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公开(公告)号：CN109880838B
公开(公告)日：2022-09-13
申请号：CN201910185963.6
申请日：2019-03-12
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N15/62 , C12N15/866 , C12N15/66 , C12N7/01 , C07K19/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种分泌表达猪O型口蹄疫病毒多表位基因的重组病毒及其制备方法和应用。本发明通过将猪O型口蹄疫病毒T、B细胞表位串联的方法，根据密码子的偏爱性，人工设计合成了融合蜂毒信号肽的猪O型口蹄疫多表位重组抗原的基因序列，并构建了含有上述重组基因的重组杆状病毒，提高了基因在杆状病毒中分泌表达水平和免疫原性。利用本发明的重组杆状病毒Ac‑RBT所表达RBT蛋白制备亚单位疫苗，免疫猪后，可诱导机体产生特异性免疫反应，诱导猪体产生较高水平特异性抗体，能有效预防口蹄疫病毒的感染，对控制和净化我国猪O型口蹄疫具有重要意义。
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公开(公告)号：CN114805600A
公开(公告)日：2022-07-29
申请号：CN202210320567.1
申请日：2022-03-29
Applicant: 华南农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/866 , A61K39/135 , A61K39/12 , A61P31/14 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的病毒样颗粒及其制备方法与应用。所述VLPs由猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒单个表位或不同抗原表位组合后得到的重组蛋白组装而成，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.5、SEQ ID No.6或SEQ ID No.7所示。利用上述VLPs制备亚单位疫苗，免疫BALB/c雌鼠后，可诱导机体产生特异性免疫反应，能有效预防PCV2d和FMDV的感染，对控制和净化我国猪O型口蹄疫和断奶仔猪多系统衰竭综合征具有重要意义。
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公开(公告)号：CN110423269B
公开(公告)日：2022-03-11
申请号：CN201910610744.8
申请日：2019-07-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种串联优势表位的重组猪圆环病毒2型Cap蛋白及其应用。该串联优势表位的重组猪圆环病毒2型Cap蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码上述蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明进一步构建了含有上述核苷酸序列的双启动子转移载体，并转化大肠杆菌，获得重组杆状病毒质粒；然后转染昆虫细胞，得到重组杆状病毒，其重组蛋白表达量达914μg/ml，能够与阳性血清发生特异性结合，具有良好的免疫学反应性。本发明提供的亚单位疫苗，免疫小鼠后能够刺激小鼠产生高水平的体液免疫应答；免疫仔猪后可诱导机体产生特异性免疫反应，能为攻毒仔猪提供良好的免疫保护作用。
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公开(公告)号：CN110423269A
公开(公告)日：2019-11-08
申请号：CN201910610744.8
申请日：2019-07-08
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种串联优势表位的重组猪圆环病毒2型Cap蛋白及其应用。该串联优势表位的重组猪圆环病毒2型Cap蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，编码上述蛋白的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明进一步构建了含有上述核苷酸序列的双启动子转移载体，并转化大肠杆菌，获得重组杆状病毒质粒；然后转染昆虫细胞，得到重组杆状病毒，其重组蛋白表达量达914μg/ml，能够与阳性血清发生特异性结合，具有良好的免疫学反应性。本发明提供的亚单位疫苗，免疫小鼠后能够刺激小鼠产生高水平的体液免疫应答；免疫仔猪后可诱导机体产生特异性免疫反应，能为攻毒仔猪提供良好的免疫保护作用。
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公开(公告)号：CN105664148B
公开(公告)日：2019-05-07
申请号：CN201610053070.2
申请日：2016-01-25
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种基因工程亚单位混合疫苗及其制备方法和应用，属于兽用疫苗研究领域。本发明运用基因工程的方法大量表达了3种重组蛋白rApxⅠA、rApxIIA和rOMPD，并且重组蛋白具有较好的抗原性。本发明的混合疫苗较三种蛋白单独免疫，rOMPD、rApxⅠA的抗体水平均高于单独免疫时的抗体水平，rApxⅡA的抗体水平和混合疫苗抗体水平显著高于对照组，说明重组亚单位混合疫苗诱导的体液免疫反应，rApxIA和rOMPD抗体在小鼠的交叉免疫保护中发挥极其重要作用。接种后对免疫动物安全无害，是一种具有广阔前景的新型疫苗，将对我国猪传染性胸膜肺炎的防控提供物质储备和技术支撑，具有重要的意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105541976A
公开(公告)日：2016-05-04
申请号：CN201511003701.1
申请日：2015-12-25
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/12 , A61K48/0016 , C12N2750/00034 , C12N2750/10022
Abstract: 本发明公开一种猪圆环病毒2型Cap基因修饰改造重组抗原及其应用，属于兽用疫苗研究领域。所述的改造重组抗原是将目前在我国猪群中广泛流行的猪圆环病毒2型LG株的去核定位序列后的Cap基因进行修饰改造后构建得到。该改造重组抗原制备的疫苗能够刺激机体产生高水平的中和抗体，并且均高于商品化的全病毒灭活疫苗组和单独的去核定位序列后的Cap蛋白免疫组，具有最高的抗体水平，接种后对免疫动物安全无害，并具有价廉、安全、稳定、高产、容易保存和应用的优点，对防控我国猪圆环病毒2型感染引起的相关疾病具有重要的意义，因而本发明具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN103602761A
公开(公告)日：2014-02-26
申请号：CN201310629121.8
申请日：2013-11-29
Applicant: 华南农业大学
CPC classification number: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12Q2531/119
Abstract: 本发明公开一种检测猪瘟病毒的RT-LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制RT-LAMP反应体系，包含AMV逆转录酶、1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、Probe杂交探针、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品RNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN103276061A
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201310156085.8
申请日：2013-04-28
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种检测布鲁菌的LAMP核酸试纸条试剂盒及应用。该试剂盒包含核苷酸序列如SEQ ID NO.1～6所示的引物组和核酸检测试纸条。该试剂盒的使用方法如下：首先配制LAMP反应体系，包含1倍反应缓冲液、链置换DNA聚合酶、dNTP混合物、甜菜碱、MgSO4、FIP引物、BIP引物、LoopF引物、LoopB引物、F3引物、B3引物以及待测样品DNA；恒温反应所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行判读：阳性结果为出现两条红色条带，一条位于检测区内，另一条位于质控区内。该试剂盒操作简单、成本低廉，反应结果易于观察，特异性好，非常适用于出口检疫、食品卫生以及畜牧养殖场的现场检测，易于大范围推广应用。
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公开(公告)号：CN102586198A
公开(公告)日：2012-07-18
申请号：CN201210016518.5
申请日：2012-01-17
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , A61K48/00 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开一种抗口蹄疫病毒复制与感染的重组腺病毒及其制备与应用。本发明通过将siRNA-3D的转录模板、siRNA-L的转录模板、siRNA-2B的转录模板与siRNA-VP1的转录模板分别与U6启动子连接，克隆入载体pAdeno-X，得到能分别转录、串联结构的质粒，再将该质粒线性化后通过包装细胞包装，得到重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1。该重组腺病毒rAdeno-3D-L-2B-VP1的防治效果优于重组腺病毒rAdeno-2B-VP1应用的效果。可见，本发明提供的重组质粒能有效抑制口蹄疫病毒复制和抗口蹄疫病感染。
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公开(公告)号：CN102399910A
公开(公告)日：2012-04-04
申请号：CN201110417367.X
申请日：2011-12-13
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种鉴别猪瘟病毒疫苗株与野毒株的引物及方法。引物如下：5’-AGTAGGACCC TATTGTAGATAA-3’和5’-AGTGCTGTT AAAAATGAGTG-3’。该引物特异性强，可在猪瘟病毒检测中进行应用。使用该引物的检测方法包含如下步骤：模板为猪样本的cDNA，利用前述引物，进行PCR反应，得到扩增产物；通过电泳检测扩增产物，做出如下判断：没有扩增产物，证明所检测的猪样本没有猪瘟病毒感染；扩增产物长度为154bp，证明所检测的猪样本为猪瘟病毒疫苗免疫猪；扩增产物长度不是154bp，初步证明所检测的猪样本为猪瘟病毒野毒感染猪。该方法特异性强、灵敏度高、样品预处理简单、重复性好、易于分析，且实用价值高，能有效将猪瘟病毒疫苗免疫猪与猪瘟病毒野毒感染猪进行区别。
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