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公开(公告)号:CN110484572B
公开(公告)日:2021-04-06
申请号:CN201910814145.8
申请日:2019-08-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母橙花叔醇产量的方法,所述方法为:在敲除Gal80基因的酿酒酵母中,使用Gal启动子驱动甲羟戊酸途径代谢酶和橙花叔醇合成酶的表达形成二次生长诱导系统,同时过表达转录因子hac1基因,构建得到合成橙花叔醇的酵母工程菌。本发明使用酵母二次生长诱导系统进行代谢改造,当GAL启动子驱动的表达盒大量整合在基因组上后,GAL启动子的转录活性大幅度下降,而本发明中过表达转录因子Hac1则可以提高GAL启动子的转录活性和菌株活力,进而促进二次生长诱导系统中目标代谢产物的合成,橙花叔醇产量提高了48.4%,达到497mg/L。
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公开(公告)号:CN110484572A
公开(公告)日:2019-11-22
申请号:CN201910814145.8
申请日:2019-08-30
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江医药股份有限公司昌海生物分公司
Abstract: 本发明公开了一种提高酿酒酵母橙花叔醇产量的方法,所述方法为:在敲除Gal80基因的酿酒酵母中,使用Gal启动子驱动甲羟戊酸途径代谢酶和橙花叔醇合成酶的表达形成二次生长诱导系统,同时过表达转录因子hac1基因,构建得到合成橙花叔醇的酵母工程菌。本发明使用酵母二次生长诱导系统进行代谢改造,当GAL启动子驱动的表达盒大量整合在基因组上后,GAL启动子的转录活性大幅度下降,而本发明中过表达转录因子Hac1则可以提高GAL启动子的转录活性和菌株活力,进而促进二次生长诱导系统中目标代谢产物的合成,橙花叔醇产量提高了48.4%,达到497mg/L。
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公开(公告)号:CN116103176B
公开(公告)日:2025-05-13
申请号:CN202310038181.6
申请日:2023-01-10
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供一种高产植物鞘氨醇的酿酒酵母菌株,本发明在高产植物鞘氨醇的酿酒酵母的基础上,构建高效合成植物鞘氨醇的酿酒酵母工程菌株,将LCB4、SHM2、CHA1、ORM2、ELO3、SHM1基因编码的蛋白质的表达降低和利用组成型启动子将TSC10、SYR2、LCB2基因编码蛋白质的表达提高,植物鞘氨醇摇瓶量达到9.52mg/g干重,再通过组成型启动子将HAC1基因编码蛋白质的表达提高,植物鞘氨醇摇瓶量进一步提高了4.34倍,达到41.33mg/g干重,植物鞘氨醇产量达到为目前报道的摇瓶发酵最高产量。5L发酵罐发酵产植物鞘氨醇的产量达到了150.54mg/g干重,滴度为2817mg/L。
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公开(公告)号:CN119391691A
公开(公告)日:2025-02-07
申请号:CN202411735598.9
申请日:2024-11-29
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江诺必达生物医药有限公司
IPC: C12N11/18 , C12N11/082 , C12N9/18 , C12N9/42 , C12N15/80
Abstract: 本申请属于生物催化技术领域,具体涉及一种固定化单宁酶及其制备方法与应用。本申请通过将螯合树脂与氯化镍溶液混合,使树脂上的螯合基团与镍离子形成稳定的配合物,构建镍离子螯合树脂,利用了螯合树脂对特定金属离子的高度选择性,确保了镍离子的有效固定。通过将镍离子螯合树脂与单宁酶酶液混合,利用单宁酶分子表面的特定氨基酸残基与镍离子之间的高亲和力,实现单宁酶在树脂上的高效固定。此外,以栀子苷的酶解获得的含京尼平溶液为交联剂,操作简单,不仅避免了京尼平提取过程中的环境污染问题,还降低了成本。本申请固定化过程能够显著提高单宁酶的热稳定性和相对较高的可重用性,是一种绿色高效的新型酶固定方法,具有较高的实用价值。
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公开(公告)号:CN119391662A
公开(公告)日:2025-02-07
申请号:CN202411735597.4
申请日:2024-11-29
Applicant: 浙江工业大学 , 浙江诺必达生物医药有限公司
IPC: C12N9/02 , C12N15/53 , C12N15/80 , C02F3/34 , C02F101/34
Abstract: 本申请属于生物工程技术领域,具体涉及一种多酚氧化酶及其制备方法与应用。本发明将双孢蘑菇来源的多酚氧化酶AbPPO基因通过黑曲霉密码子优化后进行基因合成,构建AbPPO基因表达盒,利用CRISPR/Cas9技术,以hygB为筛选标签,通过PEG介导的原生质体转化法转化到黑曲霉中,筛选得到酶活力最高的转化菌株,并将所述重组酶用于催化邻苯二酚降解,其降解率可达99.6%。本发明提供的操作方法简单安全、生产成本低,且制备条件温和,在有机酚污染物处理领域因具有绿色高效的优势,体现出了较高的经济价值和社会效益。
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公开(公告)号:CN116808053A
公开(公告)日:2023-09-29
申请号:CN202310763356.X
申请日:2023-06-27
Applicant: 浙江工业大学
IPC: A61K31/702 , A61K31/732 , A61K33/04 , A61P39/06 , B82Y5/00 , C12P19/00 , C12P19/12 , C12P19/04
Abstract: 本发明公开了一种果胶寡糖纳米硒复合物及其制备方法和应用,将柑橘皮粉末加入水中,调节pH至酸性,添加果胶裂解酶,搅拌浸提酶解反应,并进一步加入碘化钾、抗坏血环酸和四价硒源,进行水浴反应之后,将所得反应液进行透析得到果胶寡糖纳米硒复合物溶液,再将其冷冻干燥成粉末状固体,即可得到果胶寡糖纳米硒复合物。本发明以果胶寡糖裂解液为稳定剂,制备的果胶寡糖纳米硒复合物具有粒径小、稳定性好、有较好的抗氧化能力。且方法操作简单便捷、条件温和、能耗低、污染小。
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公开(公告)号:CN116590277A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310542176.9
申请日:2023-05-12
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种通过原生质体自融合提高胶红酵母类胡萝卜素产量的方法,以胶红酵母1725作为出发菌株,制备原生质体,通过原生质体融合技术使得胶红酵母1725原生质体发生自体融合,从而获得多倍体融合子,从融合子菌落通过摇瓶发酵筛选得到高产类胡萝卜素菌株。与出发菌株相比,融合子菌株类胡萝卜素含量与生物量明显提高。
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公开(公告)号:CN115927285A
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN202211686468.1
申请日:2022-12-26
Applicant: 浙江工业大学
IPC: C12N11/082 , C12N11/089 , C12N11/087 , C12N9/20 , C12N9/50 , C12N9/88 , C12N9/18 , C12N9/16
Abstract: 本发明公开了一种降低大孔吸附树脂固定化酶蛋白泄露的方法,所述方法是以大孔吸附树脂为载体吸附酶蛋白,然后再在吸附酶蛋白的树脂表面涂覆一层有机聚合物溶液涂层,实现降低大孔吸附树脂固定化酶蛋白泄露的目的;本发明有机聚合物涂层表面有均匀的通道结构,通过孔径大小筛选机制,既保证底物可以快速扩散到涂层内部,又有效地减少了涂层内的蛋白泄漏。有机聚合物涂层后的固定化酶酶活为未涂层固定化酶的100.3%,前者的蛋白泄露率仅为后者的23.8%。该方法属于物理固定化方法,可以避免酶与载体发生不必要的化学反应,从而不会改变酶蛋白本身的催化活性,是一种提高酶的稳定性同时降低酶蛋白泄露的有效固定化方法。
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公开(公告)号:CN110438194B
公开(公告)日:2021-06-08
申请号:CN201910687634.1
申请日:2019-07-29
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明提供了一种脂肪酶在制备D‑托品酸甲酯中的应用,所述脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,其编码基因如SEQ ID NO.2所示。以重组脂肪酶工程菌发酵培养获得的湿菌体经冷冻干燥后得到的冻干菌体为催化剂,外消旋托品酸甲酯为底物,以pH7.0磷酸缓冲溶液为反应介质,进行拆分制备D‑托品酸甲酯,对映体过量值>99%,D‑托品酸甲酯的收率达到95.0%。
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公开(公告)号:CN110527646B
公开(公告)日:2021-05-11
申请号:CN201910766504.7
申请日:2019-08-20
Applicant: 浙江工业大学
Abstract: 本发明公开了一种热带芽孢杆菌WZZ018及其应用,所述的应用为:以热带芽孢杆菌WZZ018经发酵培养获得的湿菌体或冷冻干燥后的冻干菌粉为催化剂,以外消旋5‑氯‑2,3‑二氢‑2‑羟基‑1‑氧代‑1H‑茚‑2‑羧酸甲酯为底物,以pH值5.0~10.0的缓冲液为反应介质,在20~45℃、100~300r/min条件下进行拆分;本发明提供的产酶微生物菌株‑‑热带芽孢杆菌WZZ018的区域选择性强,制备的产物对映体过量值最高可达93.72%,反应转化率高,酶反应条件温和、副产物少,环境污染小,是一种高效制备高纯度对映体的方法,适合工业化生产。
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