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公开(公告)号：CN112080439B
公开(公告)日：2023-01-10
申请号：CN202010749082.5
申请日：2020-07-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种人源细胞凋亡调控蛋白Bcl‑2在提高酿酒酵母橙花叔醇产量中的应用，本发明只需要简单地在含橙花叔醇合成酶基因的酿酒酵母工程菌中过表达人源抗凋亡调控蛋白Bcl‑2编码基因，就可以促进橙花叔醇合成，橙花叔醇摇瓶量提高了77.7％，达到594.1mg/L。向培养基中添加脂肪酸后，橙花叔醇摇瓶产量进一步提高至725.5mg/L，为目前报道的摇瓶发酵最高产量。
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公开(公告)号：CN110484572B
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN201910814145.8
申请日：2019-08-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母橙花叔醇产量的方法，所述方法为：在敲除Gal80基因的酿酒酵母中，使用Gal启动子驱动甲羟戊酸途径代谢酶和橙花叔醇合成酶的表达形成二次生长诱导系统，同时过表达转录因子hac1基因，构建得到合成橙花叔醇的酵母工程菌。本发明使用酵母二次生长诱导系统进行代谢改造，当GAL启动子驱动的表达盒大量整合在基因组上后，GAL启动子的转录活性大幅度下降，而本发明中过表达转录因子Hac1则可以提高GAL启动子的转录活性和菌株活力，进而促进二次生长诱导系统中目标代谢产物的合成，橙花叔醇产量提高了48.4％，达到497mg/L。
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公开(公告)号：CN110484572A
公开(公告)日：2019-11-22
申请号：CN201910814145.8
申请日：2019-08-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母橙花叔醇产量的方法，所述方法为：在敲除Gal80基因的酿酒酵母中，使用Gal启动子驱动甲羟戊酸途径代谢酶和橙花叔醇合成酶的表达形成二次生长诱导系统，同时过表达转录因子hac1基因，构建得到合成橙花叔醇的酵母工程菌。本发明使用酵母二次生长诱导系统进行代谢改造，当GAL启动子驱动的表达盒大量整合在基因组上后，GAL启动子的转录活性大幅度下降，而本发明中过表达转录因子Hac1则可以提高GAL启动子的转录活性和菌株活力，进而促进二次生长诱导系统中目标代谢产物的合成，橙花叔醇产量提高了48.4％，达到497mg/L。
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公开(公告)号：CN112080439A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202010749082.5
申请日：2020-07-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种人源细胞凋亡调控蛋白Bcl‑2在提高酿酒酵母橙花叔醇产量中的应用，本发明只需要简单地在含橙花叔醇合成酶基因的酿酒酵母工程菌中过表达人源抗凋亡调控蛋白Bcl‑2编码基因，就可以促进橙花叔醇合成，橙花叔醇摇瓶量提高了77.7％，达到594.1mg/L。向培养基中添加脂肪酸后，橙花叔醇摇瓶产量进一步提高至725.5mg/L，为目前报道的摇瓶发酵最高产量。
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公开(公告)号：CN116808053A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310763356.X
申请日：2023-06-27
Applicant: 浙江工业大学
IPC: A61K31/702 , A61K31/732 , A61K33/04 , A61P39/06 , B82Y5/00 , C12P19/00 , C12P19/12 , C12P19/04
Abstract: 本发明公开了一种果胶寡糖纳米硒复合物及其制备方法和应用，将柑橘皮粉末加入水中，调节pH至酸性，添加果胶裂解酶，搅拌浸提酶解反应，并进一步加入碘化钾、抗坏血环酸和四价硒源，进行水浴反应之后，将所得反应液进行透析得到果胶寡糖纳米硒复合物溶液，再将其冷冻干燥成粉末状固体，即可得到果胶寡糖纳米硒复合物。本发明以果胶寡糖裂解液为稳定剂，制备的果胶寡糖纳米硒复合物具有粒径小、稳定性好、有较好的抗氧化能力。且方法操作简单便捷、条件温和、能耗低、污染小。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115927285A
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN202211686468.1
申请日：2022-12-26
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N11/082 , C12N11/089 , C12N11/087 , C12N9/20 , C12N9/50 , C12N9/88 , C12N9/18 , C12N9/16
Abstract: 本发明公开了一种降低大孔吸附树脂固定化酶蛋白泄露的方法，所述方法是以大孔吸附树脂为载体吸附酶蛋白，然后再在吸附酶蛋白的树脂表面涂覆一层有机聚合物溶液涂层，实现降低大孔吸附树脂固定化酶蛋白泄露的目的；本发明有机聚合物涂层表面有均匀的通道结构，通过孔径大小筛选机制，既保证底物可以快速扩散到涂层内部，又有效地减少了涂层内的蛋白泄漏。有机聚合物涂层后的固定化酶酶活为未涂层固定化酶的100.3％，前者的蛋白泄露率仅为后者的23.8％。该方法属于物理固定化方法，可以避免酶与载体发生不必要的化学反应，从而不会改变酶蛋白本身的催化活性，是一种提高酶的稳定性同时降低酶蛋白泄露的有效固定化方法。
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公开(公告)号：CN112143662B
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202010900606.6
申请日：2020-08-31
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组毕赤酵母及在制备嘌呤中的应用，所述重组毕赤酵母工程菌是将SEQ ID NO.1所示基因Rihc‑2、SEQ ID NO.2所示基因Hac1和SEQ ID NO.3所示基因PDI导入宿主菌构建获得的。本发明首次将腺苷水解酶在毕赤酵母中以分泌表达方式高效表达，并且组合应用了基因高拷贝、抗性可循环使用表达载体、HAC1和PDI基因导入等强化蛋白表达的策略，提高了重组酶的生产效率；本发明得到的菌株WC‑5在5L发酵罐中采用补料分批高密度发酵方法，腺苷水解酶蛋白表达量为500mg/L。发酵液上清粗酶液可应用于腺苷及鸟苷的水解反应。
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公开(公告)号：CN113621090A
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN202110770676.9
申请日：2021-07-08
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C08B37/06
Abstract: 本发明公开了一种果胶多阶段脱色方法，所述方法将柑橘粉溶于水中，调节pH为1‑3，在70‑90℃磁力搅拌下反应1‑2h，将反应液过滤，滤液离心，收集上清液；在上清液中加入脱色剂，30‑60℃静置脱色25‑35min，离心，收集上清液；在上清液中加入乙醇，室温静置沉淀1‑3h，过滤，滤饼用乙醇洗涤后过滤，滤饼干燥，获得脱色果胶。本发明方法制备得到的多阶段脱色果胶，得率在8.9‑26.8％之间，其果胶的色值A420为1.381以下，其酯化度在67.5‑84.9％之间，经旋转流变仪测定得到脱色果胶表观粘度在0.3569‑21.777mPa·s之间，经质构仪检测后得到凝胶强度在0.036‑0.255kgf/cm2之间。
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公开(公告)号：CN110438194B
公开(公告)日：2021-06-08
申请号：CN201910687634.1
申请日：2019-07-29
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供了一种脂肪酶在制备D‑托品酸甲酯中的应用，所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码基因如SEQ ID NO.2所示。以重组脂肪酶工程菌发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的冻干菌体为催化剂，外消旋托品酸甲酯为底物，以pH7.0磷酸缓冲溶液为反应介质，进行拆分制备D‑托品酸甲酯，对映体过量值>99％，D‑托品酸甲酯的收率达到95.0％。
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公开(公告)号：CN110527646B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN201910766504.7
申请日：2019-08-20
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种热带芽孢杆菌WZZ018及其应用，所述的应用为：以热带芽孢杆菌WZZ018经发酵培养获得的湿菌体或冷冻干燥后的冻干菌粉为催化剂，以外消旋5‑氯‑2,3‑二氢‑2‑羟基‑1‑氧代‑1H‑茚‑2‑羧酸甲酯为底物，以pH值5.0～10.0的缓冲液为反应介质，在20～45℃、100～300r/min条件下进行拆分；本发明提供的产酶微生物菌株‑‑热带芽孢杆菌WZZ018的区域选择性强，制备的产物对映体过量值最高可达93.72％，反应转化率高，酶反应条件温和、副产物少，环境污染小，是一种高效制备高纯度对映体的方法，适合工业化生产。
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