一种D-转氨酶突变体及在制备L-草铵膦中的应用

    公开(公告)号:CN115786298B

    公开(公告)日:2025-05-06

    申请号:CN202211610622.7

    申请日:2022-12-14

    Abstract: 本发明公开了一种D‑转氨酶突变体及在制备L‑草铵膦中的应用,所述D‑转氨酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第265位色氨酸突变为丝氨酸。本发明D‑转氨酶突变体具有高对映选择性(ee>99.9%),仅仅催化D‑草铵膦转化为4‑(羟基(甲基)磷酰基)‑2‑氧代丁酸,L‑草铵膦得以保留,降低了反应难度。采用一锅法,以市售的D,L‑草铵膦为底物,将无除草活力的D‑草铵膦合成L‑草铵膦,具有更高的原子利用效率,符合绿色化学的要求。操作简单,在温和的反应条件下进行,适合大规模生产,具有工业化应用的潜力,L‑草铵膦产物的产率高达100%,对映体过量(ee)大于99.9%。

    一种羰基还原酶突变体及其在制备地尔硫卓关键中间体中的应用

    公开(公告)号:CN119876067A

    公开(公告)日:2025-04-25

    申请号:CN202510116748.6

    申请日:2025-01-24

    Abstract: 本发明涉及一种羰基还原酶突变体及其在制备地尔硫卓关键中间体中的应用,属于生物工程技术领域。具体涉及一种比活力显著提高的来源于近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)的羰基还原酶突变体,其编码核酸,含有所述重组羰基还原酶突变体基因的重组表达载体和重组表达转化体,以及利用所述羰基还原酶突变体作为催化剂在制备地尔硫卓关键中间体2‑氯‑3‑(4‑甲氧基苯基)‑3(S)‑羟基丙酸甲酯中的应用。与母本酶相比,本发明所述羰基还原酶突变体催化不对称还原制备手性羟基化合物2‑氯‑3(S)‑羟基‑3‑苯丙酸甲酯的比活力有大幅度提高。所述手性羟基化合物能够进一步通过分子内环化生成心血管药物地尔硫卓手性中间体‑(2R,3S)‑对甲氧苯基缩水甘油酸甲酯,具有良好的工业应用前景。

    一种Baeyer-Villiger单加氧酶突变体、工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN118956794B

    公开(公告)日:2025-04-22

    申请号:CN202411440514.9

    申请日:2024-10-16

    Applicant: 鲁东大学

    Abstract: 本发明公开了一种Baeyer‑Villiger单加氧酶突变体、工程菌及其应用,属于酶工程领域。Baeyer‑Villiger单加氧酶基因来源于Pseudomonas fluorescens ACB,其密码子优化后的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;所述突变体是在SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第213位丙氨酸突变为谷氨酰胺、第312位甘氨酸突变为丙氨酸以及第434位丝氨酸获得。本发明构建的Baeyer‑Villiger单加氧酶突变体工程菌株,较原始酶活提高189.2%,成功用于(S)‑5‑氯‑2,3‑二氢‑2‑羟基‑1‑氧代‑1H‑茚‑2‑羧酸甲酯的酶法合成,解决了化学法合成的成本高、光学选择性差及产率低的问题,实现了高产率绿色生产。

    生物催化合成光学纯2R-氟代羧酸和2R-羟基羧酸的方法

    公开(公告)号:CN119752839A

    公开(公告)日:2025-04-04

    申请号:CN202411714030.9

    申请日:2024-11-27

    Abstract: 本发明公开了生物催化合成光学纯2R‑氟代羧酸和2R‑羟基羧酸的方法,属于生物工程技术领域。以α‑氟酸和/或α‑氟酸衍生物作为底物,以氟乙酸脱卤酶突变体K181M、K181S、W185G、K181M‑W185Y、K181S‑W185A、K181S‑W185C、K181S‑W185G、K181S‑W185V为生物催化剂,水解脱氟得到手性纯的2R‑氟代羧酸和2R‑羟基羧酸及其衍生物。本发明立体选择性强,步骤简单,解决目前手性化合物合成广泛存在的光学纯度低、产率低和污染环境等问题。另外,本发明方法以全细胞为催化剂将反应体系放大至克级实验,得到了产率和ee值较高的产物,成本低廉,能耗低,适于工业生产。

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