野毒株，其包括检测小反刍兽疫病毒的引物以及鉴别疫苗株和基因4系野毒株的TaqMan探针。先提取待检样品中的RNA，将其加入到含有上述引物和探针的反应液中，进行一步法荧光定量RT-PCR检测。若疫苗株探针所标记的荧光信号通道内出现特异性荧光曲线，则检测出疫苗株；若基因4系野毒株探针所标记的荧光信号通道出现特异性荧光曲线，则检测出野毒株。本发明可以在一个反应管里面区分小反刍兽疫病毒疫苗株和基因4系野毒株，具有准确特异、操作简单、容易实现高通量的优点，特别适用于小反刍兽疫病原学的快速鉴别诊断、检测和流行病学调查等。
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公开(公告)号：CN105002302A
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201510468141.0
申请日：2015-07-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/701
Abstract: 本发明的目的是提供一种应用RPA技术检测裂谷热病毒的引物及探针，其正向引物的序列为SEQ ID NO：1，反向引物序列为SEQ ID NO：2所示，探针序列为SEQ ID NO：3所示。本发明根据裂谷热病毒基因组序列设计了大量RPA引物和探针，从中筛选出可快速有效检测裂谷热病毒核酸的引物及探针组合。利用该套引物和探针进行快速检测，以体外转录的裂谷热病毒核酸RNA作为阳性对照可以得到明显的扩增曲线，其他病原核酸如口蹄疫病毒、羊传染性脓疱病毒、山羊支原体和蓝舌病病毒为模板进行反应均没有扩增曲线。
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公开(公告)号：CN113943833B
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202111266568.4
申请日：2021-10-28
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Inventor： 南文龙 , 陆游 , 巩明霞 , 陈义平 , 吴晓东 , 李金明 , 李林 , 王喜乐 , 师丽刚 , 张永强 , 赵永刚 , 屈海龙 , 邹艳丽 , 赵晶晶 , 哈达 , 特木尔巴根 , 张雨初 , 王志亮
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种牛结节性皮肤病病毒LSDV、山羊痘病毒GTPV和绵羊痘病毒SPPV的快速检测方法，以及应用于检测方法的Taqman‑MGB探针三重荧光PCR引物对和探针组。其中用于羊痘病毒属CaPV检测的正向引物，其序列为SEQ ID NO：1、用于羊痘病毒属CaPV检测的反向引物，其序列为SEQ ID NO：2；用于检测牛结节性皮肤病病毒LSDV的探针，其序列为SEQ ID NO：3；用于检测山羊痘病毒GTPV的探针，其序列为SEQ ID NO：4；用于检测绵羊痘病毒SPPV的探针，其序列为SEQ ID NO：5。本发明的方法检测的灵敏度高、特异性好、快速高通量；且检测方法操作简便。
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公开(公告)号：CN113186358A
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202110668447.6
申请日：2021-06-16
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种可同时检测羊痘病毒属牛结节性皮肤病、山羊痘与绵羊痘的Cycleave荧光PCR引物对、探针及应用该引物对和探针的检测方法。本发明所提供的引物对和探针组，其正向引物的序列为SEQID NO：1；反向引物的序列为SEQ ID NO：2；探针的序列为SEQ ID NO：3，且探针的第8位为RNA碱基。本发明所提供的Cycleave荧光PCR检测羊痘病毒属病毒的引物、探针及方法具有检测灵敏度高、特异性好、高通量和操作简便的优点。
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公开(公告)号：CN110592286A
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201911002650.9
申请日：2019-10-21
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心 , 江苏奇天基因生物科技有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种RAA荧光法检测结节性皮肤病病毒的引物、探针及检测方法，其中引物和探针适用于RAA荧光法检测，并且能够准确地检测出结节性皮肤病病毒质粒，与支原体、牛传染性鼻气管炎病毒、牛病毒性腹泻病毒、牛副流感病毒、牛呼吸合胞体病毒、山羊痘病毒、绵羊痘病毒无交叉反应，特异性达100％；检测方法快速、容易实现高通量，同时降低了检测时间和检测成本，本发明提供的基于RAA荧光法快速检测结节性皮肤病病毒DNA的方法，灵敏度高，每反应检测灵敏度达到10copies/反应。
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