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公开(公告)号:CN116904512A
公开(公告)日:2023-10-20
申请号:CN202310916062.6
申请日:2023-07-25
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明提供一种基于体外连接手段的拯救猪流行性腹泻病毒FJzz1株的反向遗传系统及其应用。通过对其全基因组进行分析,在其全基因组内特有的限制性内切酶酶切位点的基础上,我们将其分为A、B、C、D、E、F和G大小不等的七个片段。随后为提高后续连接效率,我们将这七个小片段整合为AB、CDE和FG三个大片段。利用T7体外转录试剂盒将全长cDNA体外转录为RNA转录本与N基因RNA转录本一起转染至Vero细胞拯救病毒。成功获得了可稳定遗传,且具有遗传标记的rFJzz1弱毒感染性克隆毒株,为后续研究FJzz1株PEDV致病机理和新型疫苗的研制提供了技术平台。
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公开(公告)号:CN112415204B
公开(公告)日:2023-10-13
申请号:CN202011146123.8
申请日:2020-10-23
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: G01N33/58 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/558 , C07K16/46 , C12N15/13
Abstract: 本发明公开了一种利用含双特异性抗体的胶体金试纸条检测细菌的方法。所述方法包括以下步骤:(1)将待测细菌和双特异性抗体标记的胶体金反应得到细菌‑双特异性抗体胶体金复合物;(2)纯化所述细菌‑双特异性抗体胶体金复合物并溶解于小分子半抗原‑载体偶联物标记的胶体金溶液,得到上样液;(3)将所述上样液滴加至所述胶体金试纸条上进行反应。本发明检测细菌的方法可以在避免细菌聚集的同时提高检测灵敏度,最佳可达2.5×104CFU/mL,且所述双特异性抗体的稳定性高。
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公开(公告)号:CN116837125A
公开(公告)日:2023-10-03
申请号:CN202311039454.5
申请日:2023-08-17
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12Q1/6804 , C12R1/63
Abstract: 本发明涉及一种基于LAMP‑CRISPR/Cas12b一体化体系快速检测副溶血性弧菌的试剂盒及其方法,包括LAMP引物、sgRNA引导序列、Cas12b酶和ssDNA荧光探针。本发明具有如下优点:可视化检测副溶血性弧菌的试剂盒通过先对待测样品进行LAMP扩增,sgRNA引导序列介导下,引导CRISPR‑Cas12b体系对LAMP扩增产物进行识别结合并切割目标双链DNA,并激活非特异性核酸酶功能,然后任意切割体系中的ssDNA荧光探针得到剪切产物,最后通过检测剪切产物的荧光信号,或用胶体金试纸条可视化检测反应体系中是否存在切下的FAM基团进行判断。本发明检测副溶血性弧菌的LAMP‑CRISPR/cas12b技术,通过LAMP扩增及sgRNA识别双重特异地对检测副溶血性弧菌进行检测,特异性强,且在灵敏度上可低至37CFU/mL,可现场快速检测到食品上污染的副溶血性弧菌。
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公开(公告)号:CN116585309A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310566531.6
申请日:2023-05-18
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: A61K31/426 , A61P31/04 , A61K38/12
Abstract: 本发明公开了硝唑尼特及衍生物在制备多粘菌素抗菌增效剂中的应用、药物组合物及杀菌方法,属于生物医药技术领域。本发明通过棋盘法和时间‑杀菌曲线法验证硝唑尼特或其衍生物能够协同多粘菌素对大肠杆菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷氏菌和沙门氏菌等革兰氏阴性菌的杀菌活性,通过建立小鼠腹腔感染模型证明硝唑尼特或其衍生物联用多粘菌素对革兰氏阴性菌感染具有良好的治疗效果。有益效果:硝唑尼特及衍生物是一种有效的多粘菌素抗菌增效剂,按一定比例与多粘菌素联用,能减少多粘菌素药物使用剂量,对革兰氏阴性菌感染具有良好的治疗学作用。
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公开(公告)号:CN111856015B
公开(公告)日:2023-08-04
申请号:CN201910332397.7
申请日:2019-04-24
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/531 , G01N21/31
Abstract: 本发明公开了一种抗鸭瘟病毒的单克隆抗体,该单克隆抗体与鸭瘟病毒gB蛋白特异性结合。本发明还公开了包含该单克隆抗体的鸭瘟病毒抗体检测方法及其试剂盒。本发明的鸭瘟病毒阻断ELISA抗体检测方法及其试剂盒,具有良好的特异性强和敏感性,在鸭瘟疫苗免疫效力评估和鸭瘟的诊断中表现出很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN112779228B
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202110187738.3
申请日:2021-02-18
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N7/08 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒疫苗株及其制备方法,所述疫苗株为将FJzz1在Vero细胞连续传至200代获得。选取低代次FJzz1‑F20和高代次FJzz1‑F200毒株对仔猪进行了致病性评价,结果显示高代次FJzz1‑F200感染组仔猪临床表现明显轻于FJzz1‑F20感染组,且发病猪未有死亡。与FJzz1‑F20感染组相比,FJzz1‑F200感染组仔猪的粪便排毒量和肠组织中的病毒载量显著降低,且肠道组织无明显组织病理学改变。同时,检测发现FJzz1‑F200感染组在肠组织中可以诱导高水平的I型和III型干扰素产生。上述研究结果表明,本发明的FJzz1‑F200其致病性弱,具有作为PEDV候选弱毒疫苗毒株的潜力。
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公开(公告)号:CN110295197B
公开(公告)日:2023-05-05
申请号:CN201910603170.1
申请日:2019-07-05
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C12N15/866 , C07K14/10 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供了一种重组表达载体、制备得到的III型鸭甲型肝炎病毒样颗粒、制备方法及应用,包含III型鸭甲型肝炎病毒结构蛋白前体基因P1和蛋白水解酶基因3C;所述结构蛋白前体基因P1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述蛋白水解酶基因3C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。经过密码子优化的基因在昆虫细胞中表达水平明显提高,可获得具有较好空间构型的蛋白,在胞内自发组装成病毒样颗粒(VLPs),够获得高纯度、形态均一、性状稳定的病毒颗粒。
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公开(公告)号:CN110407944B
公开(公告)日:2023-04-21
申请号:CN201810405650.2
申请日:2018-04-29
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , A61K39/002 , A61P33/02
Abstract: 本发明公开了一种隐孢子虫多表位融合蛋白,包含:SEQ ID NO.1~10所示表位序列以任意顺序相互串联形成的氨基酸序列。本发明还公开了隐孢子虫多表位基因片段,其包含编码上述融合蛋白的核苷酸序列。本发明隐孢子虫多表位基因片段,经原核表达后所得的重组蛋白,或克隆至真核载体所得的真核重组载体,无论是单独免疫,还是添加大蒜素,对小鼠泰泽隐孢子虫感染都有很好的保护作用,适于作为抗隐孢子虫病的多表位疫苗。
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公开(公告)号:CN113908121B
公开(公告)日:2023-03-28
申请号:CN202111193757.3
申请日:2021-10-13
Applicant: 中国农业科学院上海兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心上海分中心)
Abstract: 本发明公开了一种氯硝柳胺注射液及其制备和应用;制备时称取氯硝柳胺2g,加入增溶剂0.5g‑8g,混匀后加入溶剂50‑75ml,搅拌使其溶解,充分溶解后加入缓冲液,混匀后加水定容到指定体积。该注射液澄清透明,pH稳定,对金黄色葡萄球菌敏感菌和耐加氧西林金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为0.06μg/ml和0.125μg/ml,建立金黄色葡萄球菌小鼠皮肤感染模型后,分别皮下注射5mg/kg.bw、10mg/kg.bw、20mg/kg.bw后发现,给药组能很好防治小鼠皮肤感染,与对照组环丙沙星组没有显著性差异。
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