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公开(公告)号:CN119931987A
公开(公告)日:2025-05-06
申请号:CN202510066855.2
申请日:2025-01-16
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种酯酶突变体、工程菌及在拆分R,S‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸甲酯中的应用,本发明提供的酯酶突变体的编码基因能够在大肠杆菌中进行克隆和表达,突变酯酶对R,S‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸甲酯有高的R‑选择性。利用突变酯酶WZest‑W23T重组菌湿菌体催化水解底物,底物浓度5g/L,反应10min,底物的转化率达到了44.64%,产物R‑2,6‑二甲基苯基氨基丙酸的eep值为94.70%,对映体选择率E值达到85.0。
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公开(公告)号:CN115786298B
公开(公告)日:2025-05-06
申请号:CN202211610622.7
申请日:2022-12-14
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种D‑转氨酶突变体及在制备L‑草铵膦中的应用,所述D‑转氨酶突变体是将SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第265位色氨酸突变为丝氨酸。本发明D‑转氨酶突变体具有高对映选择性(ee>99.9%),仅仅催化D‑草铵膦转化为4‑(羟基(甲基)磷酰基)‑2‑氧代丁酸,L‑草铵膦得以保留,降低了反应难度。采用一锅法,以市售的D,L‑草铵膦为底物,将无除草活力的D‑草铵膦合成L‑草铵膦,具有更高的原子利用效率,符合绿色化学的要求。操作简单,在温和的反应条件下进行,适合大规模生产,具有工业化应用的潜力,L‑草铵膦产物的产率高达100%,对映体过量(ee)大于99.9%。
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公开(公告)号:CN119876087A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510309699.8
申请日:2025-01-08
Applicant: 浙江工业大学 , 华东合成生物学产业技术研究院
Abstract: 本发明属于生物制药和生物转化领域,具体涉及脂肪酶突变体及其在制备(S)‑3‑环己烯‑1‑甲酸中的应用。本发明的脂肪酶CALB突变体是将如SEQ ID NO.1所示氨基酸序列第40位、134位、154位、189位、278位、281位采取单点突变或者组合突变获得的。该突变体相比于野生型在催化外消旋3‑环己烯‑1‑甲酸甲酯生产(S)‑3‑环己烯‑1‑甲酸反应时的立体选择性大大提高。相比较于传统化学法制备(S)‑3‑环己烯‑1‑甲酸,本发明提供的脂肪酶CALB突变体立体选择性高,反应条件温和,对环境友好,且对设备要求降低,大大减少了生产成本,在工业化应用中显示出广泛的应用前景。
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公开(公告)号:CN119876067A
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202510116748.6
申请日:2025-01-24
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明涉及一种羰基还原酶突变体及其在制备地尔硫卓关键中间体中的应用,属于生物工程技术领域。具体涉及一种比活力显著提高的来源于近平滑假丝酵母(Candida parapsilosis)的羰基还原酶突变体,其编码核酸,含有所述重组羰基还原酶突变体基因的重组表达载体和重组表达转化体,以及利用所述羰基还原酶突变体作为催化剂在制备地尔硫卓关键中间体2‑氯‑3‑(4‑甲氧基苯基)‑3(S)‑羟基丙酸甲酯中的应用。与母本酶相比,本发明所述羰基还原酶突变体催化不对称还原制备手性羟基化合物2‑氯‑3(S)‑羟基‑3‑苯丙酸甲酯的比活力有大幅度提高。所述手性羟基化合物能够进一步通过分子内环化生成心血管药物地尔硫卓手性中间体‑(2R,3S)‑对甲氧苯基缩水甘油酸甲酯,具有良好的工业应用前景。
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公开(公告)号:CN118956794B
公开(公告)日:2025-04-22
申请号:CN202411440514.9
申请日:2024-10-16
Applicant: 鲁东大学
Abstract: 本发明公开了一种Baeyer‑Villiger单加氧酶突变体、工程菌及其应用,属于酶工程领域。Baeyer‑Villiger单加氧酶基因来源于Pseudomonas fluorescens ACB,其密码子优化后的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示;所述突变体是在SEQ ID NO:2所示氨基酸序列第213位丙氨酸突变为谷氨酰胺、第312位甘氨酸突变为丙氨酸以及第434位丝氨酸获得。本发明构建的Baeyer‑Villiger单加氧酶突变体工程菌株,较原始酶活提高189.2%,成功用于(S)‑5‑氯‑2,3‑二氢‑2‑羟基‑1‑氧代‑1H‑茚‑2‑羧酸甲酯的酶法合成,解决了化学法合成的成本高、光学选择性差及产率低的问题,实现了高产率绿色生产。
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公开(公告)号:CN119823958A
公开(公告)日:2025-04-15
申请号:CN202510069395.9
申请日:2025-01-16
Applicant: 河北工业大学
Abstract: 本发明提供酮还原酶突变体,其氨基酸序列是在对序列表SEQ ID No.1所示序列进行突变而来,所述突变包括对序列表SEQ ID No.1所示序列中的第24、25、116、193、234、238、245位氨基酸至少一个突变。本发明还提供相应的核酸、重组表达载体、基因工程菌及其在合成(R)‑邻氯扁桃酸甲酯中的应用。本发明的酮还原酶突变体可以催化高浓度邻氯苯甲酰甲酸甲酯为底物的不对称还原反应合成(R)‑邻氯扁桃酸甲酯,产率高且满足99%+立体选择性的要求,具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN119799687A
公开(公告)日:2025-04-11
申请号:CN202411808573.7
申请日:2024-12-10
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明提供了一种用于对羟基苯甘氨酸外消旋化的消旋酶突变体及其应用,属于生物工程技术领域。本发明以L‑对羟基苯甘氨酸和PLP为原料,利用活性被提高的消旋酶(LbAAR)突变体进行L‑对羟基苯甘氨酸的外消旋化,整体催化过程绿色简单高效。其中,野生型对底物L‑HPG未检测到活性,通过突变L307S获得了对底物L‑HPG的活性,此外,最优突变体的酶活可达到115.2μmol/min/g,相较M1提高了16.5倍,极大提高了此酶的活性。本发明为快速对羟基苯甘氨酸的外消旋化提供了新思路。
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公开(公告)号:CN119752839A
公开(公告)日:2025-04-04
申请号:CN202411714030.9
申请日:2024-11-27
Applicant: 湖南师范大学
Abstract: 本发明公开了生物催化合成光学纯2R‑氟代羧酸和2R‑羟基羧酸的方法,属于生物工程技术领域。以α‑氟酸和/或α‑氟酸衍生物作为底物,以氟乙酸脱卤酶突变体K181M、K181S、W185G、K181M‑W185Y、K181S‑W185A、K181S‑W185C、K181S‑W185G、K181S‑W185V为生物催化剂,水解脱氟得到手性纯的2R‑氟代羧酸和2R‑羟基羧酸及其衍生物。本发明立体选择性强,步骤简单,解决目前手性化合物合成广泛存在的光学纯度低、产率低和污染环境等问题。另外,本发明方法以全细胞为催化剂将反应体系放大至克级实验,得到了产率和ee值较高的产物,成本低廉,能耗低,适于工业生产。
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公开(公告)号:CN119685279A
公开(公告)日:2025-03-25
申请号:CN202411846699.3
申请日:2024-12-16
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种高立体选择性的羰基还原酶、突变体及在不对称合成(S)‑玻色因中的应用,本发明中的羰基还原酶、突变体均能催化50‑1000mM的β‑丙酮木糖苷不对称还原制备(S)‑玻色因,底物转化率大于99%,产物为光学纯的(S)‑玻色因,手性纯度大于99%,具有较高的工业化应用潜力。
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