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公开(公告)号:CN112080439A
公开(公告)日:2020-12-15
申请号:CN202010749082.5
申请日:2020-07-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种人源细胞凋亡调控蛋白Bcl‑2在提高酿酒酵母橙花叔醇产量中的应用,本发明只需要简单地在含橙花叔醇合成酶基因的酿酒酵母工程菌中过表达人源抗凋亡调控蛋白Bcl‑2编码基因,就可以促进橙花叔醇合成,橙花叔醇摇瓶量提高了77.7%,达到594.1mg/L。向培养基中添加脂肪酸后,橙花叔醇摇瓶产量进一步提高至725.5mg/L,为目前报道的摇瓶发酵最高产量。
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公开(公告)号:CN112080439B
公开(公告)日:2023-01-10
申请号:CN202010749082.5
申请日:2020-07-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种人源细胞凋亡调控蛋白Bcl‑2在提高酿酒酵母橙花叔醇产量中的应用,本发明只需要简单地在含橙花叔醇合成酶基因的酿酒酵母工程菌中过表达人源抗凋亡调控蛋白Bcl‑2编码基因,就可以促进橙花叔醇合成,橙花叔醇摇瓶量提高了77.7%,达到594.1mg/L。向培养基中添加脂肪酸后,橙花叔醇摇瓶产量进一步提高至725.5mg/L,为目前报道的摇瓶发酵最高产量。
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公开(公告)号:CN110484572B
公开(公告)日:2021-04-06
申请号:CN201910814145.8
申请日:2019-08-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母橙花叔醇产量的方法,所述方法为:在敲除Gal80基因的酿酒酵母中,使用Gal启动子驱动甲羟戊酸途径代谢酶和橙花叔醇合成酶的表达形成二次生长诱导系统,同时过表达转录因子hac1基因,构建得到合成橙花叔醇的酵母工程菌。本发明使用酵母二次生长诱导系统进行代谢改造,当GAL启动子驱动的表达盒大量整合在基因组上后,GAL启动子的转录活性大幅度下降,而本发明中过表达转录因子Hac1则可以提高GAL启动子的转录活性和菌株活力,进而促进二次生长诱导系统中目标代谢产物的合成,橙花叔醇产量提高了48.4%,达到497mg/L。
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公开(公告)号:CN110484572A
公开(公告)日:2019-11-22
申请号:CN201910814145.8
申请日:2019-08-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母橙花叔醇产量的方法,所述方法为:在敲除Gal80基因的酿酒酵母中,使用Gal启动子驱动甲羟戊酸途径代谢酶和橙花叔醇合成酶的表达形成二次生长诱导系统,同时过表达转录因子hac1基因,构建得到合成橙花叔醇的酵母工程菌。本发明使用酵母二次生长诱导系统进行代谢改造,当GAL启动子驱动的表达盒大量整合在基因组上后,GAL启动子的转录活性大幅度下降,而本发明中过表达转录因子Hac1则可以提高GAL启动子的转录活性和菌株活力,进而促进二次生长诱导系统中目标代谢产物的合成,橙花叔醇产量提高了48.4%,达到497mg/L。
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公开(公告)号:CN119639792A
公开(公告)日:2025-03-18
申请号:CN202411891032.5
申请日:2024-12-20
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明涉及生物工程技术领域,公开了一种解脂耶氏酵母高拷贝数转化子的制备方法。本发明方法通过将不带同源臂的DL4基因表达盒与营养缺陷标记基因表达盒共同转入解脂耶氏酵母中,可以实现NEHJ效率明显提升。本发明方法不需要在表达的关键基因上加入同源臂,在代谢改造过程中,将不带同源臂的DL4表达盒和关键基因共同转入解脂耶氏酵母细胞,DL4能够促进非同源过程的进行,使得外源基因随机插入基因组DNA的概率增大,提高NHEJ效率。因此,当关键基因为营养缺陷筛选标记时,较大菌落基本比较小菌落的关键基因拷贝数更高。综上所述,实现了构建解脂耶氏酵母高拷贝数转化子的简便方法。
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公开(公告)号:CN110499259B
公开(公告)日:2021-07-27
申请号:CN201910661781.1
申请日:2019-07-22
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种解酯耶氏酵母YW100‑1及其应用,所述解酯耶氏酵母YW100‑1是在解酯耶氏酵母中过表达甘油代谢中甘油激酶GUT1,甘油激酶GUT2,甘油脱氢酶酶GCY1,二羟基丙酮激酶DAK1,二羟基丙酮激酶DAK2和NADH激酶POS5,同时敲除解酯耶氏酵母中二酰基甘油酰基转移酶基因DGA2和3‑磷酸甘油脱氢酶基因GPD2获得的。本发明菌株以甘油为碳源时,丙酮酸产量增加了66.2%,达到121.2g/L,为丙酮酸工业化生产提供了优良菌株。
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公开(公告)号:CN110499259A
公开(公告)日:2019-11-26
申请号:CN201910661781.1
申请日:2019-07-22
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种解酯耶氏酵母YW100-1及其应用,所述解酯耶氏酵母YW100-1是在解酯耶氏酵母中过表达甘油代谢中甘油激酶GUT1,甘油激酶GUT2,甘油脱氢酶酶GCY1,二羟基丙酮激酶DAK1,二羟基丙酮激酶DAK2和NADH激酶POS5,同时敲除解酯耶氏酵母中二酰基甘油酰基转移酶基因DGA2和3-磷酸甘油脱氢酶基因GPD2获得的。本发明菌株以甘油为碳源时,丙酮酸产量增加了66.2%,达到121.2g/L,为丙酮酸工业化生产提供了优良菌株。
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公开(公告)号:CN117363501A
公开(公告)日:2024-01-09
申请号:CN202311202229.9
申请日:2023-09-18
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开一种重组酿酒酵母工程菌及其在富集铁元素中的应用,所述的重组酿酒酵母工程菌是将CUP1、SUL2、CCC1、COT1和CPY基因插入酿酒酵母的多拷贝位点rDNA构建获得的。本发明构建的酿酒酵母工程菌株对培养基中微量铁元素的富集率为66.10%,对比出发菌株,其铁富集率提高了51.02%,为生产微量铁元素富集酵母提供一个有效的策略。
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公开(公告)号:CN116103176A
公开(公告)日:2023-05-12
申请号:CN202310038181.6
申请日:2023-01-10
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供一种高产植物鞘氨醇的酿酒酵母菌株,本发明在高产植物鞘氨醇的酿酒酵母的基础上,构建高效合成植物鞘氨醇的酿酒酵母工程菌株,将LCB4、SHM2、CHA1、ORM2、ELO3、SHM1基因编码的蛋白质的表达降低和利用组成型启动子将TSC10、SYR2、LCB2基因编码蛋白质的表达提高,植物鞘氨醇摇瓶量达到9.52mg/g干重,再通过组成型启动子将HAC1基因编码蛋白质的表达提高,植物鞘氨醇摇瓶量进一步提高了4.34倍,达到41.33mg/g干重,植物鞘氨醇产量达到为目前报道的摇瓶发酵最高产量。5L发酵罐发酵产植物鞘氨醇的产量达到了150.54mg/g干重,滴度为2817mg/L。
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公开(公告)号:CN109628544B
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN201910057292.5
申请日:2019-01-22
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供了一种脂肪酶在拆分N‑乙酰‑DL‑甲硫氨酸甲酯中的应用,所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码基因如SEQ ID NO.2所示。本发明脂肪酶基因可与表达载体连接构建得到含该基因的胞内表达重组质粒,再转化至大肠杆菌菌株中,获得重组大肠杆菌工程菌;该重组大肠杆菌经细胞破碎,分离纯化获得重组脂肪酶;该重组脂肪酶具有催化拆分N‑乙酰‑DL‑甲硫氨酸甲酯的能力,可以获得N‑乙酰‑L‑蛋氨酸甲酯,对映体过量值>99%和转化率达到51.2%。
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