公开(公告)号：CN112143662A

公开(公告)日：2020-12-29

申请号：CN202010900606.6

申请日：2020-08-31

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 魏春 ,  赵理想 ,  钱晓芬 ,  汪钊 ,  孙杰

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N9/24 ,  C12P17/18 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种重组毕赤酵母及在制备嘌呤中的应用，所述重组毕赤酵母工程菌是将SEQ ID NO.1所示基因Rihc‑2、SEQ ID NO.2所示基因Hac1和SEQ ID NO.3所示基因PDI导入宿主菌构建获得的。本发明首次将腺苷水解酶在毕赤酵母中以分泌表达方式高效表达，并且组合应用了基因高拷贝、抗性可循环使用表达载体、HAC1和PDI基因导入等强化蛋白表达的策略，提高了重组酶的生产效率；本发明得到的菌株WC‑5在5L发酵罐中采用补料分批高密度发酵方法，腺苷水解酶蛋白表达量为500mg/L。发酵液上清粗酶液可应用于腺苷及鸟苷的水解反应。

公开(公告)号：CN112143662B

公开(公告)日：2023-01-06

申请号：CN202010900606.6

申请日：2020-08-31

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 魏春 ,  赵理想 ,  钱晓芬 ,  汪钊 ,  孙杰

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N9/24 ,  C12P17/18 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明公开了一种重组毕赤酵母及在制备嘌呤中的应用，所述重组毕赤酵母工程菌是将SEQ ID NO.1所示基因Rihc‑2、SEQ ID NO.2所示基因Hac1和SEQ ID NO.3所示基因PDI导入宿主菌构建获得的。本发明首次将腺苷水解酶在毕赤酵母中以分泌表达方式高效表达，并且组合应用了基因高拷贝、抗性可循环使用表达载体、HAC1和PDI基因导入等强化蛋白表达的策略，提高了重组酶的生产效率；本发明得到的菌株WC‑5在5L发酵罐中采用补料分批高密度发酵方法，腺苷水解酶蛋白表达量为500mg/L。发酵液上清粗酶液可应用于腺苷及鸟苷的水解反应。