检测多种病原体的错配耐受荧光实时定量PCR方法

    公开(公告)号:CN109666764A

    公开(公告)日:2019-04-23

    申请号:CN201910036994.5

    申请日:2019-01-15

    Inventor: 乔红兵

    Abstract: 本发明提供了检测多种病原体的错配耐受荧光实时定量PCR方法及在病毒(特别具有高变异性的RNA病毒)检测中的引用;本发明涉及不具有3’→5’外切酶校正功能的DNA聚合酶(非高保真DNA聚合酶)和具有3’→5’外切酶校正功能的高保真DNA聚合酶,当无错配时在非高保真DNA聚合酶作用下驱动引物延伸,形成DNA产物。当引物3’端与模板存在错配的情况下,高保真DNA聚合酶切除引物3’端错配碱基,普通DNA聚合酶负责催化DNA合成;本发明方法特异性好、灵敏度高、重复性好、操作简单、方便快捷,可广泛用于病毒检测等相关领域。

    用于鉴别辽参的实时荧光PCR引物检测方法及应用

    公开(公告)号:CN109234424A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201710544920.3

    申请日:2017-07-06

    Inventor: 李君

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q1/686 C12Q2563/107 C12Q2561/113

    Abstract: 本发明公开一种快速、低成本、无污染及操作方便的用于鉴别辽参的实时荧光PCR特异引物,特异引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示;通用引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示;鉴别方法是提取待测样品DNA;以所得到的DNA为模板,分别以特异引物和通用引物进行实时荧光PCR扩增;分别检测特异引物和通用引物进行实时荧光PCR扩增曲线Ct值,如特异引物和通用引物实时荧光PCR均有扩增曲线Ct值,则被测样本为辽参。

    用于测定末端转移酶活性的方法及试剂盒

    公开(公告)号:CN109055505A

    公开(公告)日:2018-12-21

    申请号:CN201811041659.6

    申请日:2018-09-07

    Inventor: 蔡统聪

    Abstract: 本发明涉及一种用于测定末端转移酶(TdT)活性的方法及试剂盒。所述方法包括:使用TdT在第一单链线性DNA的3’末端加上PolydN;将第二单链线性DNA作为第二单链模板,所述第二单链线性DNA的3’末端具有PolydN',所述第二单链模板与所述第一单链模板仅通过N‑N'部分进行互补配对;补齐互补DNA后进行扩增并定量检测扩增产物,并根据所述扩增产物含量与所述TdT酶活的对应关系确定所述TdT活性;扩增时所用上下游引物分别与所述第一单链模板及所述第二单链模板结合,且结合部分不包括N‑N'互补区,或同时包括N‑N'互补区与非N‑N'互补区。该方法操作步骤简单快速,试剂成本低,灵敏度高。

    一种EB病毒DNA的定量检测方法

    公开(公告)号:CN108754024A

    公开(公告)日:2018-11-06

    申请号:CN201810631220.2

    申请日:2018-06-19

    Inventor: 刘岱璿 唐笑

    Abstract: 本发明公开一种EB病毒DNA定量检测的方法,涉及生物检测的技术领域。本发明提供的EBV DNA定量检测方法,是采用核酸释放剂快速裂解、释放样本中的EBV‑DNA,对血浆样本、外周血样本、咽拭子样本以及阴性阳性对照采取不同的提取方式,配以PCR反应液等组分,在荧光定量PCR仪上,应用实时荧光定量PCR检测技术,通过荧光信号的变化实现EB病毒DNA的定量检测。根据EBV DNA的准确报告值,能够对EB病毒进行定性定量的确定,该方法具有快速、准确、操作方便等优点。

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