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公开(公告)号：CN110438265B
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN201910745127.9
申请日：2019-08-13
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种基于探针导向的重组酶介导的等温扩增技术对非洲猪瘟病毒基因I型和II型的鉴别诊断方法，所述方法能够用于快速诊断和区分非洲猪瘟病毒基因I型和II型。所述基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测不同基因型特异差异位点用探针，所述探针在重组酶介导的等温扩增法用探针的基础上，将四氢呋喃替换位点的后一位碱基或特异差异位点互补位点的后一位碱基，外切酶III酶解到四氢呋喃位点切割结束，切掉的荧光基团修饰的碱基在体系中产生荧光信号，余下的探针部分充当下游引物的作用。所述探针简化检测过程中必须下游引物组分，而将下游引物与探针组合使用，降低了探针与引物发生非特异性扩增。
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公开(公告)号：CN107663551A
公开(公告)日：2018-02-06
申请号：CN201610607882.7
申请日：2016-07-29
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6869 , C12R1/93
CPC classification number: C12Q1/6869 , C12Q1/701 , C12Q2531/113 , C12Q2565/301 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明属于生物技术领域，它确立了小反刍兽疫病毒焦磷酸测序方法，含有三个技术要点：①确立了核酸检测所需要的引物序列；②确立了检测反应种类；③确立了检测反应体系和反应条件。该小反刍兽疫病毒磷酸测序方法可以用于小反刍兽疫病毒科学研究，也可以用于临床诊断检测。
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公开(公告)号：CN105063236B
公开(公告)日：2016-06-01
申请号：CN201510468315.3
申请日：2015-07-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明提供了一种荧光定量RT-PCR方法用于鉴别小反刍兽疫病毒疫苗毒株和基因4系野毒株，其包括检测小反刍兽疫病毒的引物以及鉴别疫苗株和基因4系野毒株的TaqMan探针。先提取待检样品中的RNA，将其加入到含有上述引物和探针的反应液中，进行一步法荧光定量RT-PCR检测。若疫苗株探针所标记的荧光信号通道内出现特异性荧光曲线，则检测出疫苗株；若基因4系野毒株探针所标记的荧光信号通道出现特异性荧光曲线，则检测出野毒株。本发明可以在一个反应管里面区分小反刍兽疫病毒疫苗株和基因4系野毒株，具有准确特异、操作简单、容易实现高通量的优点，特别适用于小反刍兽疫病原学的快速鉴别诊断、检测和流行病学调查等。
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公开(公告)号：CN105063236A
公开(公告)日：2015-11-18
申请号：CN201510468315.3
申请日：2015-07-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2561/101 , C12Q2561/113
Abstract: 本发明提供了一种荧光定量RT-PCR方法用于鉴别小反刍兽疫病毒疫苗毒株和基因4系野毒株，其包括检测小反刍兽疫病毒的引物以及鉴别疫苗株和基因4系野毒株的TaqMan探针。先提取待检样品中的RNA，将其加入到含有上述引物和探针的反应液中，进行一步法荧光定量RT-PCR检测。若疫苗株探针所标记的荧光信号通道内出现特异性荧光曲线，则检测出疫苗株；若基因4系野毒株探针所标记的荧光信号通道出现特异性荧光曲线，则检测出野毒株。本发明可以在一个反应管里面区分小反刍兽疫病毒疫苗株和基因4系野毒株，具有准确特异、操作简单、容易实现高通量的优点，特别适用于小反刍兽疫病原学的快速鉴别诊断、检测和流行病学调查等。
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公开(公告)号：CN105002302A
公开(公告)日：2015-10-28
申请号：CN201510468141.0
申请日：2015-07-31
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
CPC classification number: C12Q1/701
Abstract: 本发明的目的是提供一种应用RPA技术检测裂谷热病毒的引物及探针，其正向引物的序列为SEQ ID NO：1，反向引物序列为SEQ ID NO：2所示，探针序列为SEQ ID NO：3所示。本发明根据裂谷热病毒基因组序列设计了大量RPA引物和探针，从中筛选出可快速有效检测裂谷热病毒核酸的引物及探针组合。利用该套引物和探针进行快速检测，以体外转录的裂谷热病毒核酸RNA作为阳性对照可以得到明显的扩增曲线，其他病原核酸如口蹄疫病毒、羊传染性脓疱病毒、山羊支原体和蓝舌病病毒为模板进行反应均没有扩增曲线。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103131800B
公开(公告)日：2015-02-25
申请号：CN201310097627.9
申请日：2013-03-25
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明公开了一种小反刍兽疫病毒野毒株与疫苗株鉴别诊断试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒，包括两对引物，即与小反刍兽疫病毒Nigeria 75/1疫苗株基因组（GenBank Accession Number X74443）中H基因结合的引物对和与小反刍兽疫病毒Tibet 07野毒株基因组（GenBank Accession Number JF939201）中H基因结合的引物对。本发明的小反刍兽疫病毒野毒株与疫苗株鉴别诊断试剂盒，检测灵敏度高，最低可检测出200个拷贝的靶RNA，特异性好，操作简单方便，能有效地将小反刍兽疫病毒疫苗免疫羊和野毒感染羊进行区分，特别适用于小反刍兽疫的监测和检验。
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公开(公告)号：CN111876527A
公开(公告)日：2020-11-03
申请号：CN202010810132.6
申请日：2020-08-13
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒野毒株与疫苗株鉴别检测试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒，包括三组引物和探针，第一组引物和探针与非洲猪瘟病毒B646L基因保守区特定序列完全配对，用于检测非洲猪瘟病毒；第二组引物和探针与非洲猪瘟病毒EP402R基因保守区特定序列完全配对，用于检测非洲猪瘟病毒野毒株；第三组引物和探针与红色荧光蛋白mCherry基因特定序列完全配对，用于检测非洲猪瘟病毒疫苗株。在三条探针上分别标记不同的荧光报告基团。本发明的非洲猪瘟病毒野毒株与疫苗株鉴别检测试剂盒，检测灵敏度高，最低可检测出浓度为100个拷贝/μL的目的DNA，特异性好，操作简单方便，能有效地将非洲猪瘟疫苗免疫动物和野毒感染动物进行区分。
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公开(公告)号：CN111647693A
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN202010729193.X
申请日：2020-07-27
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟病毒检测试剂盒及其应用。本发明提供的试剂盒，包括检测非洲猪瘟病毒的专用引物和探针，所用的专用引物和探针与非洲猪瘟病毒B646L基因保守区特定序列完全配对。本发明的非洲猪瘟病毒检测试剂盒检测敏感度高，可检出浓度为5.7拷贝/μL的目的DNA，能有效检出猪肉制品中低含量的非洲猪瘟病毒，特异性好，操作简单方便，实用价值高，特别适用于动物防疫、市场监管、海关稽查等的非洲猪瘟病毒检测。
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公开(公告)号：CN110438265A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910745127.9
申请日：2019-08-13
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明提供一种基于探针导向的重组酶介导的等温扩增技术对非洲猪瘟病毒基因I型和II型的鉴别诊断方法，所述方法能够用于快速诊断和区分非洲猪瘟病毒基因I型和II型。所述基于探针导向的重组酶介导的等温扩增法检测不同基因型特异差异位点用探针，所述探针在重组酶介导的等温扩增法用探针的基础上，将四氢呋喃替换位点的后一位碱基或特异差异位点互补位点的后一位碱基，外切酶III酶解到四氢呋喃位点切割结束，切掉的荧光基团修饰的碱基在体系中产生荧光信号，余下的探针部分充当下游引物的作用。所述探针简化检测过程中必须下游引物组分，而将下游引物与探针组合使用，降低了探针与引物发生非特异性扩增。
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公开(公告)号：CN107663552A
公开(公告)日：2018-02-06
申请号：CN201610608504.0
申请日：2016-07-29
Applicant: 中国动物卫生与流行病学中心
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6869 , C12R1/93
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6869 , C12Q2531/113 , C12Q2535/122 , C12Q2565/301 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明属于生物技术领域，它确立了西尼罗病毒焦磷酸测序方法，含有三个技术要点：①确立了核酸检测所需要的引物序列；②确立了检测反应种类；③确立了检测反应体系和反应条件。该西尼罗病毒焦磷酸测序方法可以用于西尼罗病毒科学研究，也可以用于动物或人的临床诊断检测。
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