一种解脂耶氏酵母高拷贝数转化子的制备方法

    公开(公告)号:CN119639792A

    公开(公告)日:2025-03-18

    申请号:CN202411891032.5

    申请日:2024-12-20

    Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,公开了一种解脂耶氏酵母高拷贝数转化子的制备方法。本发明方法通过将不带同源臂的DL4基因表达盒与营养缺陷标记基因表达盒共同转入解脂耶氏酵母中,可以实现NEHJ效率明显提升。本发明方法不需要在表达的关键基因上加入同源臂,在代谢改造过程中,将不带同源臂的DL4表达盒和关键基因共同转入解脂耶氏酵母细胞,DL4能够促进非同源过程的进行,使得外源基因随机插入基因组DNA的概率增大,提高NHEJ效率。因此,当关键基因为营养缺陷筛选标记时,较大菌落基本比较小菌落的关键基因拷贝数更高。综上所述,实现了构建解脂耶氏酵母高拷贝数转化子的简便方法。

    一种解酯耶氏酵母YW100-1及其应用

    公开(公告)号:CN110499259B

    公开(公告)日:2021-07-27

    申请号:CN201910661781.1

    申请日:2019-07-22

    Abstract: 本发明公开了一种解酯耶氏酵母YW100‑1及其应用,所述解酯耶氏酵母YW100‑1是在解酯耶氏酵母中过表达甘油代谢中甘油激酶GUT1,甘油激酶GUT2,甘油脱氢酶酶GCY1,二羟基丙酮激酶DAK1,二羟基丙酮激酶DAK2和NADH激酶POS5,同时敲除解酯耶氏酵母中二酰基甘油酰基转移酶基因DGA2和3‑磷酸甘油脱氢酶基因GPD2获得的。本发明菌株以甘油为碳源时,丙酮酸产量增加了66.2%,达到121.2g/L,为丙酮酸工业化生产提供了优良菌株。

    一种解酯耶氏酵母YW100-1及其应用

    公开(公告)号:CN110499259A

    公开(公告)日:2019-11-26

    申请号:CN201910661781.1

    申请日:2019-07-22

    Abstract: 本发明公开了一种解酯耶氏酵母YW100-1及其应用,所述解酯耶氏酵母YW100-1是在解酯耶氏酵母中过表达甘油代谢中甘油激酶GUT1,甘油激酶GUT2,甘油脱氢酶酶GCY1,二羟基丙酮激酶DAK1,二羟基丙酮激酶DAK2和NADH激酶POS5,同时敲除解酯耶氏酵母中二酰基甘油酰基转移酶基因DGA2和3-磷酸甘油脱氢酶基因GPD2获得的。本发明菌株以甘油为碳源时,丙酮酸产量增加了66.2%,达到121.2g/L,为丙酮酸工业化生产提供了优良菌株。

    一种高产植物鞘氨醇的酿酒酵母菌株

    公开(公告)号:CN116103176A

    公开(公告)日:2023-05-12

    申请号:CN202310038181.6

    申请日:2023-01-10

    Abstract: 本发明提供一种高产植物鞘氨醇的酿酒酵母菌株,本发明在高产植物鞘氨醇的酿酒酵母的基础上,构建高效合成植物鞘氨醇的酿酒酵母工程菌株,将LCB4、SHM2、CHA1、ORM2、ELO3、SHM1基因编码的蛋白质的表达降低和利用组成型启动子将TSC10、SYR2、LCB2基因编码蛋白质的表达提高,植物鞘氨醇摇瓶量达到9.52mg/g干重,再通过组成型启动子将HAC1基因编码蛋白质的表达提高,植物鞘氨醇摇瓶量进一步提高了4.34倍,达到41.33mg/g干重,植物鞘氨醇产量达到为目前报道的摇瓶发酵最高产量。5L发酵罐发酵产植物鞘氨醇的产量达到了150.54mg/g干重,滴度为2817mg/L。

    一种脂肪酶在拆分N-乙酰-DL-甲硫氨酸甲酯中的应用

    公开(公告)号:CN109628544B

    公开(公告)日:2022-03-15

    申请号:CN201910057292.5

    申请日:2019-01-22

    Abstract: 本发明提供了一种脂肪酶在拆分N‑乙酰‑DL‑甲硫氨酸甲酯中的应用,所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明脂肪酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒,再转化至大肠杆菌菌株中,获得重组大肠杆菌工程菌;该重组大肠杆菌经细胞破碎,分离纯化获得重组脂肪酶;该重组脂肪酶具有催化拆分N‑乙酰‑DL‑甲硫氨酸甲酯的能力,可以获得N‑乙酰‑L‑蛋氨酸甲酯,对映体过量值>99%和转化率达到51.2%。

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